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野生车前草抗穗枯病菌差异表达基因筛选及其功能鉴定
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野生车前草抗穗枯病菌差异表达基因筛选及其功能鉴定
论文目录
摘要
第1-7页
Abstract
第7-8页
本文缩写词
第8-9页
第一章 综述
第9-17页
1 差异表达基因筛选技术研究进展
第9-11页
1.1 mRNA差异显示技术
第9页
1.2 cDNA示差分析技术
第9页
1.3 抑制消减杂交技术
第9-10页
1.4 基因芯片技术
第10页
1.5 基因鉴定集成法
第10页
1.6 数字基因表达谱
第10-11页
1.7 cDNA-AFLP技术
第11页
2 植物抗性相关基因研究进展
第11-15页
2.1 植物抗病基因研究进展
第11-14页
2.1.1 与病原物亲和性因子有关的抗病性
第11页
2.1.2 与病原物不亲和性因子有关的抗病性
第11-12页
2.1.3 信号识别与信号传递
第12页
2.1.4 植物抗病基因的克隆
第12-13页
2.1.5 抗病基因的鉴定
第13页
2.1.6 植物抗病基因的功能
第13-14页
2.2 植物防卫反应基因研究进展
第14-15页
2.2.1 防卫反应发生的特点
第14页
2.2.2 防卫反应基因的研究策略
第14页
2.2.3 防卫反应基因的主要类型
第14-15页
2.2.4 防卫反应基因的表达
第15页
3 论文立项背景及研究意义
第15-17页
3.1 本论文课题来源
第15页
3.2 本论文研究背景和意义
第15-16页
3.3 本论文研究主要内容和技术路线
第16-17页
3.3.1 本论文的主要研究内容
第16页
3.3.2 技术路线
第16-17页
第二章 穗枯病菌诱导的野生车前草抗性相关基因片段筛选
第17-45页
1 材料
第17-19页
1.1 菌种
第17页
1.2 车前草幼苗
第17页
1.3 培养基
第17页
1.4 主要试剂及其配置
第17-18页
1.5 主要仪器和耗材
第18页
1.6 引物合成
第18-19页
2 方法
第19-25页
2.1 接菌诱导
第19页
2.2 总RNA提取
第19-20页
2.3 RNA纯度的检测
第20页
2.4 cDNA合成
第20-21页
2.5 cDNA的检测
第21页
2.6 DNA-AFLP分析
第21-25页
2.6.1 cDNA酶切
第21-22页
(1) cDNA样品编号
第21页
(2) 内切酶及其缓冲液选择
第21-22页
(3) 酶切反应
第22页
2.6.2 酶切片段的连接
第22-23页
2.6.3 预扩增
第23-24页
2.6.4 选择性扩增
第24页
2.6.5 cDNA-AFLP转录图的获得
第24-25页
3 结果与分析
第25-43页
3.1 样品总RNA提取
第25页
3.2 cDNA合成
第25-26页
3.3 预扩增
第26页
3.4 选择性扩增初步筛选引物
第26-27页
3.5 选择性扩增再次筛选引物
第27-33页
3.6 cDNA-AFLP转录图谱的获得
第33-43页
4 结论与讨论
第43-45页
第三章 穗枯病菌诱导的野生车前草抗性相关基因片段克隆
第45-54页
1 材料与方法
第45-46页
1.1 感受态
第45页
1.2 培养基
第45页
1.3 连接载体系统及抗生素
第45页
1.4 试剂及其配置
第45页
1.5 主要仪器和耗材
第45-46页
2 方法
第46-48页
2.1 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
第46页
2.2 差异性片段的回收
第46页
2.3 差异片段的2次扩增
第46页
2.4 PCR产物的割胶回收和纯化
第46-47页
2.5 差异片段的克隆
第47页
2.6 蓝白斑阳性克隆筛选
第47-48页
2.7 重组质粒快速鉴定
第48页
2.8 重组质粒DNA小量提取
第48页
2.9 目的基因组片段的序列的测定
第48页
3 结果与分析
第48-52页
3.1 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
第48-50页
3.2 差异片段的2次扩增
第50页
3.3 PCR产物的割胶回收
第50页
3.4 差异片段的克隆
第50-51页
3.5 差异片段D1的测序
第51-52页
3.6 差异片段D1的功能分析
第52页
4 结论与讨论
第52-54页
参考文献
第54-58页
致谢
第58页
本篇论文共
58
页,
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