论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| abstract | 第7-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-18页 |
| 1.1 胚胎的早期发育 | 第13页 |
| 1.2 胚胎发育中的活性氧 | 第13-14页 |
| 1.3 谷胱甘肽的生物合成及代谢 | 第14-15页 |
| 1.3.1 谷胱甘肽的生物学作用 | 第14页 |
| 1.3.2 生物体内谷胱甘肽的合成途径 | 第14-15页 |
| 1.3.3 谷胱甘肽的转运途径 | 第15页 |
| 1.4 胚胎发育中谷胱甘肽的作用 | 第15-17页 |
| 1.4.1 胚胎发育中的谷胱甘肽 | 第15-16页 |
| 1.4.2 谷胱甘肽促进体外胚胎的发育 | 第16-17页 |
| 1.5 液相色谱-质谱联用技术 | 第17页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二章 谷胱甘肽及其同位素标记物对牛体外胚胎发育的影响 | 第18-29页 |
| 2.1 试验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 试验仪器和设备 | 第19页 |
| 2.1.2 试验材料 | 第19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-22页 |
| 2.2.1 主要溶液的配制 | 第19-20页 |
| 2.2.2 体外受精胚胎的制备 | 第20-21页 |
| 2.2.3 囊胚细胞染色 | 第21页 |
| 2.2.4 胚胎内ROS含量的检测 | 第21页 |
| 2.2.5 荧光染色法检测胚胎中GSH含量 | 第21页 |
| 2.2.6 液质联用仪检测胚胎中GSH和GSX含量 | 第21-22页 |
| 2.2.7 数据处理与统计分析 | 第22页 |
| 2.3 结果及分析 | 第22-27页 |
| 2.3.1 外源GSH和GSX对牛体外受精胚胎发育的影响 | 第22-23页 |
| 2.3.2 外源GSH对胚胎内ROS含量的影响 | 第23-24页 |
| 2.3.3 LC/MS法测定GSH或GSX的标准曲线的建立 | 第24-25页 |
| 2.3.4 外源GSH对受精卵及胚胎内GSH含量的影响 | 第25-26页 |
| 2.3.5 外源GSX对胚胎内GSH、GSX及培养液中GSX含量的影响 | 第26-27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 牛胚胎中谷胱甘肽合成相关酶的mRNA表达水平和酶活性分析 | 第29-39页 |
| 3.1 试验材料 | 第30页 |
| 3.1.1 试验仪器 | 第30页 |
| 3.1.2 试验材料及试剂 | 第30页 |
| 3.2 试验方法 | 第30-34页 |
| 3.2.1 体外胚胎的制备方法同第二章。 | 第30-31页 |
| 3.2.2 实时荧光定量PCR | 第31-34页 |
| 3.2.3 GGT酶活的测定 | 第34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-37页 |
| 3.3.1 GSH合成相关酶基因在对照组受精卵和胚胎中的mRNA表达 | 第34-35页 |
| 3.3.2 GSH合成相关酶基因在处理组受精卵和胚胎中的mRNA表达 | 第35-36页 |
| 3.3.3 GSH合成相关酶在对照组和处理组胚胎间的基因表达 | 第36页 |
| 3.3.4 GGT酶的活性分析 | 第36-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 GCL和GGT抑制剂对胚胎内GSH合成的影响 | 第39-45页 |
| 4.1 试验材料 | 第39页 |
| 4.2 试验方法 | 第39-40页 |
| 4.2.1 牛体外受精胚胎的制备: | 第39-40页 |
| 4.2.2 抑制剂处理牛体外受精胚胎 | 第40页 |
| 4.3 结果及分析 | 第40-43页 |
| 4.3.1 GCL酶抑制剂BSO对胚胎体外发育的影响 | 第40-41页 |
| 4.3.2 抑制剂BSO对受精卵和胚胎中GSH和GSX含量的影响 | 第41-42页 |
| 4.3.3 GGT酶抑制剂Acivicin对胚胎体外发育的影响 | 第42页 |
| 4.3.4 抑制剂Acivicin对受精卵及胚胎中GSH和GSX含量的影响 | 第42-43页 |
| 4.4 讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 全文总结 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简历 | 第54页 |
