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GhPR5K调控棉花抗黄萎病的分子机制

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GhPR5K调控棉花抗黄萎病的分子机制
论文目录
 
摘要第1-7页
abstract第7-13页
英文缩略表第13-14页
第一章 引言第14-20页
  1.1 类受体蛋白激酶研究背景第14-15页
  1.2 类受体蛋白诱导植物抗病的作用机理第15-16页
    1.2.1 类受体蛋白激酶的磷酸化反应和抗病防御反应第15页
    1.2.2 类受体蛋白激酶的去磷酸化反应与抗病防御反应第15-16页
  1.3 植物磷酸化蛋白质组研究现状第16-17页
  1.4 棉花黄萎病的研究现状第17-18页
    1.4.1 棉花黄萎病及其危害第17页
    1.4.2 棉花黄萎病的致病机制第17-18页
    1.4.3 棉花黄萎病的抗性机制第18页
  1.5 研究的目的及意义第18-20页
第二章 黄萎病菌诱导的陆地棉不同抗性品种根部蛋白磷酸化分析第20-27页
  2.1 实验材料第20页
    2.1.1 植物材料第20页
    2.1.2 供试菌株第20页
  2.2 实验方法第20-22页
    2.2.1 材料准备第20页
    2.2.2 非标记定量蛋白质组学流程第20-22页
      2.2.2.1 蛋白质的裂解和定量第20-21页
      2.2.2.2 蛋白质的SDS-PAGE试验第21页
      2.2.2.3 蛋白质的酶解及肽段检测、脱盐第21页
      2.2.2.4 磷酸化肽段的富集第21页
      2.2.2.5 酶解产物的LCMS/MS分析第21页
      2.2.2.6 Maxquant的非标记分析第21-22页
  2.3 实验结果第22-26页
    2.3.1 黄萎病菌诱导的棉花根部蛋白的磷酸化分析第22-23页
    2.3.2 黄萎病菌诱导的棉花根部磷酸化蛋白的生物功能分类第23-25页
    2.3.3 差异磷酸化蛋白质的修饰特征分析第25页
    2.3.4 GhPR5K蛋白的初步分析第25-26页
  2.4 讨论第26-27页
第三章 陆地棉GhPR5K基因的克隆及序列分析第27-33页
  3.1 实验材料第27页
    3.1.1 植物材料第27页
    3.1.2 载体与菌株第27页
    3.1.3 酶及其他试剂耗材、试剂盒第27页
  3.2 实验方法第27-30页
    3.2.1 植物材料第27页
    3.2.2 总RNA的提取及反转录第27-29页
    3.2.3 目的基因的克隆第29-30页
  3.3 实验结果第30-32页
    3.3.1 RNA提取结果第30-31页
    3.3.2 GhPR5K基因的克隆第31页
    3.3.3 GhPR5K基因的结构分析第31-32页
  3.4 小结与讨论第32-33页
第四章 GhPR5K基因在棉花中的功能验证第33-43页
  4.1 实验材料第33页
    4.1.1 植物材料第33页
    4.1.2 酶、生化试剂及仪器耗材第33页
  4.2 实验方法第33-38页
    4.2.1 VIGS研究GhPR5K基因的功能第33-37页
    4.2.2 超表达烟草研究GhPR5K基因的功能第37-38页
  4.3 实验结果第38-42页
    4.3.1 VIGS实验结果第38-40页
    4.3.2 超表达烟草实验结果第40-42页
  4.4 小结与讨论第42-43页
第五章 GhPR5K基因在棉花中的抗病机制第43-50页
  5.1 实验材料第43页
    5.1.1 植物材料第43页
    5.1.2 生化试剂及仪器耗材第43页
  5.2 实验方法第43-45页
    5.2.1 植物叶片过氧化氢积累检测第43页
    5.2.2 植物木质化检测第43页
    5.2.3 植物叶片台盼蓝染色第43-44页
    5.2.4 病原菌再分离实验第44页
    5.2.5 抗病相关基因的表达量测定第44-45页
  5.3 实验结果第45-48页
    5.3.1 植物叶片过氧化氢积累情况第45-46页
    5.3.2 植物木质部染色情况第46页
    5.3.3 植物叶片台盼蓝染色情况第46-47页
    5.3.4 病原菌再分离实验结果第47页
    5.3.5 抗病相关基因的表达量测定第47-48页
  5.4 小结与讨论第48-50页
第六章 GhPR5K互作蛋白的筛选及相互作用验证第50-61页
  6.1 实验材料第50-52页
    6.1.1 植物材料第50页
    6.1.2 菌株与质粒第50页
    6.1.3 工具酶及试剂盒第50页
    6.1.4 化学试剂第50-52页
  6.2 实验方法第52-56页
    6.2.1 构建诱饵质粒第52-53页
    6.2.2 诱饵质粒转化酵母细胞第53-54页
    6.2.3 诱饵蛋白自激活及毒性检测第54-55页
    6.2.4 酵母细胞接合筛选互作蛋白第55页
    6.2.5 鉴定阳性克隆第55页
    6.2.6 互作蛋白的分析第55-56页
  6.3 实验结果第56-59页
    6.3.1 载体构建第56页
    6.3.2 诱饵蛋白的自激活实验和毒性检测结果第56-57页
    6.3.3 棉花GhPR5K互作蛋白的筛选第57-58页
    6.3.4 阳性克隆DNA提取和测序比对第58-59页
    6.3.6 互作蛋白的酵母回转实验验证第59页
  6.4 小结与讨论第59-61页
第七章 全文结论及展望第61-62页
  7.1 全文结论第61页
  7.2 展望第61-62页
参考文献第62-68页
致谢第68-69页
作者简历第69页

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