论文目录 | |
缩略词对照表 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Summary | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-20页 |
1.1 动物抗病育种 | 第11-13页 |
1.1.1 动物抗病育种的研究进展 | 第11-12页 |
1.1.2 动物抗病性的遗传基础 | 第12页 |
1.1.3 动物抗病育种的途径 | 第12-13页 |
1.2 RNAi技术 | 第13-16页 |
1.2.1 RNAi干扰的技术原理 | 第13页 |
1.2.2 RNAi技术的研究进展 | 第13-16页 |
1.3 转基因动物 | 第16-18页 |
1.3.1 转基因动物的研究进展 | 第16页 |
1.3.2 转基因动物的研究方法 | 第16-17页 |
1.3.3 转基因动物的应用 | 第17-18页 |
1.4 研究目的与意义 | 第18-20页 |
第二章 慢病毒介导的RNAi技术生产抗FMDV转基因羊的初步研究 | 第20-41页 |
2.1 实验材料与方法 | 第20-29页 |
2.1.1 毒株、细胞和载体 | 第20页 |
2.1.2 实验试剂 | 第20页 |
2.1.3 实验仪器 | 第20-21页 |
2.1.4 引物设计与合成 | 第21-22页 |
2.1.5 表达载体的构建 | 第22-25页 |
2.1.6 细胞的培养与病毒的复制 | 第25-26页 |
2.1.7 ON口蹄疫病毒TCID_(50)的测定 | 第26页 |
2.1.8 质粒转染BHK21细胞 | 第26页 |
2.1.9 转染细胞的攻毒实验及提取攻毒细胞的RNA | 第26-27页 |
2.1.10 Real-timePCR检测细胞内病毒RNA | 第27页 |
2.1.11 含重组质粒的细胞测定病毒TCID | 第27-28页 |
2.1.12 慢病毒的制备和稳定细胞系的筛选 | 第28页 |
2.1.13 Real-timePCR检测稳定筛选的细胞内病毒RNA | 第28-29页 |
2.1.14 含慢病毒干扰载体的细胞测定病毒的TCID | 第29页 |
2.2 实验结果 | 第29-39页 |
2.2.1 重组表达质粒的鉴定 | 第29-32页 |
2.2.2 病毒TCID_(50)的测定和RNA的提取 | 第32-34页 |
2.2.3 RT-PCR检测结果分析 | 第34页 |
2.2.4 重组质粒转染BHK21细胞后病毒TCID_(50)的测定 | 第34-35页 |
2.2.5 RT-PCR检测慢病毒干扰载体对FMDV抑制效率 | 第35-38页 |
2.2.6 含有慢病毒干扰载体的细胞测定病毒的TCID | 第38-39页 |
2.3 讨论 | 第39-40页 |
2.4 小结 | 第40-41页 |
第三章 慢病毒介导的RNAi技术生产抗PPRV转基因羊的初步研究 | 第41-58页 |
3.1 实验材料与方法 | 第41-48页 |
3.1.1 毒株、细胞和载体 | 第41页 |
3.1.2 实验试剂 | 第41页 |
3.1.3 实验仪器 | 第41-42页 |
3.1.4 引物设计与合成 | 第42-43页 |
3.1.5 表达载体的构建 | 第43-45页 |
3.1.6 细胞的培养与病毒的复制 | 第45页 |
3.1.7 Nigeria75/1小反刍兽疫病毒TCID_(50)的测定 | 第45页 |
3.1.8 质粒转染VERO细胞 | 第45-46页 |
3.1.9 转染细胞的攻毒实验及提取攻毒细胞的RNA | 第46页 |
3.1.10 RT-PCR检测细胞内病毒RNA | 第46页 |
3.1.11 含重组质粒的细胞测定病毒TCID | 第46-47页 |
3.1.12 慢病毒的制备和稳定细胞系的筛选 | 第47页 |
3.1.13 Real-timePCR检测稳定筛选的细胞内病毒RNA | 第47-48页 |
3.1.14 含慢病毒干扰载体的细胞测定病毒的TCID | 第48页 |
3.2 实验结果 | 第48-55页 |
3.2.1 重组表达质粒的鉴定 | 第48-50页 |
3.2.2 病毒TCID_(50)的测定和RNA的提取 | 第50-52页 |
3.2.3 RT-PCR检测结果分析 | 第52页 |
3.2.4 重组质粒转染VERO细胞后病毒TCID_(50)的测定 | 第52-53页 |
3.2.5 RT-PCR检测慢病毒干扰载体对PPRV抑制效率 | 第53-55页 |
3.2.6 含有慢病毒干扰载体的细胞测定病毒的TCID | 第55页 |
3.3 讨论 | 第55-56页 |
3.4 小结 | 第56-58页 |
总结论 | 第58-59页 |
1 本研究的结论 | 第58页 |
2 本研究的不足之处 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
个人简介 | 第67-68页 |
导师简介 | 第68-69页 |