论文目录 | |
摘要 | 第1-5页 |
abstract | 第5-10页 |
主要符号表 | 第10-11页 |
第1章 引言 | 第11-20页 |
1.1 维甲酸X受体概述 | 第11页 |
1.2 维甲酸X受体的天然和环境配体 | 第11-12页 |
1.3 转录激活实验 | 第12-16页 |
1.3.1 转录激活实验构建方法 | 第13页 |
1.3.2 报告基因的选择 | 第13-15页 |
1.3.3 宿主细胞的选择 | 第15-16页 |
1.4 转录激活实验在环境内分泌干扰物监测中的应用 | 第16页 |
1.5 转录激活实验在维甲酸X受体干扰物监测中的应用 | 第16-18页 |
1.6 主要研究内容和技术路线 | 第18-20页 |
1.6.1 研究内容 | 第18-19页 |
1.6.2 研究技术路线 | 第19-20页 |
第2章 材料与方法 | 第20-30页 |
2.1 材料 | 第20-24页 |
2.1.1 实验对象 | 第20页 |
2.1.2 实验用细胞株和菌株 | 第20页 |
2.1.3 质粒 | 第20-23页 |
2.1.4 试剂盒以及主要试剂 | 第23页 |
2.1.5 仪器 | 第23-24页 |
2.1.6 引物 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-30页 |
2.2.1 重组表达载体pcDNA3.1-HdRXR的构建 | 第24-26页 |
2.2.2 重组表达载体pcDNA3.1-DrRXR的构建 | 第26页 |
2.2.3 重组报告基因质粒pGL3-promoter-RXRE的构建 | 第26页 |
2.2.4 去内毒素大量抽提质粒 | 第26-27页 |
2.2.5 293FT细胞的培养 | 第27-28页 |
2.2.6 细胞毒性实验 | 第28页 |
2.2.7 报告基因实验 | 第28-29页 |
2.2.8 数据处理 | 第29-30页 |
第3章 实验结果 | 第30-47页 |
3.1 总RNA提取结果 | 第30-31页 |
3.1.1 杂色鲍总RNA提取结果 | 第30页 |
3.1.2 斑马鱼总RNA提取结果 | 第30-31页 |
3.2 RXR开放阅读框(ORF)扩增结果 | 第31-32页 |
3.2.1 杂色鲍RXR(HdRXR)开放阅读框(ORF)扩增 | 第31页 |
3.2.2 斑马鱼RXR(DrRXR)开放阅读框(ORF)扩增 | 第31-32页 |
3.3 重组质粒pcDNA3.1-HdRXR的鉴定 | 第32-36页 |
3.3.1 pcDNA3.1-HdRXR质粒图 | 第32-33页 |
3.3.2 pcDNA3.1-HdRXR菌体PCR检测 | 第33页 |
3.3.3 pcDNA3.1-HdRXR酶切检测 | 第33-34页 |
3.3.4 pcDNA3.1-HdRXR插入片段测序鉴定 | 第34-36页 |
3.4 重组质粒pcDNA3.1-DrRXR的鉴定 | 第36-40页 |
3.4.1 pcDNA3.1-DrRXR质粒图 | 第36-37页 |
3.4.2 pcDNA3.1-DrRXR菌体PCR检测 | 第37页 |
3.4.3 pcDNA3.1-DrRXR酶切检测 | 第37-38页 |
3.4.4 pcDNA3.1-DrRXR插入片段测序鉴定 | 第38-40页 |
3.5 重组质粒pGL3-promoter-RXRE的鉴定 | 第40-42页 |
3.6 杂色鲍RXR配体的筛选 | 第42-43页 |
3.7 斑马鱼RXR配体的筛选 | 第43-45页 |
3.8 不同化合物与杂色鲍和斑马鱼RXR结合的差异 | 第45-47页 |
第4章 讨论 | 第47-52页 |
4.1 杂色鲍RXR转录激活系统的构建 | 第47-48页 |
4.1.1 宿主细胞的选择 | 第47页 |
4.1.2 内参报告基因的选择 | 第47-48页 |
4.2 杂色鲍RXR的可能配体 | 第48-50页 |
4.3 RXR与化合物的结合具有种属特异性 | 第50-52页 |
第5章 结论与展望 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第59页 |