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荷花NnγGCS基因克隆、表达及功能验证
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荷花NnγGCS基因克隆、表达及功能验证
论文目录
 
摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词第11-12页
引言第12-13页
第一章 文章综述第13-23页
　　1 重金属及其危害第13-14页
　　2 水体重金属污染现状第14页
　　3 重金属修复方法第14-18页
　　　　· 物理化学修复方法第14-15页
　　　　· 农业生态修复技术第15-16页
　　　　· 生物修复技术第16-18页
　　4 植物的重金属抗性机制第18-19页
　　　　· 螯合作用第18-19页
　　　　· 区室化作用第19页
　　　　· 细胞修复第19页
　　5 基因工程在植物修复中应用第19-21页
　　6 植物修复应用前景第21-23页
第二章 荷花NnγGCS基因克隆及序列分析第23-37页
　　1 材料与方法第24-30页
　　　　· 植物材料第24页
　　　　· 试剂与仪器第24-25页
　　　　　　· 试剂第24页
　　　　　　· 仪器设备第24页
　　　　　　· 菌株与载体第24-25页
　　　　　　· 引物序列第25页
　　　　· 实验方法第25-30页
　　　　　　· 基因简并引物设计第25-26页
　　　　　　· RNA提取第26页
　　　　　　· 1st-strand cDNA合成及检测第26-27页
　　　　　　· PCR扩增第27页
　　　　　　· 片段纯化与连接转化第27页
　　　　　　· 重组子筛选及测序第27-28页
　　　　　　· 3'RACE-PCR扩增第28页
　　　　　　· 5'RACE第28-29页
　　　　　　· cDNA全长序列的获得第29-30页
　　　　　　· 序列比对与进化树构建第30页
　　2 结果与分析第30-35页
　　　　· RNA提取质量与反转录效果检测第30-31页
　　　　· 目的中间片段序列测定第31页
　　　　· RACE-PCR结果第31页
　　　　· 荷花NnγGCS基因全长序列的获得第31-32页
　　　　· 氨基酸序列同源性比对第32-34页
　　　　· 荷花NnγGCS基因氨基酸序列系统进化树构建第34-35页
　　3 讨论第35-37页
第三章 NnγGCS基因表达与亚细胞定位第37-47页
　　第一节 镉胁迫后NnγGCS在荷花中表达分析第37-43页
　　　　1 材料与方法第37-39页
　　　　　　· 植物材料第37-38页
　　　　　　· 试剂与仪器第38页
　　　　　　　　· 试剂第38页
　　　　　　　　· 实验仪器第38页
　　　　　　· 实验方法第38-39页
　　　　　　　　· 荷花RNA提取及cDNA合成第38页
　　　　　　　　· Real-Time PCR分析第38-39页
　　　　　　　　· 荷花各器官镉含量的测定第39页
　　　　2 结果与分析第39-42页
　　　　　　· 荷花NnγGCS基因组织定量分析第39-40页
　　　　　　· 镉胁迫下荷花叶和根部NnγGCS表达响应第40页
　　　　　　· 镉胁迫下荷花组织重金属积累量第40-42页
　　　　3 讨论第42-43页
　　第二节 NnγGCS基因亚细胞定位第43-47页
　　　　1 材料与方法第43-45页
　　　　　　· 实验材料第43-44页
　　　　　　· 试剂与仪器第44页
　　　　　　　　· 试剂及菌株第44页
　　　　　　　　· 仪器设备第44页
　　　　　　　　· 菌株与载体第44页
　　　　　　· 实验方法第44-45页
　　　　　　　　· 正义表达载体构建第44-45页
　　　　　　　　· 洋葱表皮细胞瞬时表达第45页
　　　　　　　　· 显微镜观察第45页
　　　　2 结果与分析第45-46页
　　　　3 讨论第46-47页
第四章 荷花NnγGCS基因的功能分析第47-57页
　　1 材料与方法第47-51页
　　　　· 材料第47-48页
　　　　· 实验方法第48-49页
　　　　　　· 正义表达载体构建第48页
　　　　　　· 拟南芥的遗传转化第48页
　　　　　　· 拟南芥播种第48页
　　　　　　· 拟南芥转化第48-49页
　　　　　　· 拟南芥种子收获第49页
　　　　· 筛选阳性拟南芥第49-50页
　　　　　　· 转基因植株鉴定第49-50页
　　　　　　· 转基因拟南芥表达分析第50页
　　　　· 荷花NnγGCS基因在拟南芥中功能验证第50-51页
　　　　　　· 根长的比较第50页
　　　　　　· 镉胁迫下种子发芽率第50页
　　　　　　· 镉胁迫下拟南芥植株生长量影响第50页
　　　　　　· 镉胁迫下生理指标变化第50-51页
　　2 结果与分析第51-54页
　　　　· 转基因拟南芥鉴定第51-52页
　　　　· 镉胁迫下根长比较第52-53页
　　　　· 镉胁迫下发芽率比较第53页
　　　　· 镉胁迫下拟南芥植株生长量变化第53页
　　　　· 镉胁迫下植株内生理指标变化第53-54页
　　3 讨论第54-57页
全文结论第57-59页
创新之处第59-61页
参考文献第61-69页
附录第69-75页
发表论文第75-77页
致谢第77页

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