抗除草剂bar基因表达载体的构建及农杆菌转化的研究

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抗除草剂bar基因表达载体的构建及农杆菌转化的研究

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抗除草剂bar基因表达载体的构建及农杆菌转化的研究

论文目录
中文摘要	第1-7 页
外文摘要	第7-9 页
引言	第9-20 页
1 抗除草剂基因工程研究概况	第9-13 页
2 外源基因表达载体的构建	第13-14 页
3 小麦遗传转化方法的研究进展	第14-17 页
4 研究意义和研究内容	第17-20 页
材料与方法	第20-34 页
1 试验材料	第20-21 页
2 试验方法	第21-34 页
· bar基因的克隆	第21-26 页
· 原核表达载体构建、转化及表达蛋白的鉴定	第26-28 页
· 真核表达载体pBI121-bar构建及转化农杆菌LBA4404	第28-30 页
· 农杆菌转化小麦体系的研究	第30-34 页
结果与分析	第34-54 页
1 bar基因克隆	第34-39 页
· 涂叶检测	第34 页
· 小麦基因组DNA的提取	第34 页
· bar基因的PCR扩增与检测	第34-36 页
· 重组质粒的鉴定	第36-38 页
· bar基因序列的测定	第38-39 页
2 原核表达载体构建及表达蛋白的鉴定	第39-45 页
· 原核表达载体pET32a-bar的构建	第39-41 页
· 细胞总蛋白分析	第41-44 页
· DTNB比色法鉴定表达蛋白酶(PAT)活性	第44-45 页
3 真核表达载体pBI121-bar构建及转化农杆菌LBA4404	第45-49 页
· 中间载体的构建	第45-46 页
· 真核表达载体pBI121-bar构建	第46-48 页
· 真核表达载体pBI121-bar转化农杆菌LBA4404(工程菌株的构建)	第48-49 页
4 农杆菌转化小麦体系的研究	第49-54 页
· 小麦再生体系的研究	第49-52 页
· 遗传转化体系的研究	第52-54 页
讨论	第54-59 页
1 PCR克隆	第54-55 页
2 原核生物中表达	第55-56 页
3 真核表达载体的构建及转化农杆菌	第56 页
4 农杆菌转化小麦体系的研究	第56-59 页
结论	第59-60 页
参考文献	第60-67 页
附图	第67-69 页
致谢	第69-70 页
作者简介	第70页

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