论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一部分 跨膜蛋白GRINA在胃癌中表达上调的临床意义及功能机制研究 | 第13-76页 |
| 1、前言 | 第13-15页 |
| 2、材料与方法 | 第15-50页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第15-20页 |
| 2.1.1、材料 | 第15页 |
| 2.1.2、主要试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.3、其他 | 第16-17页 |
| 2.1.4、抗体 | 第17页 |
| 2.1.5、主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.6 常用培养基配置 | 第18-20页 |
| 2.2、实验方法 | 第20-50页 |
| 2.2.1、组织芯片的构建 | 第20页 |
| 2.2.2、组织免疫化学染色 | 第20-21页 |
| 2.2.3、免疫组织化学评分及结果判断 | 第21-36页 |
| 2.2.4、细胞的复苏 | 第36页 |
| 2.2.5、细胞的培养 | 第36页 |
| 2.2.6、细胞的冻存 | 第36页 |
| 2.2.7、胃癌细胞细胞瞬时转染si RNA | 第36-37页 |
| 2.2.8、Real-time PCR检测 | 第37-40页 |
| 2.2.9、Western Blot实验 | 第40-41页 |
| 2.2.10、细胞蛋白提取 | 第41页 |
| 2.2.11、细胞迁移侵袭实验 | 第41-42页 |
| 2.2.12、细胞增殖实验 | 第42页 |
| 2.2.13、细胞凋亡实验 | 第42-43页 |
| 2.2.14、细胞周期实验 | 第43页 |
| 2.2.15、慢病毒干扰载体的构建及转染细胞 | 第43-45页 |
| 2.2.16、动物实验 | 第45-46页 |
| 2.2.17、权威网站预测调控GRINA上游转录调控因子 | 第46页 |
| 2.2.18、染色质免疫共沉淀实验 | 第46-49页 |
| 2.2.19、统计分析 | 第49-50页 |
| 3、结果 | 第50-71页 |
| 3.1、GRINA在胃癌中的表达情况 | 第50-52页 |
| 3.2、GRINA在胃癌组织中的表达与临床病历资料及其预后的关系分析 | 第52-58页 |
| 3.3、GRINA在胃癌中生物学细胞功能研究 | 第58-66页 |
| 3.4、GRINA在胃癌发生发展中的分子机制初步研究 | 第66-71页 |
| 4、讨论 | 第71-76页 |
| 第二部分 KRT17通过调节上皮间充质转化影响胃癌细胞的侵袭和转移 | 第76-85页 |
| 1、前言 | 第76-78页 |
| 2、材料与方法 | 第78-80页 |
| 2.1 材料 | 第78页 |
| 2.2 临床组织样本 | 第78页 |
| 2.3、细胞培养和siRNA分组转染 | 第78页 |
| 2.4、RT-PCR | 第78-79页 |
| 2.5、免疫印迹（Western blot）检测 | 第79页 |
| 2.6、空穿实验 | 第79页 |
| 2.7、胶穿实验 | 第79页 |
| 2.8、统计学方法 | 第79-80页 |
| 3、结果 | 第80-83页 |
| 3.1、KRT17在胃癌组织和细胞中呈高表达 | 第80页 |
| 3.2、KRT17-siRNA处理后对胃癌细胞KRT17 mRNA显著下调 | 第80-81页 |
| 3.3、干扰KRT17抑制胃癌细胞体外迁移侵袭 | 第81页 |
| 3.4、干扰KRT17抑制胃癌细胞体外侵袭力 | 第81-82页 |
| 3.5、干扰KRT17后对胃癌细胞EMT的影响 | 第82-83页 |
| 4、讨论 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 硕士期间科研成果 | 第98页 |
| 参与申请科研基金 | 第98页 |
