论文目录 | |
| 缩略语表 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Summary | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-18页 |
| 1.1 植物响应干旱胁迫的方式 | 第10-11页 |
| 1.1.1 植物的形态结构和生理特性 | 第10页 |
| 1.1.2 植物体内的蛋白 | 第10-11页 |
| 1.1.3 植物的渗透调节 | 第11页 |
| 1.2 植物体内脯氨酸代谢途径 | 第11-13页 |
| 1.2.1 脯氨酸的合成途径 | 第12页 |
| 1.2.2 脯氨酸的分解途径 | 第12-13页 |
| 1.2.3 脯氨酸的转运 | 第13页 |
| 1.3 脯氨酸脱氢酶 | 第13-14页 |
| 1.3.1 ProDH基因在转录水平的调控 | 第13-14页 |
| 1.3.2 ProDH基因在转录后水平的调控 | 第14页 |
| 1.4 基因工程手段改造植物脯氨酸代谢 | 第14-15页 |
| 1.4.1 脯氨酸合成途径相关基因 | 第14-15页 |
| 1.4.2 脯氨酸分解途径相关基因 | 第15页 |
| 1.5 人工miRNA技术 | 第15-16页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-29页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 载体、菌株 | 第18页 |
| 2.1.3 试剂和工具酶 | 第18页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.2 方法 | 第19-27页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第19页 |
| 2.2.2 RNA的提取和cDNA合成 | 第19页 |
| 2.2.3 马铃薯StProDH1基因的克隆 | 第19-21页 |
| 2.2.4 StProDH1基因和StP5CS基因组织特异性表达分析 | 第21-22页 |
| 2.2.5 克隆载体amiR-ProDH1构建 | 第22-23页 |
| 2.2.6 表达载体pCPB121-amiR-ProDH1的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.7 马铃薯的遗传转化 | 第25-27页 |
| 2.2.8 转基因植株的检测 | 第27页 |
| 2.3 转基因植株和非转基因植株的根茎叶脯氨酸含量测定 | 第27页 |
| 2.3.1 酸性茚三酮测定脯氨酸含量所需试剂的配制 | 第27页 |
| 2.3.2 测定各样品的脯氨酸含量 | 第27页 |
| 2.4 转基因植株和非转基因植株的胁迫处理 | 第27-28页 |
| 2.4.1 20%PEG胁迫处理 | 第27-28页 |
| 2.4.2 外源脯氨酸胁迫处理 | 第28页 |
| 2.5 胁迫处理后转基因植株和非转基因植株qRT-PCR分析 | 第28页 |
| 2.6 胁迫处理后转基因植株和非转基因植株脯氨酸含量测定 | 第28-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-44页 |
| 3.1 StProDH1基因生物信息学分析 | 第29-36页 |
| 3.1.1 StProDH1氨基酸基本理化性质 | 第29-30页 |
| 3.1.2 StProDH1基因的基本结构 | 第30页 |
| 3.1.3 StProDH1基因的启动子顺式作用元件分析 | 第30-31页 |
| 3.1.4 StProDH1在不同物种中的进化关系及氨基酸多序列比对 | 第31-34页 |
| 3.1.5 马铃薯StProDH1跨膜结构域预测 | 第34页 |
| 3.1.6 马铃薯StProDH1的疏水性分析 | 第34-35页 |
| 3.1.7 马铃薯StProDH1蛋白亚细胞定位 | 第35页 |
| 3.1.8 StProDH1蛋白潜在磷酸化位点分析 | 第35页 |
| 3.1.9 StProDH1蛋白二级结构和三级结构预测 | 第35-36页 |
| 3.2 马铃薯StProDH1基因克隆及测序 | 第36-37页 |
| 3.3 amiR-ProDH1前体片段的克隆及测序 | 第37-38页 |
| 3.4 pCPB121-amiR-ProDH1载体检测结果 | 第38-39页 |
| 3.5 表达载体pCPB121-amiR-ProDH1遗传转化马铃薯 | 第39-44页 |
| 3.5.1 马铃薯转化植株的PCR检测 | 第40-41页 |
| 3.5.2 StProDH1基因和StP5CS基因组织特异性表达及马铃薯各组织脯氨酸含量测定 | 第41-42页 |
| 3.5.3 StProDH1基因和StP5CS基因在低水势条件及胁迫消除条件下的表达分析 | 第42页 |
| 3.5.4 低水势条件及胁迫消除条件下马铃薯脯氨酸含量测定 | 第42-43页 |
| 3.5.5 StProDH1基因外源脯氨酸处理条件下的表达分析 | 第43-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-46页 |
| 4.1 讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 结论与展望 | 第46-47页 |
| 5.1 结论 | 第46页 |
| 5.2 展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55-56页 |
| 导师简介 | 第56-57页 |
