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卵黄高磷蛋白调控骨矿化的功能研究

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卵黄高磷蛋白调控骨矿化的功能研究
论文目录
 
摘要第1-10页
Abstract第10-13页
缩略语表第13-15页
第一章 文献综述第15-28页
1 生物矿化与磷蛋白第15-18页
  1.1 生物矿化概述第15-16页
  1.2 生物矿化的调控第16页
  1.3 生物矿化中磷蛋白的作用第16-17页
  1.4 磷蛋白调控矿化研究的模型第17-18页
2 卵黄高磷蛋白参与生物矿化推测第18-20页
  2.1 基于生物进化关系和遗传信息推测PV参与生物矿化第18页
  2.2 PV为卵生动物骨骼发育提供磷第18-19页
  2.3 PV替代VC促进胶原合成与骨矿化第19页
  2.4 生物信息学分析推测PV可能具有调控生物矿化的功能第19-20页
3 PV调控生物矿化研究第20-22页
  3.1 PV调控矿化的体外研究第20-21页
  3.2 PV调控矿化的细胞学研究第21-22页
  3.3 PV调控矿化的其他研究第22页
4 静电纺丝膜在骨仿生矿化研究中的应用第22-24页
  4.1 静电纺丝膜仿生溶液矿化体系第22-23页
  4.2 静电纺丝胶原蛋白膜第23页
  4.3 蛋白质对电纺膜仿生溶液矿化体系的调控第23-24页
5 生物矿化中的细胞行为第24-26页
  5.1 成骨细胞与破骨细胞在骨矿化中的作用第24页
  5.2 成骨细胞与骨矿化第24-25页
    5.2.1 MC3T3-E1细胞模型第24-25页
    5.2.2 成骨细胞分化及骨形成功能第25页
  5.3 破骨细胞与骨吸收第25页
  5.4 PV与骨矿化的细胞学研究第25-26页
6 本课题选题的学术思想第26-28页
  6.1 研究的目的和意义第26页
  6.2 学术思路第26-27页
  6.3 主要研究内容第27-28页
第二章 胶原电纺膜仿生矿化体系的构建第28-42页
1 材料与方法第29-32页
  1.1 材料第29-30页
    1.1.1 主要试剂第29页
    1.1.2 主要仪器与设备第29-30页
    1.1.3 溶液的配制第30页
  1.2 方法第30-32页
    1.2.1 实验设计第30-31页
    1.2.2 静电纺丝胶原蛋白纤维膜的制备第31页
    1.2.3 静电纺丝胶原蛋白膜的交联第31页
    1.2.5 材料的表征第31-32页
2 结果与讨论第32-41页
  2.1 胶原电纺膜交联前后的表征第32-33页
  2.2 胶原电纺膜仿生矿化模型的建立第33-40页
    2.2.1 矿化方式对胶原电纺膜矿化体系的影响第33-35页
    2.2.2 10×SBF矿化液的量对胶原电纺膜矿化的影响第35-36页
    2.2.3 矿化液pH对胶原电纺膜矿化的影响第36-38页
    2.2.4 直接矿化与预矿化对胶原电纺膜矿化的影响第38-39页
    2.2.5 矿化时间对胶原电纺膜矿化的影响第39-40页
  2.3 矿化物的XRD与FTIR表征第40-41页
3 本章小结第41-42页
第三章 胶原电纺膜仿生矿化体系在蛋白诱导矿化中的应用第42-57页
1 材料与方法第43-47页
  1.1 材料第43-45页
    1.1.1 原料第43页
    1.1.2 主要试剂第43-44页
    1.1.3 主要仪器与设备第44-45页
    1.1.4 溶液的配制第45页
  1.2 方法第45-47页
    1.2.1 实验设计第45页
    1.2.2 卵黄高磷蛋白的提取纯化鉴定第45-46页
    1.2.3 蛋白诱导矿化实验第46页
    1.2.4 矿化材料的表征第46-47页
2 结果与讨论第47-55页
  2.1 卵黄高磷蛋白的制备第47-48页
  2.2 利用胶原电纺膜仿生矿化模型进行蛋白质诱导矿化实验第48-55页
    2.2.1 蛋白质诱导矿化实验的SEM表征第48-51页
    2.2.2 蛋白诱导矿化实验的XPS表征第51-52页
    2.2.3 蛋白质诱导矿化实验的XRD表征第52-54页
    2.2.4 PV诱导矿化实验的HPLC表征第54-55页
3 本章小结第55-57页
第四章 卵黄高磷蛋白磷酸化程度对MC3T3-E1细胞分化及矿化的影响第57-73页
1 材料与方法第57-65页
  1.1 材料第57-61页
    1.1.1 原料第57-58页
    1.1.2 主要试剂第58-59页
    1.1.3 主要仪器与设备第59-60页
    1.1.4 溶液的配制第60-61页
  1.2 方法第61-65页
    1.2.1 实验设计第61页
    1.2.2 不同磷酸化程度的卵黄高磷蛋白的制备第61-62页
    1.2.3 细胞培养操作程序第62页
    1.2.4 CCK-8法测定细胞增殖第62-63页
    1.2.5 磷酸化程度对MC3T3-E1成骨细胞分化和矿化的影响第63页
    1.2.6 磷酸化程度对MC3T3-E1成骨细胞骨形成相关基因BMP-2、OPG和RANKL mRNA表达的影响第63-65页
    1.2.7 统计学分析第65页
2 结果与讨论第65-72页
  2.1 卵黄高磷蛋白的脱磷酸化程度的计算第65-66页
  2.2 不同脱磷酸化程度卵黄高磷蛋白的电泳分析第66页
  2.3 MC3T3-E1细胞增殖活力测定结果第66-67页
  2.4 MC3T3-E1细胞分化结果第67-68页
  2.5 磷酸化水平对MC3T3-E1细胞ALP活性的影响第68-69页
  2.6 磷酸化水平对MC3T3-E1形成矿化结节的影响第69-70页
  2.7 PV对MC3T3-E1中BMP-2,RANKL和OPG mRNA表达的影响第70-72页
3 本章小结第72-73页
第五章 卵黄高磷蛋白对RAW264.7细胞生长及分化的影响第73-88页
1 材料与方法第73-79页
  1.1 材料第73-76页
    1.1.1 原料第73页
    1.1.2 主要试剂第73-74页
    1.1.3 主要仪器与设备第74-75页
    1.1.4 溶液的配制第75-76页
  1.2 方法第76-79页
    1.2.1 实验设计第76页
    1.2.2 PV提取纯化第76页
    1.2.3 RAW264.7细胞培养操作程序第76-77页
    1.2.4 CCK-8法测定细胞增殖第77页
    1.2.5 流式细胞仪测定细胞周期第77-78页
    1.2.6 RAW264.7细胞凋亡率的检测第78页
    1.2.7 PV对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响第78-79页
    1.2.8 对破骨细胞TRAP活性的影响第79页
    1.2.9 统计学分析第79页
2 结果与讨论第79-87页
  2.1 PV对RAW264.7细胞活力的影响第79-80页
  2.2 PV对RAW264.7细胞周期的影响第80-83页
  2.3 PV对RAW264.7细胞凋亡的影响第83-86页
  2.4 PV对RAW264.7细胞分化为破骨细胞的影响第86页
  2.5 PV对TRAP活性的影响第86-87页
3 本章小结第87-88页
第六章 结论与展望第88-91页
1 结论第88-89页
2 实验创新点第89页
3 展望第89-91页
参考文献第91-102页
附录 研究生期间科研成果及参与活动情况第102-103页
致谢第103-104页

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