论文目录 | |
摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-14页 |
第一章 绪论 | 第14-23页 |
1.1 氮素污染及危害 | 第14页 |
1.2 生物脱氮工艺研究进展 | 第14-15页 |
1.2.1 硝化-反硝化工艺 | 第14-15页 |
1.2.2 ANAMMOX及其组合工艺 | 第15页 |
1.3 厌氧氨氧化反应原理 | 第15-16页 |
1.4 厌氧氨氧化反应过程中的主要功能微生物 | 第16-17页 |
1.4.1 氨氧化细菌(AOB) | 第16页 |
1.4.2 亚硝酸盐氧化细菌(NOB) | 第16页 |
1.4.3 反硝化细菌(DB) | 第16-17页 |
1.4.4 厌氧氨氧化细菌(Anammox) | 第17页 |
1.5 厌氧氨氧化工艺中存在的缺陷 | 第17-18页 |
1.6 常见的分子生物学技术 | 第18-20页 |
1.6.1 PCR-DGGE技术 | 第18页 |
1.6.2 高通量测序技术 | 第18-19页 |
1.6.3 实时荧光定量PCR测定技术 | 第19-20页 |
1.7 课题研究意义,主要内容及技术路线 | 第20-23页 |
1.7.1 研究意义 | 第20-21页 |
1.7.2 主要研究内容 | 第21-22页 |
1.7.3 研究技术路线 | 第22-23页 |
第二章 试验材料与方法 | 第23-30页 |
2.1 试验材料 | 第23-24页 |
2.1.1 试验装置 | 第23页 |
2.1.2 试验用水 | 第23-24页 |
2.2 试验方法 | 第24-29页 |
2.2.1 试验水质指标检测 | 第24页 |
2.2.2 污泥样品采集 | 第24页 |
2.2.3 污泥微生物基因组DNA提取 | 第24-25页 |
2.2.4 基于PCR-DGGE技术分析微生物群落结构的方法 | 第25-27页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR分析方法 | 第27-28页 |
2.2.6 高通量测序方法 | 第28-29页 |
2.3 主要仪器设备 | 第29-30页 |
第三章 DGGE分析厌氧氨氧化反应器中微生物群落变化 | 第30-38页 |
3.1 引言 | 第30页 |
3.2 材料与方法 | 第30-31页 |
3.2.1 实验材料 | 第30页 |
3.2.2 实验方法 | 第30-31页 |
3.3 结果分析 | 第31-36页 |
3.3.1 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
3.3.2 厌氧氨氧化中试反应器中微生物的DGGE指纹图谱分析 | 第31-34页 |
3.3.3 厌氧氨氧化中试反应器中各样品的未加权聚类(UPGMA)分析 | 第34-35页 |
3.3.4 厌氧氨氧化反应器中微生物相似性比较 | 第35页 |
3.3.5 厌氧氨氧化中试反应器中微生物多样性指数分析 | 第35-36页 |
3.4 讨论 | 第36-37页 |
3.4.1 PCR扩增 | 第36页 |
3.4.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第36页 |
3.4.3 DGGE凝胶电泳 | 第36-37页 |
3.5 本章小结 | 第37-38页 |
3.5.1 PCR-DGGE指纹图谱分析 | 第37页 |
3.5.2 微生物相似性分析 | 第37页 |
3.5.3 厌氧氨氧化中试反应器中的微生物群落结构变化 | 第37-38页 |
第四章 qPCR分析厌氧氨氧化中试反应器中功能细菌变化 | 第38-50页 |
4.1 引言 | 第38页 |
4.2 材料与方法 | 第38-39页 |
4.2.1 实验材料 | 第38页 |
4.2.2 污泥样品的DNA抽提 | 第38页 |
