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野生车前草抗穗枯病菌差异表达基因筛选及其功能鉴定

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野生车前草抗穗枯病菌差异表达基因筛选及其功能鉴定
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-8页
本文缩写词第8-9页
第一章 综述第9-17页
1 差异表达基因筛选技术研究进展第9-11页
  1.1 mRNA差异显示技术第9页
  1.2 cDNA示差分析技术第9页
  1.3 抑制消减杂交技术第9-10页
  1.4 基因芯片技术第10页
  1.5 基因鉴定集成法第10页
  1.6 数字基因表达谱第10-11页
  1.7 cDNA-AFLP技术第11页
2 植物抗性相关基因研究进展第11-15页
  2.1 植物抗病基因研究进展第11-14页
    2.1.1 与病原物亲和性因子有关的抗病性第11页
    2.1.2 与病原物不亲和性因子有关的抗病性第11-12页
    2.1.3 信号识别与信号传递第12页
    2.1.4 植物抗病基因的克隆第12-13页
    2.1.5 抗病基因的鉴定第13页
    2.1.6 植物抗病基因的功能第13-14页
  2.2 植物防卫反应基因研究进展第14-15页
    2.2.1 防卫反应发生的特点第14页
    2.2.2 防卫反应基因的研究策略第14页
    2.2.3 防卫反应基因的主要类型第14-15页
    2.2.4 防卫反应基因的表达第15页
3 论文立项背景及研究意义第15-17页
  3.1 本论文课题来源第15页
  3.2 本论文研究背景和意义第15-16页
  3.3 本论文研究主要内容和技术路线第16-17页
    3.3.1 本论文的主要研究内容第16页
    3.3.2 技术路线第16-17页
第二章 穗枯病菌诱导的野生车前草抗性相关基因片段筛选第17-45页
1 材料第17-19页
  1.1 菌种第17页
  1.2 车前草幼苗第17页
  1.3 培养基第17页
  1.4 主要试剂及其配置第17-18页
  1.5 主要仪器和耗材第18页
  1.6 引物合成第18-19页
2 方法第19-25页
  2.1 接菌诱导第19页
  2.2 总RNA提取第19-20页
  2.3 RNA纯度的检测第20页
  2.4 cDNA合成第20-21页
  2.5 cDNA的检测第21页
  2.6 DNA-AFLP分析第21-25页
    2.6.1 cDNA酶切第21-22页
(1) cDNA样品编号第21页
(2) 内切酶及其缓冲液选择第21-22页
(3) 酶切反应第22页
    2.6.2 酶切片段的连接第22-23页
    2.6.3 预扩增第23-24页
    2.6.4 选择性扩增第24页
    2.6.5 cDNA-AFLP转录图的获得第24-25页
3 结果与分析第25-43页
  3.1 样品总RNA提取第25页
  3.2 cDNA合成第25-26页
  3.3 预扩增第26页
  3.4 选择性扩增初步筛选引物第26-27页
  3.5 选择性扩增再次筛选引物第27-33页
  3.6 cDNA-AFLP转录图谱的获得第33-43页
4 结论与讨论第43-45页
第三章 穗枯病菌诱导的野生车前草抗性相关基因片段克隆第45-54页
1 材料与方法第45-46页
  1.1 感受态第45页
  1.2 培养基第45页
  1.3 连接载体系统及抗生素第45页
  1.4 试剂及其配置第45页
  1.5 主要仪器和耗材第45-46页
2 方法第46-48页
  2.1 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第46页
  2.2 差异性片段的回收第46页
  2.3 差异片段的2次扩增第46页
  2.4 PCR产物的割胶回收和纯化第46-47页
  2.5 差异片段的克隆第47页
  2.6 蓝白斑阳性克隆筛选第47-48页
  2.7 重组质粒快速鉴定第48页
  2.8 重组质粒DNA小量提取第48页
  2.9 目的基因组片段的序列的测定第48页
3 结果与分析第48-52页
  3.1 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第48-50页
  3.2 差异片段的2次扩增第50页
  3.3 PCR产物的割胶回收第50页
  3.4 差异片段的克隆第50-51页
  3.5 差异片段D1的测序第51-52页
  3.6 差异片段D1的功能分析第52页
4 结论与讨论第52-54页
参考文献第54-58页
致谢第58页

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