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茯苓甾醇C-24甲基转移酶基因克隆与功能验证
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茯苓甾醇C-24甲基转移酶基因克隆与功能验证
论文目录
摘要
第1-8页
Abstract
第8-10页
缩略语表
第10-11页
1 前言
第11-18页
1.1 茯苓三萜类物质研究进展
第11-14页
1.1.1 茯苓栽培概述
第11页
1.1.2 茯苓的药理活性概述
第11-12页
1.1.3 茯苓的化学成分
第12-13页
1.1.4 关于茯苓三萜类生物合成概述
第13-14页
1.2 甾醇C-24 甲基转移酶研究进展
第14-16页
1.2.1 茯苓酸研究进展
第14页
1.2.2 萜类骨架的生物合成代谢概述
第14-15页
1.2.3 甾醇C-24 甲基转移酶研究概述
第15-16页
1.3 研究意义与技术路线
第16-18页
1.3.1 研究意义
第16-17页
1.3.2 本研究的技术路线
第17-18页
2 茯苓SMT1基因的克隆与序列分析
第18-46页
2.1 材料与方法
第18-32页
2.1.1 试验材料
第18页
2.1.2 菌株和载体
第18页
2.1.3 主要试剂
第18-19页
2.1.4 主要仪器设备
第19页
2.1.5 核酸提取
第19-20页
2.1.6 用于 3’RACE扩增cDNA的合成
第20-21页
2.1.7 用于 5’RACE扩增cDNA的合成
第21页
2.1.8 SMT13’RACE的扩增
第21-26页
2.1.9 SMT15’RACE的扩增
第26-29页
2.1.10 SMT1基因全长扩增
第29-30页
2.1.11 SMT1基因组序列获得
第30-31页
2.1.12 SMT1基因生物信息学分析
第31-32页
2.2 结果与分析
第32-45页
2.2.1 茯苓中总RNA提取和纯度检测
第32页
2.2.2 SMT1基因的分子克隆
第32-34页
2.2.3 SMT1基因结构与启动子分析
第34-37页
2.2.4 SMT1蛋白质系统发育分析
第37-38页
2.2.5 SMT1蛋白质理化性质预测分析
第38-42页
2.2.6 SMT1蛋白质 3D结构模拟与功能分析
第42-45页
2.3 讨论
第45-46页
3 茯苓SMT1原核表达及体外酶活验证
第46-55页
3.1 材料与方法
第46-49页
3.1.1 菌株与载体
第46页
3.1.2 主要试剂、耗材
第46-47页
3.1.3 主要仪器设备
第47页
3.1.4 原核表达载体的构建
第47-48页
3.1.5 蛋白表达
第48-49页
3.1.6 SMT1功能的体外酶促反应验证
第49页
3.2 结果与分析
第49-53页
3.2.1 SMT1蛋白的表达
第49-51页
3.2.2 体外重组SMT1的酶促活性
第51-53页
3.3 讨论
第53-55页
4 茯苓甾醇转甲基酶在茯苓体内的表达情况
第55-60页
4.1 材料与方法
第55-58页
4.1.1 试验材料
第55页
4.1.2 试剂、耗材
第55页
4.1.3 主要仪器设备
第55页
4.1.4 荧光定量
第55-58页
4.2 结果与分析
第58-59页
4.3 讨论
第59-60页
5 结论与展望
第60-62页
5.1 结论
第60页
5.2 展望
第60-61页
5.3 本文创新点
第61-62页
参考文献
第62-70页
附录
第70-77页
附录A 实验中用到的引物
第70-72页
附录B SMT1的基因组序列和CDS序列
第72-74页
附录C 本研究中所使用培养基、试剂配方
第74-76页
附录D 攻读硕士学位期间主要学术成果
第76-77页
致谢
第77页
本篇论文共
77
页,
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。
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