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水稻Xoo诱导表达基因Xig1的克隆与功能分析
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水稻Xoo诱导表达基因Xig1的克隆与功能分析
论文目录
摘要
第1-7页
abstract
第7-11页
英文缩略表
第11-12页
第一章 引言
第12-21页
1.1 水稻白叶枯病研究进展
第12-14页
1.1.1 水稻白叶枯病的危害
第12页
1.1.2 水稻白叶枯病抗病基因相关研究
第12-13页
1.1.3 水稻白叶枯病感病基因相关研究
第13-14页
1.2 基因编辑技术概述
第14-18页
1.2.1 ZFNS技术与TALENS技术
第14-16页
1.2.2 CRISPR技术简介
第16-17页
1.2.3 CRISPR技术的优势
第17页
1.2.4 CRISPR技术在生物科学研究中的应用
第17-18页
1.3 本研究的立题依据和技术路线
第18-21页
1.3.1 本研究的立题依据和意义
第18-19页
1.3.2 本研究的技术路线
第19-21页
第二章 材料与方法
第21-32页
2.1 实验材料
第21-22页
2.1.1 水稻材料
第21页
2.1.2 酶和主要试剂、耗材
第21-22页
2.1.3 引物信息
第22页
2.2 实验方法
第22-32页
2.2.1 水稻基因组DNA的提取
第22-23页
2.2.2 PCR反应体系及程序
第23-24页
2.2.3 GenomeWalking
第24-25页
2.2.4 PCR产物纯化
第25-26页
2.2.5 载体连接与连接产物转化
第26页
2.2.5.1 PCR产物连接pEASY载体
第26页
2.2.5.2 转化大肠杆菌Top10感受态
第26页
2.2.6 质粒提取
第26-27页
2.2.7 质粒载体转化农杆菌
第27页
2.2.8 CRISPR/Cas9表达载体构建
第27页
2.2.8.1 CRISPR靶点选择
第27页
2.2.8.2 CRISPR载体构建
第27页
2.2.9 植物表达载体转化水稻愈伤组织
第27-28页
2.2.10 水稻白叶枯病菌的接种
第28-29页
2.2.10.1 白叶枯病菌的培养
第28页
2.2.10.2 水稻叶片注射接种
第28-29页
2.2.11 RNA样品的处理与qRT-PCR
第29-31页
2.2.11.1 磨样
第29页
2.2.11.2 RNA提取
第29-30页
2.2.11.3 RNA反转成CDNA
第30-31页
2.2.11.4 qRT-PCR
第31页
2.2.12 Xig1基因在烟草叶片的瞬时表达
第31-32页
第三章 结果与分析
第32-42页
3.1 Xig1基因表达分析
第32-33页
3.2 Xig1基因的克隆
第33-34页
3.3 XIG1的亚细胞定位
第34-36页
3.3.1 瞬时表达载体的构建
第34-35页
3.3.2 XIG1的在烟草中的瞬时表达与显微观察
第35-36页
3.4 Xig1基因编辑水稻突变体的创制与分析
第36-37页
3.4.1 CRISPR表达载体的构建
第36-37页
3.4.2 水稻遗传转化
第37页
3.5 基因编辑植株靶点编辑情况分析
第37-39页
3.6 T-DNAfree植株的筛选
第39页
3.7 基因编辑植株水稻白叶枯病抗性分析
第39-41页
3.8 突变材料主要农艺性状考察
第41-42页
第四章 讨论
第42-44页
第五章 全文结论
第44-45页
5.1 主要结论
第44页
5.2 后续研究计划
第44-45页
参考文献
第45-53页
致谢
第53-54页
作者简历
第54页
本篇论文共
54
页,
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。
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