论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-20页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌的研究进展 | 第13-20页 |
| · 生物被膜 | 第13-14页 |
| · 基因组全序列的发表 | 第14-15页 |
| · 毒力因子 | 第15-17页 |
| · 耐药性与基因盒-整合子系统 | 第17-19页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌检测方法研究进展 | 第19页 |
| · 展望 | 第19-20页 |
| 第二章 鸭疫里默氏杆菌免疫蛋白质组学研究 | 第20-37页 |
| · 材料和方法 | 第20-22页 |
| · 菌株和培养条件 | 第20页 |
| · 主要试剂 | 第20-21页 |
| · 主要培养基 | 第21页 |
| · 主要缓冲液及试剂配制 | 第21页 |
| · 主要仪器及软件 | 第21-22页 |
| · 试验部分 | 第22-26页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌的复苏与培养 | 第22页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌抗血清的制备 | 第22-23页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌全菌蛋白的样品制备及定量 | 第23页 |
| · 二维电泳 | 第23-24页 |
| · Western blotting | 第24页 |
| · 胶内酶解 | 第24-25页 |
| · MALDI-TOF-MS | 第25页 |
| · 数据库检索及生物信息学分析 | 第25页 |
| · 验证蛋白的免疫原性 | 第25-26页 |
| · 试验结果 | 第26-35页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌抗血清效价测定结果 | 第26页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌 Th4 全菌蛋白 2-D 电泳结果 | 第26-27页 |
| · western blot 结果 | 第27-30页 |
| · 蛋白点的鉴定 | 第30-33页 |
| · 免疫原性蛋白质生物信息学分析 | 第33-34页 |
| · Western blot 验证乙酰 CoA 乙酰转移酶(acat)和翻译延伸因子 2(ef-g）免疫原性 | 第34-35页 |
| · 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 鸭疫里默氏杆菌载铁体相互作用蛋白缺失株的构建 | 第37-64页 |
| · 材料 | 第37-40页 |
| · 菌株和培养条件 | 第37-38页 |
| · 主要载体、酶及试剂 | 第38页 |
| · 主要培养基 | 第38页 |
| · 抗生素及使用浓度 | 第38页 |
| · 常见缓冲液及试剂配制 | 第38-39页 |
| · 主要仪器设备 | 第39页 |
| · PCR 引物 | 第39-40页 |
| · 试验方法 | 第40-48页 |
| · 不同血清型鸭疫里默氏杆菌载铁体相互作用蛋白基因(Siderophore-interacting protein, sip)的检测、克隆与序列分析 | 第40-41页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌 CH3 sip 基因同源性左右臂片段的克隆 | 第41-42页 |
| · 壮观霉素抗性基因(Spc)的扩增 | 第42-43页 |
| · 重组质粒 pGEM-T easy-LSR 的构建 | 第43页 |
| · 自杀性重组质粒 pMEG-375-LSR 的构建 | 第43-44页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌 CH3 株△sip 基因缺失株的筛选及鉴定 | 第44-45页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌 CH3△sip 基因缺失株的生物学特性 | 第45页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌 CH3△sip 基因缺失株的基因互补试验 | 第45-48页 |
| · SIP 基因缺失对生物被膜形成的影响 | 第48页 |
| · 载铁体相互作用蛋白(SIP)在鸭疫里默氏杆菌 CH3 对铁摄取中的作用分析 | 第48页 |
| · 铁在 HXb2 株生长中的作用 | 第48页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌 CH3、CH3△sip 基因缺失株和 CH3△sip 基因缺失回复株粘附入侵试验 | 第48页 |
| · 试验结果 | 第48-62页 |
| · 不同血清型鸭疫里默氏杆菌的 sip 基因的检测及序列比较 | 第48-50页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌 CH3 sip 基因同源性左右臂片段的克隆 | 第50-51页 |
| · 壮观霉素抗性基因(Spc)的扩增 | 第51页 |
| · 重组质粒 pGEM-T easy-LSR 的构建 | 第51-53页 |
| · 构建自杀性重组质粒 pMEG-375-LSR | 第53页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌 CH3 株△sip 基因缺失株的筛选及鉴定 | 第53-55页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌 CH3△sip 基因缺失株的生物学特性 | 第55-56页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌 CH3△sip 基因缺失株的基因互补试验 | 第56-59页 |
| · SIP 基因缺失对生物被膜形成的影响 | 第59页 |
| · 铁载体相互作用蛋白(SIP)在鸭疫里默氏杆菌 CH3 株铁的摄取过程中起重要作用 | 第59-61页 |
| · 鸭疫里默氏杆菌 CH3、CH3△sip 基因缺失株和 CH3△sip 基因缺失回复株粘附与入侵试验 | 第61-62页 |
| · 讨论 | 第62-64页 |
| 全文结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简历 | 第72页 |
