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弓形虫循环抗原表达及镧系微球免疫层析试纸条的研制
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弓形虫循环抗原表达及镧系微球免疫层析试纸条的研制
论文目录
摘要
第1-7页
abstract
第7-17页
第一章 引言
第17-23页
1.1 弓形虫概述
第17-18页
1.1.1 弓形虫病原学
第17页
1.1.2 弓形虫生命周期
第17-18页
1.2 弓形虫排泄分泌抗原研究进展
第18-20页
1.3 弓形虫病的诊断
第20-21页
1.4 镧系微球试纸条层析技术
第21-22页
1.5 本研究的意义
第22-23页
第二章 弓形虫GRA1、mic4基因的克隆与原核表达
第23-37页
2.1 材料与仪器
第23-24页
2.1.1 虫体、菌株与载体
第23页
2.1.2 主要试剂
第23-24页
2.1.3 实验仪器
第24页
2.2 方法
第24-28页
2.2.1 引物的设计与合成
第24页
2.2.2 弓形虫速殖子的收集和RNA提取
第24-25页
2.2.3 基因的RT-PCR扩增
第25-26页
2.2.4 重组表达质粒的构建和鉴定
第26-27页
2.2.5 重组质粒诱导表达
第27页
2.2.6 重组蛋白的纯化
第27-28页
2.2.7 重组蛋白Western-blot分析
第28页
2.3 结果与分析
第28-36页
2.3.1 目的基因的扩增
第28页
2.3.2 重组表达质粒的鉴定
第28-29页
2.3.3 原核表达产物的SDS-PAGE及可溶性分析
第29-31页
2.3.4 重组质粒原核表达条件的优化
第31-34页
2.3.5 重组蛋白的纯化
第34-35页
2.3.6 重组蛋白的Western-blot分析
第35-36页
2.4 讨论
第36-37页
第三章 GRA1单克隆抗体的制备及鉴定
第37-49页
3.1 材料
第37-39页
3.1.1 实验动物及细胞株
第37页
3.1.2 主要试剂与耗材
第37-38页
3.1.3 实验仪器
第38页
3.1.4 相关溶液
第38-39页
3.2 方法
第39-43页
3.2.1 重组抗原的准备
第39页
3.2.2 免疫BALB/c小鼠
第39-40页
3.2.3 单克隆抗体的制备
第40-42页
3.2.4 单抗效价的测定
第42-43页
3.2.5 间接免疫荧光实验
第43页
3.2.6 Western-blot分析
第43页
3.3 结果与分析
第43-47页
3.3.1 BALB/c小鼠的免疫
第43-44页
3.3.2 细胞融合后观察
第44页
3.3.3 筛选阳性克隆
第44-45页
3.3.4 单抗效价测定
第45-46页
3.3.5 间接免疫荧光试验分析
第46页
3.3.6 Western-blot分析结果
第46-47页
3.4 讨论
第47-49页
第四章 镧系微球免疫层析试纸条检测血清抗体方法的建立
第49-65页
4.1 材料与仪器
第49-51页
4.1.1 试剂
第49页
4.1.2 实验材料
第49-50页
4.1.3 仪器
第50页
4.1.4 主要相关试剂溶液配制
第50-51页
4.2 方法
第51-55页
4.2.1 抗原的准备和鉴定
第51页
4.2.2 荧光微球标记SPA
第51页
4.2.3 免疫层析试纸条的组装
第51-52页
4.2.4 镧系微球试纸条层析、反应和结果判定
第52-54页
4.2.5 试纸条优化
第54-55页
4.2.6 荧光微球试纸条评价
第55页
4.2.7 犬血清样本的检测
第55页
4.3 结果与分析
第55-63页
4.3.1 抗原的准备和鉴定
第55-57页
4.3.2 试纸条优化
第57-60页
4.3.3 试纸条的评价
第60-62页
4.3.4 犬血清样本检测结果
第62-63页
4.4 讨论
第63-65页
第五章 全文总结
第65-66页
参考文献
第66-74页
致谢
第74-75页
作者简历
第75页
本篇论文共
75
页,
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。
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