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水稻Xoo诱导表达基因Xig1的克隆与功能分析

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水稻Xoo诱导表达基因Xig1的克隆与功能分析
论文目录
 
摘要第1-7页
abstract第7-11页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-21页
  1.1 水稻白叶枯病研究进展第12-14页
    1.1.1 水稻白叶枯病的危害第12页
    1.1.2 水稻白叶枯病抗病基因相关研究第12-13页
    1.1.3 水稻白叶枯病感病基因相关研究第13-14页
  1.2 基因编辑技术概述第14-18页
    1.2.1 ZFNS技术与TALENS技术第14-16页
    1.2.2 CRISPR技术简介第16-17页
    1.2.3 CRISPR技术的优势第17页
    1.2.4 CRISPR技术在生物科学研究中的应用第17-18页
  1.3 本研究的立题依据和技术路线第18-21页
    1.3.1 本研究的立题依据和意义第18-19页
    1.3.2 本研究的技术路线第19-21页
第二章 材料与方法第21-32页
  2.1 实验材料第21-22页
    2.1.1 水稻材料第21页
    2.1.2 酶和主要试剂、耗材第21-22页
    2.1.3 引物信息第22页
  2.2 实验方法第22-32页
    2.2.1 水稻基因组DNA的提取第22-23页
    2.2.2 PCR反应体系及程序第23-24页
    2.2.3 GenomeWalking第24-25页
    2.2.4 PCR产物纯化第25-26页
    2.2.5 载体连接与连接产物转化第26页
      2.2.5.1 PCR产物连接pEASY载体第26页
      2.2.5.2 转化大肠杆菌Top10感受态第26页
    2.2.6 质粒提取第26-27页
    2.2.7 质粒载体转化农杆菌第27页
    2.2.8 CRISPR/Cas9表达载体构建第27页
      2.2.8.1 CRISPR靶点选择第27页
      2.2.8.2 CRISPR载体构建第27页
    2.2.9 植物表达载体转化水稻愈伤组织第27-28页
    2.2.10 水稻白叶枯病菌的接种第28-29页
      2.2.10.1 白叶枯病菌的培养第28页
      2.2.10.2 水稻叶片注射接种第28-29页
    2.2.11 RNA样品的处理与qRT-PCR第29-31页
      2.2.11.1 磨样第29页
      2.2.11.2 RNA提取第29-30页
      2.2.11.3 RNA反转成CDNA第30-31页
      2.2.11.4 qRT-PCR第31页
    2.2.12 Xig1基因在烟草叶片的瞬时表达第31-32页
第三章 结果与分析第32-42页
  3.1 Xig1基因表达分析第32-33页
  3.2 Xig1基因的克隆第33-34页
  3.3 XIG1的亚细胞定位第34-36页
    3.3.1 瞬时表达载体的构建第34-35页
    3.3.2 XIG1的在烟草中的瞬时表达与显微观察第35-36页
  3.4 Xig1基因编辑水稻突变体的创制与分析第36-37页
    3.4.1 CRISPR表达载体的构建第36-37页
    3.4.2 水稻遗传转化第37页
  3.5 基因编辑植株靶点编辑情况分析第37-39页
  3.6 T-DNAfree植株的筛选第39页
  3.7 基因编辑植株水稻白叶枯病抗性分析第39-41页
  3.8 突变材料主要农艺性状考察第41-42页
第四章 讨论第42-44页
第五章 全文结论第44-45页
  5.1 主要结论第44页
  5.2 后续研究计划第44-45页
参考文献第45-53页
致谢第53-54页
作者简历第54页

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