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异淀粉酶基因ISA1的定向编辑对稻米品质的影响

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异淀粉酶基因ISA1的定向编辑对稻米品质的影响
论文目录
 
摘要第1-6页
abstract第6-12页
第一章 引言第12-22页
  1.1 胚乳发育与稻米品质的关系第12-13页
    1.1.1 胚乳发育与外观品质第12页
    1.1.2 胚乳发育与加工品质第12页
    1.1.3 胚乳发育与蒸煮食味品质第12-13页
    1.1.4 胚乳发育与营养品质第13页
  1.2 胚乳发育与相关基因研究进展第13-18页
    1.2.1 胚乳与外观品质相关基因第13-17页
      1.2.1.1 粒型第13-14页
      1.2.1.2 垩白第14-17页
    1.2.2 胚乳与蒸煮食味品质相关基因第17页
    1.2.3 ISA1基因研究进展第17-18页
    1.2.4 胚乳与营养品质相关基因研究进展第18页
  1.3 基因编辑技术第18-20页
    1.3.1 ZFNs技术第18-19页
    1.3.2 TALENs技术第19-20页
    1.3.3 CRISPR/Cas9技术第20页
  1.4 本实验研究目的第20-22页
第二章 载体构建及基因编辑检测第22-28页
  2.1 实验材料第22页
    2.1.1 水稻材料第22页
    2.1.2 质粒载体第22页
  2.2 实验方法第22-25页
    2.2.1 敲除载体的构建第22-24页
      2.2.1.1 ISA1靶序列的选择与引物设计第22-23页
      2.2.1.2 oligo二聚体插入到载体中第23-24页
    2.2.2 农杆菌介导的转化第24页
    2.2.3 转基因阳性植株验证第24页
    2.2.4 突变植株的基因检测第24-25页
  2.3 结果与分析第25-27页
    2.3.1 靶位点的选择和引物设计第25页
    2.3.2 载体的鉴定第25-26页
    2.3.3 基因编辑结果第26-27页
  2.4 小结第27-28页
第三章 突变体isa1的表型鉴定及功能分析第28-39页
  3.1 材料与方法第28-32页
    3.1.1 农艺性状的考查第28页
    3.1.2 电镜观察水稻籽粒淀粉颗粒的变化第28-29页
    3.1.3 稻米淀粉含量的测定第29页
      3.1.3.1 总淀粉的测定第29页
      3.1.3.2 直链淀粉的测定第29页
    3.1.4 糊化温度的测定第29-30页
    3.1.5 胶稠度的测定第30页
    3.1.6 链长分布的测定第30页
    3.1.7 碘染水稻横截面第30页
    3.1.8 淀粉合成相关基因的表达水平第30-32页
      3.1.8.1 水稻种子RNA的提取方法第30页
      3.1.8.2 合成CDNA第30-31页
      3.1.8.3 Real-timePCR第31-32页
  3.2 结果与分析第32-38页
    3.2.1 农艺性状考查第32-33页
    3.2.2 突变体胚乳淀粉颗粒合成异常第33-35页
    3.2.3 胚乳理化指标的检测第35-37页
    3.2.4 淀粉合成相关基因的表达分析第37-38页
  3.3 小结第38-39页
    3.3.1 突变体的农艺性状和胚乳淀粉颗粒发生变化第38页
    3.3.2 突变体胚乳淀粉的理化性质发生显著变化第38页
    3.3.3 淀粉合成相关基因的表达量发生显著性变化第38-39页
第四章 全文结论第39-40页
参考文献第40-47页
附录第47-48页
致谢第48-49页
作者简历第49页

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