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DNA电化学生物传感器在DNA甲基转移酶活性及肿瘤细胞外泌体分析检测中的应用研究

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DNA电化学生物传感器在DNA甲基转移酶活性及肿瘤细胞外泌体分析检测中的应用研究
论文目录
 
中文摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 绪论第9-21页
  1.1 引言第9-10页
  1.2 DNA电化学生物传感器第10-15页
    1.2.1 DNA电化学生物传感器的构成和工作原理第10-11页
    1.2.2 DNA电化学生物传感器的信号检测第11-12页
    1.2.3 DNA电化学生物传感器的应用第12-14页
    1.2.4 DNA电化学生物传感器的展望第14-15页
  1.3 DNA甲基化第15-17页
    1.3.1 DNA甲基化的分析方法第16-17页
    1.3.2 DNA甲基化分析在癌症诊断和治疗中的应用第17页
  1.4 外泌体第17-20页
    1.4.1 外泌体的生物学意义第18-19页
    1.4.2 外泌体的分离与检测第19-20页
  1.5 本论文的指导思想第20-21页
第二章 基于内切酶特异性剪切的DNA电化学生物传感器检测人类DNA甲基转移酶(DNMT1)的活性第21-34页
  2.1 引言第21-22页
  2.2 实验部分第22-24页
    2.2.1 试剂第22-23页
    2.2.2 仪器第23页
    2.2.3 细胞培养和DNMT1提取第23页
    2.2.4 金纳米粒子连接DNA复合物(Au NP-DNA Complexes)的制备第23-24页
    2.2.5 探针DNA的固定及杂交第24页
    2.2.6 电化学表征与检测第24页
  2.3 结果与讨论第24-32页
    2.3.1 DNMT1活性检测的原理第24-26页
    2.3.2 Au NPs和Au NPs-DNA Complexes的表征第26页
    2.3.3 实验可行性分析第26-29页
    2.3.4 Au NPs上连接的S2、S3的比例优化第29-30页
    2.3.5 DNMT1的活性检测第30-31页
    2.3.6 细胞裂解液中DNMT1的活性检测第31-32页
    2.3.7 DN-MT1活性和不同细胞系的DNMT1总蛋白含量评估第32页
  2.4 结论第32-34页
第三章 基于核酸外切酶Ⅲ循环剪切作用辅助信号放大方法检测LNCaP细胞来源的外泌体第34-47页
  3.1 引言第34-36页
  3.2 实验部分第36-40页
    3.2.1 试剂第36-37页
    3.2.2 仪器第37-38页
    3.2.3 细胞培养和外泌体提取第38页
    3.2.4 外泌体的定量第38-39页
    3.2.5 磁珠与Aptamers的连接第39页
    3.2.6 探针DNA的固定第39-40页
    3.2.7 外泌体与Aptamers的作用第40页
    3.2.8 电化学表征与检测第40页
  3.3 结果与讨论第40-46页
    3.3.1 外泌体的TEM表征第40-41页
    3.3.2 Aptamers与MBs连接的紫外吸收表征第41页
    3.3.3 实验可行性分析第41-43页
    3.3.4 探针DNA浓度优化第43页
    3.3.5 核酸外切酶Ⅲ作用时间优化第43-44页
    3.3.6 人前列腺癌细胞外泌体的检测第44-45页
    3.3.7 选择性分析第45页
    3.3.8 复杂体系中外泌体的检测第45-46页
  3.4 结论第46-47页
第四章 结论及主要创新点第47-49页
参考文献第49-64页
在读期间发表的学术论文及研究成果第64-65页
致谢第65页

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