论文目录 | |
摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
缩略词表(ABBREVIATIONS) | 第12-14页 |
1 前言 | 第14-24页 |
1.1 研究问题的由来 | 第14-15页 |
1.2 文献综述 | 第15-20页 |
1.2.1 T淋巴细胞的免疫调节功能 | 第15-16页 |
1.2.2 T淋巴细胞的研究进展 | 第16-17页 |
1.2.2.1 T淋巴细胞的分化发育概况 | 第16-17页 |
1.2.2.2 T淋巴细胞亚型的多样性 | 第17页 |
1.2.3 CD4/CD8四类T淋巴细胞的研究进展 | 第17-20页 |
1.2.3.1 CD4/CD8四类T淋巴细胞 | 第17-18页 |
1.2.3.2 CD4/CD8互斥分化机制 | 第18-19页 |
1.2.3.3 CD4/CD8互斥分化的基因 | 第19-20页 |
1.3 猪CD4/CD8互斥分化机制研究的不足 | 第20-22页 |
1.3.1 以猪为模型的基础研究极少 | 第20-21页 |
1.3.2 以单基因/信号通路研究为主 | 第21-22页 |
1.3.3 全基因组水平的研究关注程度不够 | 第22页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
2 实验材料和方法 | 第24-30页 |
2.1 技术路线 | 第24页 |
2.2 实验材料 | 第24-26页 |
2.2.1 试验动物 | 第24页 |
2.2.2 主要试验试剂 | 第24-25页 |
2.2.3 主要试剂的配置 | 第25页 |
2.2.4 主要实验仪器 | 第25页 |
2.2.5 主要分子生物学软件 | 第25-26页 |
2.2.6 主要图像分析软件 | 第26页 |
2.2.7 主要数据库及相关网站 | 第26页 |
2.3 方法 | 第26-30页 |
2.3.1 仔猪胸腺的采集 | 第26页 |
2.3.2 胸腺T淋巴细胞悬液的制备 | 第26页 |
2.3.3 流式细胞术分选猪胸腺CD4/CD8 T细胞 | 第26-27页 |
2.3.4 细胞培养 | 第27页 |
2.3.5 流式细胞术分析培养后的猪胸腺CD4/CD8 T细胞 | 第27页 |
2.3.6 单类细胞测序样品的制备 | 第27-28页 |
2.3.7 单类细胞扩增 | 第28页 |
2.3.8 建库测序 | 第28-29页 |
2.3.9 差异表达基因数据处理 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-52页 |
3.1 流式细胞术分选情况的研究 | 第30-36页 |
3.1.1 猪胸腺CD4/CD8四类T细胞分选结果 | 第30-33页 |
3.1.2 流式细胞仪分析培养72h的四类T细胞 | 第33-34页 |
3.1.3 单类细胞转录组测序样品的制备 | 第34-36页 |
3.2 文库构建和质检情况的研究 | 第36-40页 |
3.2.1 猪胸腺CD4/CD8四类T细胞亚型的文库信息 | 第36页 |
3.2.2 文库质检情况 | 第36-40页 |
3.3 单类细胞测序结果的研究 | 第40-52页 |
3.3.1 基因表达水平分析 | 第40-42页 |
3.3.2 差异表达基因的分布情况 | 第42-48页 |
3.3.3 差异表达基因的二维聚类分析结果 | 第48-49页 |
3.3.4 差异基因GO富集分析 | 第49-52页 |
4 讨论 | 第52-58页 |
4.1 关于猪胸腺CD4/CD8四类T细胞亚型分选及培养的讨论 | 第52-53页 |
4.2 关于胸腺细胞悬液制备方法选择的讨论 | 第53-54页 |
4.3 各T细胞亚型文库质检结果的讨论 | 第54页 |
4.4 关于猪胸腺不同T细胞亚型基因表达水平的讨论 | 第54-55页 |
4.5 关于猪胸腺不同T细胞亚型差异基因的讨论 | 第55-56页 |
4.6 关于下一步工作的计划 | 第56-58页 |
5 小结 | 第58-60页 |
5.1 本研究的主要结果 | 第58页 |
5.2 本研究的创新点与特色 | 第58-59页 |
5.3 本研究的不足之处 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
致谢 | 第68-69页 |