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AtDCGS和β-Zein共表达转基因大豆材料创制及其对蛋氨酸积累的影响

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AtDCGS和β-Zein共表达转基因大豆材料创制及其对蛋氨酸积累的影响
论文目录
 
摘要第1-7页
abstract第7-14页
第一章 引言第14-23页
  1.1 植物体内蛋氨酸的代谢调控第14-16页
    1.1.1 植物体内蛋氨酸合成与代谢第14-15页
    1.1.2 CGS的表达调控第15-16页
  1.2 提高植物体内蛋氨酸含量的方法及进展第16-22页
    1.2.1 蛋氨酸合成代谢通路的调控第16-19页
    1.2.2 储藏蛋白编码基因的调控第19-21页
    1.2.3 蛋氨酸代谢调控编码基因与富含蛋氨酸的储藏蛋白编码基因的聚合第21-22页
  1.3 本研究的目的与意义第22-23页
第二章 杂交创制共表达At DCGS和 β-Zein基因的大豆材料第23-30页
  2.1 实验材料第23页
  2.2 实验方法第23-26页
    2.2.1 种植条件第23页
    2.2.2 杂交方法第23-24页
    2.2.3 转基因大豆材料除草剂筛选第24页
    2.2.4 大豆基因组DNA提取第24-25页
    2.2.5 目的基因PCR检测第25-26页
  2.3 结果与分析第26-29页
    2.3.1 杂交亲本及子代统计第26页
    2.3.2 除草剂筛选及试纸条检测结果第26-28页
    2.3.3 PCR检测结果第28-29页
  2.4 讨论第29-30页
第三章 双价表达载体转化创制共表达At DCGS和 β-Zein基因的大豆材料第30-44页
  3.1 实验材料第30页
    3.1.1 植物材料第30页
    3.1.2 菌株与载体第30页
  3.2 实验方法第30-38页
    3.2.1 液体及固体培养基配制第30-31页
    3.2.2 菌落培养及菌液PCR第31-32页
    3.2.3 质粒提取第32-33页
    3.2.4 双价表达载体的构建第33-35页
    3.2.5 冻融法转化大肠杆菌第35页
    3.2.6 制备农杆菌EHA101感受态细胞第35页
    3.2.7 EHA101农杆菌电击转化第35-36页
    3.2.8 转基因大豆全株的转化与鉴定第36-38页
  3.3 结果与分析第38-43页
    3.3.1 表达载体构建第38-41页
    3.3.2 转基因材料的鉴定与筛选第41-43页
  3.4 讨论第43-44页
第四章 共表达At DCGS和 β-Zein基因的大豆材料的筛选、加代及品质鉴定第44-60页
  4.1 实验材料第44页
  4.2 实验方法第44-51页
    4.2.1 Southern blot与基因组整合鉴定第44-47页
    4.2.2 RNA提取与转录水平检测第47-49页
    4.2.3 SDS-PAGE蛋白水平检测第49-50页
    4.2.4 氨基酸含量检测第50-51页
    4.2.5 总蛋白及脂肪含量检测第51页
  4.3 结果与分析第51-57页
    4.3.1 Southern blot检测第51-53页
    4.3.2 转录水平检测第53-54页
    4.3.3 SDS-PAGE检测第54页
    4.3.4 蛋氨酸含量检测第54-56页
    4.3.5 游离氨基酸含量检测第56页
    4.3.6 总蛋白及脂肪含量的检测第56-57页
  4.4 讨论第57-60页
    4.4.1 基因工程手段提高大豆蛋氨酸含量第57-58页
    4.4.2 大豆蛋氨酸含量的提高对其它相关氨基酸的影响第58-60页
第五章 全文结论第60-61页
参考文献第61-69页
附录第69-71页
致谢第71-72页
作者简历第72页

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