论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-21页 |
| 1.1 骨骼肌发育及肌纤维类型 | 第13页 |
| 1.2 骨骼肌与糖代谢 | 第13-14页 |
| 1.3 miRNA及其功能 | 第14-21页 |
| 1.3.1 miRNA概述 | 第14页 |
| 1.3.2 miRNA的生物合成及作用机制 | 第14-16页 |
| 1.3.3 miRNA的功能 | 第16-17页 |
| 1.3.3.1 miRNA与肌肉发育 | 第16页 |
| 1.3.3.2 miRNA与代谢 | 第16-17页 |
| 1.3.3.3 miRNA与肿瘤发生 | 第17页 |
| 1.3.4 .miR-378的功能 | 第17-21页 |
| 1.3.4.1 miR-378概述 | 第17-18页 |
| 1.3.4.2 miR-378与骨骼肌生长发育 | 第18-19页 |
| 1.3.4.3 miR-378与卵泡发育 | 第19页 |
| 1.3.4.4 miR-378与肿瘤发生 | 第19页 |
| 1.3.4.5 miR-378与脂代谢 | 第19-20页 |
| 1.3.4.6 miR-378与糖代谢 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-31页 |
| 2.1 实验动物 | 第21页 |
| 2.2 细胞系 | 第21页 |
| 2.3 仪器设备 | 第21页 |
| 2.4 试剂 | 第21-22页 |
| 2.5 方法 | 第22-31页 |
| 2.5.1 细胞复苏 | 第22-23页 |
| 2.5.2 细胞传代 | 第23页 |
| 2.5.3 细胞冻存 | 第23页 |
| 2.5.4 细胞转染 | 第23-24页 |
| 2.5.5 快速鉴定小鼠基因型 | 第24页 |
| 2.5.6 细胞/组织RNA提取 | 第24-25页 |
| 2.5.7 第一链cDNA的合成 | 第25页 |
| 2.5.8 miRNA的反转录 | 第25-26页 |
| 2.5.9 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) | 第26页 |
| 2.5.10 蛋白组印迹法 | 第26-27页 |
| 2.5.11 GTT/PTT | 第27-28页 |
| 2.5.12 ITT | 第28页 |
| 2.5.13 细胞中乳酸含量检测 | 第28-29页 |
| 2.5.14 差异基因鉴定 | 第29页 |
| 2.5.15 GO和KEGG分析 | 第29页 |
| 2.5.16 q-PCR定量检测引物 | 第29-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-43页 |
| 3.1 正常饲喂状态下敲除miR-378对糖代谢的影响 | 第31-34页 |
| 3.1.1 miR-378敲除鼠的成功制备 | 第31页 |
| 3.1.2 miR-378敲除鼠与野生型鼠体重增长的比较 | 第31-32页 |
| 3.1.3 miR-378与葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性的关系 | 第32页 |
| 3.1.4 miR-378对胰岛素信号通路关键节点基因蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
| 3.1.5 miR-378与丙酮酸耐受性 | 第33页 |
| 3.1.6 miR-378对糖酵解途径基因表达的影响 | 第33-34页 |
| 3.2 高脂诱导条件下敲除miR-378与糖代谢 | 第34-36页 |
| 3.2.1 miR-378敲除鼠与野生鼠体重增长的比较 | 第34-35页 |
| 3.2.2 miR-378对肝脏脂代谢影响 | 第35页 |
| 3.2.3 miR-378与葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性的关系 | 第35-36页 |
| 3.2.4 miR-378对胰岛素信号通路关键节点蛋白表达的影响 | 第36页 |
| 3.2.5 miR-378与丙酮酸耐受性 | 第36页 |
| 3.3 miR-378在C2C12细胞中对糖代谢的影响 | 第36-38页 |
| 3.3.1 miR-378与乳酸代谢 | 第36-37页 |
| 3.3.2 细胞水平miR-378对胰岛素信号通路关键节点蛋白的影响 | 第37-38页 |
| 3.4 miR-378敲除小鼠骨骼肌的组学分析 | 第38-43页 |
| 3.4.1 转录组分析 | 第38-39页 |
| 3.4.1.1 转录组表达谱分析 | 第38页 |
| 3.4.1.2 转录组通路分析 | 第38-39页 |
| 3.4.2 蛋白组分析 | 第39-43页 |
| 3.4.2.1 蛋白组表达谱分析 | 第39-41页 |
| 3.4.2.2 差异表达蛋白GO分析 | 第41-42页 |
| 3.4.2.3 差异表达蛋白KEGG通路富集分析 | 第42-43页 |
| 第四章 讨论 | 第43-46页 |
| 4.1 miR-378对葡萄糖稳态的调节 | 第43页 |
| 4.2 miR-378对基因表达和代谢的影响 | 第43-44页 |
| 4.3 miR-378调控的靶基因 | 第44-46页 |
| 第五章 全文总结 | 第46-47页 |
| 5.1 本文研究结论 | 第46页 |
| 5.2 论文创新点 | 第46页 |
| 5.3 后续实验安排 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简历 | 第54页 |
