论文目录 | |
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-20页 |
| 1 黄病毒简介 | 第12-15页 |
| 1.1 黄病毒属非编码区结构与功能 | 第12-13页 |
| 1.2 黄病毒属病毒基因结构与功能 | 第13-15页 |
| 2 鸭坦布苏病毒简介 | 第15-19页 |
| 2.1 历史 | 第15-16页 |
| 2.2 鸭坦布苏病毒的病原学特征 | 第16-19页 |
| 2.2.1 鸭坦布苏病毒的生物学性状 | 第16页 |
| 2.2.2 鸭坦布苏病毒的流行病学 | 第16-17页 |
| 2.2.3 鸭坦布苏病毒的致病性 | 第17页 |
| 2.2.4 鸭坦布苏病毒的检测与预防 | 第17-19页 |
| 3 研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 材料与方法 | 第20-32页 |
| 1.材料 | 第20-23页 |
| 1.1 病料来源 | 第20页 |
| 1.2 试验动物 | 第20页 |
| 1.3 主要试剂 | 第20页 |
| 1.4 主要器材 | 第20-21页 |
| 1.5 所用引物 | 第21-22页 |
| 1.6 主要溶液配制 | 第22-23页 |
| 1.6.1 PBS的配制（0.01M，pH=7.0~7.2） | 第22页 |
| 1.6.2 枸橼酸盐的配制 | 第22页 |
| 1.6.3 10%福尔马林溶液的配制 | 第22页 |
| 1.6.4 3%过氧化氢溶液的配制 | 第22-23页 |
| 1.6.5 DAB显色液的配制 | 第23页 |
| 1.6.6 细胞生长液 | 第23页 |
| 1.6.7 细胞维持液 | 第23页 |
| 2.方法 | 第23-32页 |
| 2.1 自然感染病鸭的临床症状及病理学变化的观察 | 第23-24页 |
| 2.1.1 自然感染蛋鸭临床症状及剖检病理变化的观察 | 第23页 |
| 2.1.2 自然感染蛋鸭的病理组织学变化的观察 | 第23页 |
| 2.1.3 自然感染病鸭各组织器官中的病毒分布的观察 | 第23-24页 |
| 2.2 病毒的分离增殖 | 第24-25页 |
| 2.2.1 病料的处理 | 第24页 |
| 2.2.2 鸭胚的接种及传代 | 第24-25页 |
| 2.2.3 病毒在DEF细胞上的增殖 | 第25页 |
| 2.3 病毒的鉴定 | 第25-28页 |
| 2.3.1 病毒的RT-PCR鉴定 | 第25-26页 |
| 2.3.2 BHK细胞适应实验 | 第26页 |
| 2.3.3 间接免疫荧光鉴定鸭坦布苏病毒 | 第26-27页 |
| 2.3.4 鸭坦布苏病毒形态的观察 | 第27页 |
| 2.3.5 病毒滴度的测定 | 第27页 |
| 2.3.6 鸭胚半数致死量（ELD50）的测定 | 第27-28页 |
| 2.3.7 病毒的血凝性检测 | 第28页 |
| 2.4 鸭坦布苏病毒全基因组序列的测定 | 第28-30页 |
| 2.4.1 样品的处理 | 第28页 |
| 2.4.2 组织总RNA提取 | 第28-29页 |
| 2.4.3 鸭坦布苏病毒总RNA反转录成cDNA | 第29页 |
| 2.4.4 PCR扩增基因片段 | 第29页 |
| 2.4.5 DNA片段的回收纯化 | 第29-30页 |
| 2.4.6 鸭坦布苏病毒非编码区序列的测定 | 第30页 |
| 2.5 鸭坦布苏病毒人工感染雏鸭的病理学变化的观察 | 第30-32页 |
| 结果 | 第32-57页 |
| 1.自然感染病鸭的临床症状及病理学变化的观察结果 | 第32-38页 |
| 1.1 自然感染蛋鸭的临床症状及剖检病理变化观察结果 | 第32-33页 |
| 1.2 自然感染病鸭的病理组织学变化观察结果 | 第33-36页 |
| 1.3 自然感染病鸭体内鸭坦布苏病毒的分布结果 | 第36-38页 |
| 2.病毒的分离增殖结果 | 第38-39页 |
| 2.1 感染鸭胚胚体病理变化观察结果 | 第38页 |
| 2.2 病毒尿囊液的RT-PCR检测结果 | 第38-39页 |
| 3.病毒的鉴定结果 | 第39-53页 |
| 3.1 鸭坦布苏病毒感染BHK细胞后的形态观察 | 第39-40页 |
| 3.2 病毒感染BHK细胞的间接免疫荧光检测的结果 | 第40-41页 |
| 3.3 鸭坦布苏病毒形态的观察 | 第41页 |
| 3.4 鸭坦布苏病毒的滴度测定结果 | 第41-42页 |
| 3.5 鸭胚半数致死量的测定结果 | 第42页 |
| 3.6 鸭坦布苏病毒的血凝性测定 | 第42-43页 |
| 3.7 鸭坦布苏病毒MC株全基因组的测定及分析 | 第43-49页 |
| 3.7.1 鸭坦布苏病毒全序列的测定结果 | 第43-47页 |
| 3.7.2 鸭坦布苏病毒氨基酸裂解位点预测 | 第47页 |
| 3.7.3 鸭坦布苏病毒氨基酸序列糖基化位点及半胱氨酸残基预测 | 第47页 |
| 3.7.4 鸭坦布苏病毒 5-NCR与 3-NCR的二级结构与分析 | 第47-49页 |
| 3.8 人工感染雏鸭 | 第49-53页 |
| 3.8.1 人工感染雏鸭的临床症状及病理学变化的观察 | 第49-50页 |
| 3.8.2 人工感染雏鸭鸭坦布苏病毒在体内的分布 | 第50-53页 |
| 4.讨论 | 第53-57页 |
| 4.1 鸭坦布苏病毒的分离与鉴定 | 第53页 |
| 4.2 自然感染的病变特征 | 第53-54页 |
| 4.3 病毒的分布特点 | 第54-55页 |
| 4.4 鸭坦布苏病毒的全序列分析 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-70页 |
| 附录：MC株鸭坦布苏病毒全序列 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
