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酵母Pub1-RRM2和RPA14的克隆、表达、纯化及初步晶体学分析
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酵母Pub1-RRM2和RPA14的克隆、表达、纯化及初步晶体学分析
论文目录
摘要
第1-6页
ABSTRACT
第6-12页
第一篇 PUB1-RRM2 的克隆、表达、纯化及初步晶体学分析
第12-58页
第一章 绪论
第12-28页
· mRAN 的稳定性
第12-14页
· RRM 结构与功能的研究进展
第14-21页
· Pub1 的研究进展
第21-25页
· Pub1 的第二个 RRM 的功能
第25-28页
第二章 实验材料与方法
第28-37页
· 基因克隆和载体的构建
第28-31页
· 引物设计
第28-29页
· PCR 扩增
第29页
· PCR 产物及载体的酶切、回收和连接
第29-30页
· 连接产物的转化
第30页
· 质粒抽提和连接产物的鉴定
第30-31页
· RRM2 蛋白的表达与纯化
第31-34页
· 实验仪器
第31页
· 实验试剂
第31-33页
· 实验方法
第33-34页
· 蛋白质序列测定
第34-35页
· RRM2 的晶体生长和优化
第35-36页
· 实验仪器和晶体生长条件
第35-36页
· 实验方法
第36页
· RRM2 晶体衍射数据的收集、处理和初步晶体学分析
第36-37页
第三章 实验结果与讨论
第37-45页
· RRM2 基因克隆和载体的构建
第37-38页
· RRM2 蛋白的表达与纯化
第38-41页
· 蛋白质的预表达
第38-39页
· 蛋白质的纯化
第39-41页
· 蛋白序列测定
第41页
· RRM2 的晶体生长和优化
第41-43页
· RRM2 晶体衍射数据的收集、处理及结构解析
第43-45页
· RRM2 晶体X-Ray 衍射实验
第43-44页
· RRM2 衍射数据的处理和分析
第44页
· RRM2 的结构解析
第44-45页
小结
第45-46页
参考文献
第46-58页
第二篇 酵母 RPA14 蛋白的克隆、表达、纯化及结构探索
第58-77页
第一章 综述
第58-64页
· RNA聚合酶
第58-60页
· RPA14 蛋白
第60-64页
第二章 实验材料与方法
第64-68页
· 基因克隆和载体的构建
第64-65页
· 引物设计
第64页
· PCR 扩增
第64页
· PCR 产物及载体的酶切、回收、连接和转化
第64页
· 质粒抽提及连接产物的鉴定
第64-65页
· RPA14 蛋白的表达与纯化
第65-67页
· 实验仪器
第65页
· 实验试剂
第65-66页
· 实验方法
第66-67页
· 晶体生长
第67-68页
第三章 实验结果与讨论
第68-73页
· RPA14 基因克隆和载体的构建
第68-69页
· RPA14 蛋白的表达与纯化
第69-71页
· 蛋白质的预表达
第69页
· 蛋白质的纯化
第69-71页
· RPA14 晶体生长
第71-73页
小结
第73-74页
参考文献
第74-77页
其它工作
第77-84页
一、背景介绍
第77-79页
二、实验进展
第79-83页
三、参考文献
第83-84页
附录
第84-87页
攻读学位期间发表的学术论文与取得的其他研究成果
第87-88页
致谢
第88页
本篇论文共
88
页,
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。
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