论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-13页 |
| 符号说明 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 参考文献 | 第16-18页 |
| 第一部分 构建人肝癌HepG2/mTOR-细胞株 | 第18-30页 |
| 1 材料 | 第18-22页 |
| 1.1 慢病毒 | 第18页 |
| 1.2 肝癌细胞株 | 第18页 |
| 1.3 实验试剂 | 第18-19页 |
| 1.4 主要仪器及耗材 | 第19-20页 |
| 1.5 引物 | 第20页 |
| 1.6 主要试剂配制 | 第20-22页 |
| 2 方法 | 第22-26页 |
| 2.1 细胞培养 | 第22页 |
| 2.2 慢病毒感染 | 第22页 |
| 2.3 倒置荧光显微镜观察细胞形态 | 第22页 |
| 2.4 Western blot实验 | 第22-24页 |
| 2.5 RT-PCR实验 | 第24-26页 |
| 2.6 统计学处理 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-28页 |
| 3.1 人肝癌HepG2/mTOR-细胞株的成功建立 | 第26-27页 |
| 3.2 慢病毒感染后人肝癌HepG2细胞株中mTOR的表达 | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-30页 |
| 第二部分 南蛇藤提取物对人肝癌HepG2/mTOR-细胞的影响 | 第30-41页 |
| 1 材料 | 第30-31页 |
| 1.1 药品 | 第30页 |
| 1.2 肝癌细胞株 | 第30页 |
| 1.3 实验室试剂 | 第30-31页 |
| 1.4 主要仪器及耗材 | 第31页 |
| 1.5 主要试剂配制 | 第31页 |
| 2 方法 | 第31-34页 |
| 2.1 细胞培养 | 第31-32页 |
| 2.2 MTT实验(细胞毒性实验) | 第32页 |
| 2.3 透射电镜下细胞形态学观察 | 第32页 |
| 2.4 流式细胞术检测凋亡 | 第32-33页 |
| 2.5 细胞侵袭与迁移实验 | 第33页 |
| 2.6 统计学处理 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-38页 |
| 3.1 南蛇藤提取物抑制人肝癌HepG2/mTOR-细胞的增殖 | 第34页 |
| 3.2 南蛇藤提取物对人肝癌HepG2/mTOR-细胞形态的影响 | 第34-35页 |
| 3.3 南蛇藤提取物促进人肝癌HepG2/mTOR-细胞凋亡 | 第35-37页 |
| 3.4 南蛇藤提取物抑制人肝癌HepG2/ mTOR-细胞的迁移和侵袭能力 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-41页 |
| 第三部分 南蛇藤提取物通过mTOR信号通路促进人肝癌HepG2/ mTOR-凋亡的分子机制 | 第41-51页 |
| 1 材料 | 第41-42页 |
| 1.1 药品 | 第41页 |
| 1.2 肝癌细胞株 | 第41页 |
| 1.3 主要实验试剂 | 第41-42页 |
| 1.4 主要仪器与耗材 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-43页 |
| 2.1 药物处理 | 第42-43页 |
| 2.2 细胞培养 | 第43页 |
| 2.3 Western blot实验 | 第43页 |
| 2.4 统计学处理 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-48页 |
| 3.1 南蛇藤提取物对人肝癌HepG2/mTOR-细胞中凋亡相关蛋白的作用 | 第43-45页 |
| 3.2 南蛇藤提取物对人肝癌HepG2/mTOR-细胞mTOR相关蛋白的作用 | 第45-47页 |
| 3.3 南蛇藤提取物对人肝癌HepG2/mTOR~-细胞PI3K/AKT信号通路的影响 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第四部分 南蛇藤提取物抑制肝癌的体内研究 | 第51-61页 |
| 1 材料 | 第51-52页 |
| 1.1 药品 | 第51页 |
| 1.2 实验动物 | 第51页 |
| 1.3 肝癌细胞株 | 第51页 |
| 1.4 主要实验试剂 | 第51-52页 |
| 1.5 主要仪器及耗材 | 第52页 |
| 2 方法 | 第52-55页 |
| 2.1 细胞培养 | 第52页 |
| 2.2 药品准备 | 第52-53页 |
| 2.3 建立裸鼠皮下移植瘤模型 | 第53页 |
| 2.4 测量相关指标 | 第53页 |
| 2.5 免疫组化 | 第53-54页 |
| 2.6 统计学处理 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-58页 |
| 3.1 南蛇藤提取物对裸鼠皮下移植瘤生长的影响 | 第55-57页 |
| 3.2 南蛇藤提取物对裸鼠皮下移植瘤凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3表达的影响 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 文献综述 | 第61-68页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文目录 | 第69-70页 |
