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cecropin B分泌型融合基因的构建及其转化柑桔的研究

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cecropin B分泌型融合基因的构建及其转化柑桔的研究
论文目录
 
摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第11-25页
  · 柑桔产业的概况第11页
  · 柑桔溃疡病简介第11-13页
    · 柑桔溃疡病的起源与分布第11-12页
    · 柑桔溃疡病菌形态和菌落特征第12页
    · 柑桔溃疡病菌的分类第12-13页
    · 柑桔溃疡病的危害与症状第13页
  · 柑桔溃疡病防治研究进展第13-17页
    · 杀菌药剂防治第13-15页
    · 生物防治第15-16页
    · 改善环境,减少风沙、昆虫等的伤害第16页
    · 柑桔溃疡病的防控第16-17页
  · 柑桔抗溃疡病育种研究进展第17-19页
    · 常规育种培育抗溃疡病柑桔品种第17页
    · 基因工程育种培育抗溃疡病柑桔品种第17-19页
  · 抗菌肽及其在植物抗病基因工程育种中的应用第19-22页
    · 抗菌肽的分类第19-20页
    · 抗菌肽的特点第20页
    · 抗菌肽的生物活性第20页
    · 抗菌肽的作用机制第20-22页
    · 抗菌肽在植物抗病基因工程育种中的应用进展第22页
  · 增强抗菌肽基因分泌表达的研究进展第22-25页
第二章 引言第25-29页
  · 目的与意义第25-27页
  · 技术路线第27-29页
第三章 cecropin B分泌型融合基因的人工合成第29-39页
  · 菌株、仪器与试剂第29-30页
    · 质粒和菌株第29页
    · 主要仪器第29页
    · 试剂第29页
    · 常用溶液第29-30页
    · 常用培养基第30页
  · 实验方法第30-36页
    · 分泌型信号肽的生物信息学分析第30-31页
    · 引物设计第31页
    · 分泌型cecropin B基因的PCR合成第31-36页
  · 结果与分析第36-39页
    · 分泌型cecropin B的生物信息学分析第36-37页
    · 分泌型cecropin B基因的人工合成第37-38页
    · 分泌型cecropin B基因的测序分析第38-39页
第四章 cecropin B分泌型融合基因的瞬时表达分析第39-47页
  · 材料、仪器与试剂第39-40页
    · 载体、菌株、材料第39页
    · 主要仪器第39页
    · 试剂第39页
    · 常用溶液第39页
    · 常用培养基第39-40页
  · 实验方法第40-41页
    · PRlaCB:mRFP、AATCB:mRFP和CB:mRFP融合基因的克隆第40页
    · pSPCB:Rfp载体和pCB:Rfp载体的构建第40-41页
      · BglⅡ和XbaⅠ酶切从中间载体上获取目的基因第40页
      · 目的基因连接表达载体第40-41页
    · pSPCB:Rfp载体和pCB:Rfp载体转化农杆菌第41页
    · pSPCB:Rfp载体和pCB:Rfp载体的验证第41页
      · 质粒提取第41页
      · pSPCB:Rfp载体和pCB:Rfp载体质粒的验证第41页
    · 农杆菌介导的pSPCB:Rfp载体和pCB:Rfp载体转化洋葱表皮细胞第41页
  · 结果与分析第41-47页
    · pSPCB:Rfp载体和pCB:Rfp载体的构建第41-45页
      · SPCB:Rfp和CB:Rfi3融合基因的构建第42-43页
      · pSPCB:Rfp载体和pCB:Rfp载体的酶切验证第43-44页
      · pSPCB:Rfp载体和pCB:Rfp载体的PCR验证第44-45页
    · 目的基因表达产物在洋葱表皮细胞中的定位显微观察第45-47页
第五章 cecropin B分泌型融合基因转化柑桔的研究第47-67页
  · 菌株、材料、仪器与试剂第47-48页
    · 菌株第47页
    · 材料第47页
    · 主要仪器第47页
    · 试剂第47页
    · 常用溶液第47页
    · 常用培养基第47-48页
  · 实验方法第48-56页
    · p35s-SP:CB载体的构建第48-50页
    · p35s-CB载体的构建第50-52页
    · p35s-SP:CB和p35s-CB转化农杆菌第52-53页
    · 农杆菌介导的p35s-SP:CB和p35s-CB转化锦橙上胚轴第53-54页
    · 转基因植株的检测第54-56页
  · 结果与分析第56-67页
    · 超量表达分泌型cecropin B基因植物表达载体的构建第56-58页
    · p35s-CB载体的构建第58-60页
      · CB基因的获得第59页
      · Handlll和Sal I酶切验证p35s-CB第59-60页
      · PCR验证p35s-CB第60页
    · 农杆菌中p35s-SP:CB载体和p35s-CB载体的验证第60-61页
      · HindⅢ和Sa/l对p35s-SP:CB载体和p35s-CB载体进行酶切验证第60页
      · EcoRl和Xhol对p35s- SP:CB载体和p35s-CB载体进行酶切验证,图5-11第60-61页
      · PCR验证p35s-SP:CB载体和p35s-CB载体,图5-12第61页
    · 农杆菌介导的锦橙上胚轴遗传转化第61-67页
第六章 讨论第67-69页
第七章 小结第69-71页
参考文献第71-87页
附录第87-93页
致谢第93-95页
发表文章与参与项目第95页

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