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弓形虫MORN1/2基因缺失株的构建及其免疫保护性研究

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弓形虫MORN1/2基因缺失株的构建及其免疫保护性研究
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-11页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-19页
  1.1 弓形虫及弓形虫病简述第12-14页
    1.1.1 病原体第12-13页
    1.1.2 生活史及传播第13页
    1.1.3 弓形虫病及流行第13-14页
  1.2 CRISPR-Cas9介导的弓形虫基因编辑技术第14-15页
    1.2.1 CRISPR/Cas9系统简介第14页
    1.2.2 应用于弓形虫的基因筛选标记第14-15页
    1.2.3 CRISPR/Cas9技术在弓形虫中的应用第15页
  1.3 弓形虫疫苗的研究进展第15-17页
    1.3.1 传统疫苗研究第16页
    1.3.2 基于毒力基因敲除的弱毒疫苗第16-17页
  1.4 弓形虫MORN基因的研究进展第17页
  1.5 本研究的目的与意义第17-19页
第二章 弓形虫MORN2基因缺失株的构建及表型研究第19-31页
  2.1 材料方法第19-26页
    2.1.1 实验动物第19页
    2.1.2 虫株与细胞第19页
    2.1.3 试剂与仪器第19-20页
    2.1.4 主要溶液的配置第20页
    2.1.5 MORN2基因的CRISPR/Cas9质粒构建第20-23页
    2.1.6 MORN2基因同源臂的构建第23-24页
    2.1.7 电转染弓形虫速殖子第24-25页
    2.1.8 阳性单克隆的筛选第25-26页
    2.1.9 噬斑试验第26页
    2.1.10 小鼠体内毒力试验第26页
  2.2 结果第26-29页
    2.2.1 MORN2靶向的CRISPR/Cas9质粒第26-27页
    2.2.2 DHFR抗性的MORN2同源片段第27-28页
    2.2.3 阳性单克隆株的筛选第28页
    2.2.4 噬斑试验第28-29页
    2.2.5 小鼠毒力试验第29页
  2.3 讨论第29-31页
第三章 弓形虫MORN1基因缺失株的构建及免疫保护力评价第31-47页
  3.1 材料方法第31-36页
    3.1.1 实验动物第31页
    3.1.2 虫株与细胞第31页
    3.1.3 主要溶液的配制第31页
    3.1.4 MORN1基因的CRISPR/Cas9质粒构建第31页
    3.1.5 MORN1同源臂的构建第31-32页
    3.1.6 电转染弓形虫速殖子第32页
    3.1.7 阳性克隆的筛选第32页
    3.1.8 单克隆株的免疫荧光鉴定第32-33页
    3.1.9 免疫效果评价第33-36页
    3.1.10 统计学分析第36页
  3.2 结果第36-44页
    3.2.1 MORN1靶向的CRISPR/Cas9质粒第36-37页
    3.2.2 DHFR抗性的MORN1同源片段第37-38页
    3.2.3 阳性克隆的筛选第38页
    3.2.4 单克隆株的免疫荧光鉴定第38-39页
    3.2.5 ΔMORN1缺失株毒力检测第39页
    3.2.6 免疫鼠Ig G、Ig G1及Ig G2a抗体水平第39-40页
    3.2.7 免疫鼠淋巴细胞增殖能力第40页
    3.2.8 免疫鼠细胞因子水平第40-41页
    3.2.9 RH、PYS、Tg C7株的急性感染第41页
    3.2.10 Ⅱ型PRU株的慢性感染第41-42页
    3.2.11 先天性感染试验第42-44页
  3.3 讨论第44-47页
第四章 全文结论第47-48页
参考文献第48-53页
致谢第53-54页
作者简介第54页

本篇论文共54页,点击这进入下载页面
 
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