论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略词表（Abbreviation） | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-18页 |
| 1.1 单克隆抗体概述 | 第13页 |
| 1.1.1 表位的分类与分析方法 | 第13页 |
| 1.1.2 单链抗体的研究进展 | 第13页 |
| 1.2 病毒受体概述 | 第13-14页 |
| 1.2.1 病毒与受体的结合 | 第13-14页 |
| 1.2.2 病毒受体的研究方法 | 第14页 |
| 1.3 鸭坦布苏病毒（DTMUV）简介 | 第14-17页 |
| 1.3.1 DTMUV的流行病学 | 第14-15页 |
| 1.3.2 DTMUV分子生物学特征 | 第15-16页 |
| 1.3.3 DTMUV E蛋白简介 | 第16-17页 |
| 1.4 DTMUV及其他黄病毒受体的研究现状 | 第17-18页 |
| 2 目的与意义 | 第18-19页 |
| 3 材料与方法 | 第19-37页 |
| 3.1 实验材料 | 第19-24页 |
| 3.1.1 细菌、细胞、毒株和实验动物 | 第19页 |
| 3.1.2 质粒与载体 | 第19页 |
| 3.1.3 引物序列 | 第19-21页 |
| 3.1.4 工具酶及主要试剂 | 第21-22页 |
| 3.1.5 培养基和抗生素的配制 | 第22-24页 |
| 3.1.6 主要实验仪器及设备 | 第24页 |
| 3.1.7 分子生物学分析软件 | 第24页 |
| 3.2 实验方法 | 第24-37页 |
| 3.2.1 细胞、病毒样品的总RNA的提取和cDNA的合成 | 第24-25页 |
| 3.2.2 目的基因的PCR扩增 | 第25页 |
| 3.2.3 PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第25页 |
| 3.2.4 外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第25-26页 |
| 3.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备（氯化钙法） | 第26页 |
| 3.2.6 质粒的制备与鉴定 | 第26-27页 |
| 3.2.7 质粒转染 | 第27-28页 |
| 3.2.8 免疫印迹法（Western Blot）检测分析 | 第28-29页 |
| 3.2.9 原核蛋白诱导表达与纯化 | 第29-30页 |
| 3.2.10 DTMUV-E单克隆抗体的制备与鉴定 | 第30-34页 |
| 3.2.11 DTMUV-E单克隆抗体抗原表位的鉴定 | 第34页 |
| 3.2.12 真核蛋白表达与纯化 | 第34-35页 |
| 3.2.13 细胞受体的筛选 | 第35-36页 |
| 3.2.14 统计学方法 | 第36-37页 |
| 4 结果与分析 | 第37-56页 |
| 4.1 DTMUV E单克隆抗体的制备与鉴定 | 第37-43页 |
| 4.1.1 截短E基因序列比对分析 | 第37-38页 |
| 4.1.2 E蛋白原核重组载体的构建表达与纯化 | 第38-39页 |
| 4.1.3 E蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 | 第39-42页 |
| 4.1.4 中和抗体的筛选 | 第42-43页 |
| 4.2 E蛋白中和表位的鉴定 | 第43-48页 |
| 4.2.1 单克隆抗体结合E蛋白结构域的筛选 | 第43-45页 |
| 4.2.2 3B8G单克隆抗体抗原表位的鉴定 | 第45-48页 |
| 4.2.3 3B8G单克隆抗体交叉结合反应分析 | 第48页 |
| 4.3 抗DTMUV E蛋白ScFv的制备与鉴定 | 第48-51页 |
| 4.3.1 单克隆抗体 κ 轻链可变区的序列测定与分析 | 第48-49页 |
| 4.3.2 抗DTMUV E蛋白ScFv的制备与鉴定 | 第49-51页 |
| 4.4 DTMUV E蛋白受体的筛选 | 第51-56页 |
| 4.4.1 EDIII蛋白真核分泌表达与纯化 | 第51-52页 |
| 4.4.2 E蛋白及其截短蛋白结合DTMUV易感细胞的分析 | 第52-53页 |
| 4.4.3 VOPBA筛选DTMUV受体 | 第53-54页 |
| 4.4.4 Co-IP筛选DTMUV受体 | 第54-55页 |
| 4.4.5 DTMUV E蛋白的血凝试验 | 第55-56页 |
| 5 讨论 | 第56-59页 |
| 5.1 DTMUV E蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 | 第56页 |
| 5.2 DTMUV E蛋白中和抗原表位的鉴定 | 第56-57页 |
| 5.3 抗DTMUV E蛋白ScFv的制备与鉴定 | 第57页 |
| 5.4 DTMUV E蛋白受体的筛选 | 第57-59页 |
| 6 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
