论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 1 前言 | 第13-28页 |
| 1.1 星状病毒的病原学特征 | 第13-17页 |
| 1.1.1 病因和分类 | 第13-15页 |
| 1.1.2 形态特点 | 第15页 |
| 1.1.3 基因组结构和特点 | 第15-17页 |
| 1.2 星状病毒的生物学 | 第17-19页 |
| 1.3 星状病毒对禽类的致病性 | 第19-20页 |
| 1.4 星状病毒的细胞培养 | 第20-21页 |
| 1.5 星状病毒的检测方法 | 第21-22页 |
| 1.6 免疫和防制 | 第22-23页 |
| 1.7 RNA病毒反向遗传学的概括 | 第23-26页 |
| 1.7.1 感染性克隆构建的原理 | 第23页 |
| 1.7.2 感染性克隆构建的方法 | 第23-26页 |
| 1.7.3 病毒拯救后的鉴定 | 第26页 |
| 1.8 本研究的目的意义 | 第26-28页 |
| 2 材料和方法 | 第28-51页 |
| 2.1 材料 | 第28-34页 |
| 2.1.1 菌（毒）株 | 第28页 |
| 2.1.2 实验动物及细胞株 | 第28页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第28页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第28页 |
| 2.1.5 实验用溶液与配置 | 第28-31页 |
| 2.1.6 引物的设计与合成 | 第31-34页 |
| 2.2 方法 | 第34-51页 |
| 2.2.1 抗血清的制备 | 第34-37页 |
| 2.2.2 全长cDNA片段的克隆 | 第37-44页 |
| 2.2.3 全长cDNA克隆的构建 | 第44-46页 |
| 2.2.4 DAst V-1 感染性克隆拯救病毒粒子的获得与鉴定 | 第46-48页 |
| 2.2.5 检测DAst V-1 荧光定量PCR方法的建立 | 第48-50页 |
| 2.2.6 动物实验 | 第50-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-60页 |
| 3.1 制备抗血清的结果 | 第51-52页 |
| 3.1.1 原核表达质粒的构建结果 | 第51页 |
| 3.1.2 原核表达蛋白的SDA-PAGE电泳结果 | 第51-52页 |
| 3.1.3 制备的抗血清的ELISA OD450值 | 第52页 |
| 3.2 DNA-launched感染性克隆的构建结果 | 第52-54页 |
| 3.2.1 重组质粒酶切鉴定 | 第52-53页 |
| 3.2.2 重组质粒序列分析结果 | 第53-54页 |
| 3.3 拯救病毒鉴定 | 第54-55页 |
| 3.3.1 间接免疫荧光试验的鉴定 | 第54页 |
| 3.3.2 遗传标签的鉴定 | 第54-55页 |
| 3.4 拯救病毒传代的细胞的IFA结果 | 第55页 |
| 3.5 检测DAst V-1 荧光定量PCR方法的建立 | 第55-58页 |
| 3.5.1 标准品的制备 | 第55页 |
| 3.5.2 反应条件的优化结果 | 第55-56页 |
| 3.5.3 荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第56-57页 |
| 3.5.4 特异性检测结果 | 第57页 |
| 3.5.5 重复性检测结果 | 第57-58页 |
| 3.5.6 敏感性检测结果 | 第58页 |
| 3.6 动物试验 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-64页 |
| 4.1 感染性克隆的构建 | 第60-61页 |
| 4.2 鸭星状病毒在细胞中的增殖 | 第61-62页 |
| 4.3 荧光定量方法的建立与应用 | 第62-63页 |
| 4.4 关于母本病毒与拯救病毒的致病力比较的说明 | 第63-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第75页 |
