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载荷VEGF-shRNA多功能自组装纳米系统用于肿瘤靶向治疗研究

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载荷VEGF-shRNA多功能自组装纳米系统用于肿瘤靶向治疗研究
论文目录
 
摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 综述第11-20页
  1.1 肿瘤的基因治疗第11-17页
    1.1.1 反义核酸第12页
    1.1.2 核酶第12页
    1.1.3 规律成簇间隔短回文重复CRISPR相关蛋白核酸酶第12-13页
    1.1.4 RNA干扰第13-15页
    1.1.5 血管内皮生长因子作用及意义第15-17页
  1.2 siRNA药物的体内输送第17-18页
    1.2.1 siRNA药物肿瘤靶向输送的困难和挑战第17页
    1.2.2 siRNA药物输送策略第17-18页
  1.3 基于载荷VEGF-多功能自组装纳米系统的肺癌靶向治疗研究第18-20页
第二章 自组装纳米粒子制备与表征第20-40页
  2.1 引言第20页
  2.2 实验材料和仪器第20-21页
    2.2.1 实验材料第20页
    2.2.2 实验仪器第20-21页
    2.2.3 试验用试剂的配置第21页
  2.3 实验方法第21-25页
    2.3.1 6-OTs-β-CD和CD-PEI的合成及表征第21-22页
    2.3.2 Ad-PEG-GE11和Ad-PEG-GALA的合成及表征第22-23页
    2.3.3 不同粒径粒径DNA@SNPs的制备第23页
    2.3.4 GE11/GALA-DNA@SNPs粒径分布及电势分析第23页
    2.3.5 原子力显微镜观察GE11/GALA-DNA@SNPs形貌第23页
    2.3.6 GE11/GALA-DNA@SNPs冰冻透射显微镜表征第23-24页
    2.3.7 自组装纳米粒子载荷DNA研究第24页
    2.3.8 GE11/GALA-DNA@SNPs稳定性研究第24-25页
  2.4 shRNA片段设计第25-28页
    2.4.1 基于pGPHI/GFP/Neo质粒载体的shRNA片段设计原则第25页
    2.4.2 靶序列的选择第25-26页
    2.4.3 表达载体构建第26-28页
  2.5 实验结果第28-39页
    2.5.1 6-OTs-β-CD及CD-PEI的~1H NMR表征第28-30页
    2.5.2 Ad-PEG的多肽修饰表征第30-34页
    2.5.3 不同粒径DNA@SNPs的制备第34-35页
    2.5.4 GE11/GALA-DNA@SNPs纳米粒子表征第35-37页
    2.5.5 DNA@SNPs载荷验证第37-38页
    2.5.6 GE11/GALA-DNA@SNPs在PBS中的稳定性第38页
    2.5.7 shRNA表达载体测序结果第38-39页
  2.6 总结与讨论第39-40页
第三章 自组装纳米粒子载荷DNA体外基因转染效率研究第40-54页
  3.1 引言第40页
  3.2 实验材料和仪器第40-41页
    3.2.1 实验材料第40-41页
    3.2.2 实验仪器第41页
    3.2.3 实验用试剂的配置第41页
  3.3 实验方法第41-47页
    3.3.1 细胞培养第41页
    3.3.2 靶向肽GE11修饰的GE11-DNA@SNPs与细胞的结合研究第41-42页
    3.3.3 不同浓度穿膜肽GALA对GALA-DNA@SNPs转染效果的影响第42页
    3.3.4 不同N/P对GALA-DNA@SNPs转染效果的影响第42-43页
    3.3.5 不同功能化修饰的DNA@SNPs转染效果对比第43-44页
    3.3.6 GE11/GALA-DNA@SNPs介导的GFP质粒DNA转染第44页
    3.3.7 GE11/GALA-DNA@SNPs细胞摄取实验第44-45页
    3.3.8 不同DNA@SNPs的细胞毒性评价第45-46页
    3.3.9 GE11/GALA-VEGF-shRNA@SNPs体外抑制肿瘤细胞VEGF表达评价第46-47页
  3.4 实验结果第47-53页
    3.4.1 靶向肽GE11修饰的GE11-DNA@SNPs与细胞结合特异性研究第47-48页
    3.4.2 GE11/GALA-DNA@SNPs细胞转染实验第48-51页
    3.4.3 GE11/GALA-DNA@SNPs细胞摄取实验第51页
    3.4.4 不同DNA@SNPs细胞毒性评价第51-52页
    3.4.5 自组装纳米粒子载荷VEGF-shRNA抑制肿瘤细胞VEGF表达评价第52-53页
  3.5 总结与讨论第53-54页
第四章 自组装纳米粒子荷瘤裸鼠体内药效考察第54-62页
  4.1 前言第54页
  4.2 实验材料和仪器第54-55页
    4.2.1 实验材料第54-55页
    4.2.2 实验仪器第55页
    4.2.3 实验用试剂的配置第55页
  4.3 实验方法第55-58页
    4.3.1 裸鼠皮下瘤模型构建、给药和治疗效果评价第55-56页
    4.3.2 瘤内VEGF水平检测第56-57页
    4.3.3 肿瘤组织切片CD31免疫组化染色第57-58页
  4.4 实验结果第58-61页
    4.4.1 GE11/GALA-VEGF-shRNA@SNPs的肿瘤生长抑制作用第58-59页
    4.4.2 GE11/GALA-VEGF-shRNA@SNPs对瘤内VEGF表达的抑制第59-60页
    4.4.3 GE11/GALA-VEGF-shRNA@SNPs抑制皮下瘤新生血管生成第60-61页
  4.5 总结与讨论第61-62页
第五章 总结与展望第62-64页
  5.1 总结第62-63页
  5.2 研究工作展望第63-64页
参考文献第64-70页
致谢第70-71页
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文第71-73页

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