4.2.3 标准品的制备 | 第38-39页 |
4.3 结果分析 | 第39-48页 |
4.3.1 引物AMX809F/ AMX1066R的定量结果分析 | 第39-40页 |
4.3.2 引物HzsBF/ HzsBR的定量结果分析 | 第40-41页 |
4.3.3 引物AOB16s F/ AOB16sR的定量结果分析 | 第41页 |
4.3.4 引物amoAF/ amo AR的定量结果分析 | 第41-42页 |
4.3.5 引物NOB16s F/ NOB16sR的定量结果分析 | 第42-43页 |
4.3.6 引物DB16sF/ DB16sR的定量结果分析 | 第43-44页 |
4.3.7 引物NirsF/ NirsR的定量结果分析 | 第44-45页 |
4.3.8 引物Bac16sF/ Bac16sR的定量结果分析 | 第45-46页 |
4.3.9 厌氧氨氧化中试反应器中各功能微生物的拷贝数分析 | 第46-48页 |
4.4 本章小结 | 第48-50页 |
4.4.1 标准曲线的绘制 | 第48页 |
4.4.2 亚硝化启动过程中主要功能微生物的含量变化 | 第48-49页 |
4.4.3 亚硝化-厌氧氨氧化联合期间主要功能微生物含量变化 | 第49-50页 |
第五章 有机物对Anammox菌群落结构的影响 | 第50-61页 |
5.1 引言 | 第50页 |
5.2 材料与方法 | 第50-51页 |
5.2.1 工艺及污泥样品 | 第50-51页 |
5.2.2 污泥样品总DNA的提取 | 第51页 |
5.2.3 PCR扩增 | 第51页 |
5.2.4 变性梯度凝胶电泳(DGGE) | 第51页 |
5.2.5 DGGE指纹图谱分析 | 第51页 |
5.2.6 割胶测序和系统发育树分析 | 第51页 |
5.3 结果分析 | 第51-59页 |
5.3.1 投加不同C/N条件下有机物对ANAMMOX工艺脱氮的影响 | 第51-52页 |
5.3.2 DGGE指纹图谱分析 | 第52-54页 |
5.3.3 微生物多样性分析 | 第54-56页 |
5.3.4 各样品的未加权聚类(UPGMA)分析 | 第56-57页 |
5.3.5 细菌系统发育分析 | 第57-58页 |
5.3.6 实时荧光定量PCR结果 | 第58-59页 |
5.4 本章小结 | 第59-61页 |
5.4.1 DGGE指纹图谱分析结果 | 第59页 |
5.4.2 16S rDNA测序结果分析 | 第59-60页 |
5.4.3 实时荧光定量PCR测定结果分析 | 第60-61页 |
第六章 高通量分析有机物对Anammox菌群的影响 | 第61-70页 |
6.1 引言 | 第61页 |
6.2 材料与方法 | 第61页 |
6.2.1 工艺及污泥取样 | 第61页 |
6.2.2 污泥样品总DNA的提取 | 第61页 |
6.2.3 PCR扩增 | 第61页 |
6.2.4 高通量测序 | 第61页 |
6.2.5 高通量序列分析 | 第61页 |
6.3 结果分析 | 第61-69页 |
6.3.1 各份污泥样品脱氮性能参数 | 第61-62页 |
6.3.2 不同样品中微生物多样性比较 | 第62-63页 |
6.3.3 不同样品中的微生物门水平群落结构分析 | 第63-66页 |
6.3.4 不同样品中的微生物属水平群落结构分析 | 第66-69页 |
6.4 本章小结 | 第69-70页 |
6.4.1 有机物对厌氧氨氧化工艺脱氮效率的影响 | 第69页 |
6.4.2 有机物对Anammox细菌及反硝化细菌的影响 | 第69页 |
6.4.3 高通量测序结果分析 | 第69-70页 |
第七章 结论与建议 | 第70-72页 |
7.1 结论 | 第70-71页 |
7.2 建议 | 第71-72页 |
图表目录 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
作者简介 | 第82页 |