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RNAi慢病毒载体的构建及对急性T系白血病细胞CD59因沉默效应的研究
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RNAi慢病毒载体的构建及对急性T系白血病细胞CD59因沉默效应的研究
论文目录
摘要
第1-4页
Abstract
第4-8页
引言
第8-11页
材料与方法
第11-30页
1 材料
第11-12页
1.1 主要实验仪器
第11页
1.2 病毒与细胞
第11页
1.3 实验动物
第11-12页
1.4 主要实验试剂
第12页
2 方法
第12-29页
2.1 技术路线
第12-15页
2.2 Jurkat细胞的培养
第15页
2.3 免疫荧光观察Jurkat细胞上CD59的表达量
第15-16页
2.4 RNAi慢病毒载体的构建和包装
第16-19页
2.5 慢病毒转染及转染效率的测定
第19-20页
2.6 RT-PCR检测CD59、Bcl-2、Bax的表达
第20-22页
2.7 Western-Blot检测CD59、Bcl-2、Bax、caspase-3、survivin的表达
第22-25页
2.8 激光共聚焦观察CD59分子的定位
第25页
2.9 ELISA检测IL-3、TNF-β的表达
第25-26页
2.10 CCK8检测细胞增殖活性
第26-27页
2.11 流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡
第27页
2.12 建立裸鼠动物实验模型
第27页
2.13 小鼠一般指标观察
第27-28页
2.14 流式细胞术检测小鼠外周血和骨髓中淋巴细胞凋亡水平
第28页
2.15 ELISA检测外周血清中CD59、IL-3、TNF-β的表达水平
第28-29页
3 统计学分析
第29-30页
结果
第30-47页
1 Jurkat细胞的培养
第30页
2 Jurkat细胞上CD59的表达水平
第30-31页
3 Jurkat细胞的慢病毒转染情况
第31-35页
4 RT-PCR检测相关mRNA的表达
第35-36页
5 Western-Blot检测相关蛋白的表达
第36-37页
6 CD59分子的定位
第37-38页
7 ELISA检测结果
第38-39页
8 细胞增殖活性情况
第39页
9 细胞凋亡水平
第39-41页
10 小鼠的一般情况
第41页
11 小鼠体质量的变化
第41-42页
12 外周血白细胞计数
第42-43页
13 小鼠外周血和骨髓中淋巴细胞凋亡情况
第43-46页
14 小鼠血清细胞因子的表达
第46-47页
讨论
第47-50页
结论
第50-51页
参考文献
第51-55页
综述
第55-66页
综述参考文献
第62-66页
攻读学位期间的研究成果
第66-67页
致谢
第67-68页
本篇论文共
68
页,
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。
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