论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-19页 |
1.1 NAC转录因子的发现 | 第11页 |
1.2 NAC转录因子的结构 | 第11-12页 |
1.3 NAC转录因子的调控机制 | 第12-13页 |
1.4 NAC转录因子的生物学功能 | 第13-16页 |
1.4.1 NAC转录因子与植物生长发育 | 第13-14页 |
1.4.2 NAC转录因子与植物逆境胁迫 | 第14-16页 |
1.5 棉花中NAC转录因子的研究进展 | 第16-17页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
1.7 技术路线 | 第18-19页 |
2 实验材料与方法 | 第19-40页 |
2.1 实验材料 | 第19页 |
2.1.1 基因来源 | 第19页 |
2.1.2 植物材料 | 第19页 |
2.1.3 主要菌株和载体 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-40页 |
2.2.1 陆地棉NAC转录因子家族生物信息分析 | 第19-20页 |
2.2.2 GhNAC3序列及其启动子序列分析 | 第20页 |
2.2.3 载体构建 | 第20-24页 |
2.2.4 亚细胞定位 | 第24-25页 |
2.2.5 反式激活 | 第25-26页 |
2.2.6 病毒诱导基因沉默(Virus Induced Gene Silencing, VIGS) | 第26-27页 |
2.2.7 GhNAC3异源表达拟南芥的遗传转化、阳性植株和纯系筛选 | 第27-28页 |
2.2.8 GhNAC3棉花转基因材料的获得及阳性检测 | 第28-30页 |
2.2.9 棉花总RNA提取与cDNA反转录 | 第30-31页 |
2.2.10 Southern Blotting | 第31-35页 |
2.2.11 干旱和盐胁迫表型鉴定 | 第35-37页 |
2.2.12 生理指标的测定 | 第37-40页 |
3 结果与分析 | 第40-56页 |
3.1 陆地棉NAC转录因子基因家族分析 | 第40-42页 |
3.2 GhNAC3的克隆和聚类分析 | 第42-43页 |
3.3 GhNAC3组织表达模式及逆境表达模式分析 | 第43页 |
3.4 GhNAC3蛋白的亚细胞定位 | 第43-45页 |
3.5 GhNAC3反式激活试验 | 第45-46页 |
3.6 GhNAC3启动子序列分析 | 第46页 |
3.7 拟南芥中异源超表达GhNAC3基因后抗逆性鉴定 | 第46-50页 |
3.7.1 萌发期,异源超表达GhNAC3的拟南芥耐盐性抗渗透压能力增强,对激素ABA的敏感性降低 | 第47-49页 |
3.7.2 幼苗期,根长实验验证异源超表达GhNAC3的拟南芥抗渗透压能力增强40 | 第49-50页 |
3.8 利用病毒诱导基因沉默(VIGS)技术在棉花中沉默GhNAC3基因鉴定对非生物逆境的抗性 | 第50-53页 |
3.8.1 VIGS-GhNAC3增强棉花植株对干旱的敏感性 | 第50-52页 |
3.8.2 VIGS-GhNAC3增强棉花植株对盐的敏感性 | 第52-53页 |
3.9 GhNAC3稳定转化棉花材料的分子鉴定 | 第53-56页 |
3.9.1 GhNAC3转基因株系表达量分析结果 | 第53-54页 |
3.9.2 GhNAC3转基因株系拷贝数分析 | 第54页 |
3.9.3 GhNAC3转基因植株抗旱性鉴定 | 第54-56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
4.1 棉花中NAC转录因子广泛响应逆境胁迫 | 第56-57页 |
4.2 GhNAC3可能通过调节ABA含量参与对逆境的响应 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
附录A | 第65-66页 |
附录B | 第66-67页 |
附录C | 第67-68页 |
附录D | 第68-69页 |
附录E | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |