论文目录 | |
| 1 综述 | 第11-18页 |
| 2 引言 | 第18-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-39页 |
| 3．1 实验动物 | 第20页 |
| 3．2 质粒和菌种 | 第20页 |
| 3．3 主要工具酶及试剂 | 第20页 |
| 3．4 主要溶液的配制 | 第20-25页 |
| 3．5 实验仪器 | 第25页 |
| 3．6 鸡MHCⅡ基因cDNA的提取 | 第25-29页 |
| 3．7 鸡MHCⅡ基因的原核表达质粒构建和克隆 | 第29-33页 |
| 3．8 鸡MHCⅡ基因的原核表达与鉴定 | 第33-35页 |
| 3．9 GST-α和GST-β融合蛋白的大量提取与纯化 | 第35-37页 |
| 3．10 GST-α和GST-β融合蛋白的定量 | 第37页 |
| 3．11 鼠抗鸡MHCⅡα和β多克隆抗体的制备及鉴定 | 第37-39页 |
| 4 结果与分析 | 第39-52页 |
| 4．1 鸡MHCⅡ基因的克隆与鉴定 | 第39-44页 |
| 4．1．1 提取鸡脾淋巴细胞中的总RNA | 第39页 |
| 4．1．2 RT-PCR扩增的鸡MHCⅡ基因 | 第39-40页 |
| 4．1．3 鸡MHCⅡ基因RT-PCR产物的单酶切鉴定 | 第40页 |
| 4．1．4 鸡MHCⅡ基因的克隆与重组质粒pGEX-4T-1的双酶切鉴定 | 第40-41页 |
| 4．1．5 重组质粒pGEX-47-1/α和β中α和β基因的DNA序列测定 | 第41-44页 |
| 4．2 GST-MHCⅡ融合蛋白的提取与纯化 | 第44-46页 |
| 4．2．1 SDS-PAGE检测诱导表达的融合蛋白 | 第44-45页 |
| 4．2．2 GST-MHCⅡ融合蛋白的可溶性鉴定 | 第45-46页 |
| 4．3 GST-MHCⅡ融合蛋白的提取与纯化 | 第46-51页 |
| 4．3．1 pGEX-4T-1/MHCⅡ诱导表达的条件优化 | 第46-48页 |
| 4．3．2 GST/MHCⅡ融合蛋白的大量提取结果 | 第48-49页 |
| 4．3．3 GST/MHCⅡ融合蛋白的纯化结果 | 第49-50页 |
| 4．3．4 GST/MHCⅡ融合蛋白的浓度测定 | 第50-51页 |
| 4．4 鼠抗鸡MHCⅡ多克隆抗体的鉴定结果 | 第51-52页 |
| 5 讨论 | 第52-65页 |
| 6 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |
