论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
Abbreviation | 第11-14页 |
CHAPTER · INTRODUCTION | 第14-24页 |
· COTTON, GOSSYPIUM | 第14-15页 |
· Importance of cotton | 第14-15页 |
· GENOME EDITING | 第15-16页 |
· RNA-GUIDED ENDONUCLEASES (CRISPR/CAS9) | 第16-20页 |
· SITE-DIRECTED MUTAGENESIS | 第20-21页 |
· CHROMOSOME ENGINEERING | 第21-22页 |
· TARGETING CENH3, RAD21 AND DMC1 GENES | 第22-23页 |
· AIM AND SIGNIFICANCE | 第23-24页 |
CHAPTER 2 MATERIALS AND METHODS | 第24-32页 |
· PLANT MATERIAL | 第24页 |
· PLASMID VECTORS | 第24页 |
· BACTERIAL CULTURES | 第24-25页 |
· Luria Bertani (LB) broth | 第24页 |
· Maxi prep samples of vectors plasmids | 第24-25页 |
· SELECTION OF TARGET SEQUENCES | 第25-27页 |
· Finding CRISPR sites | 第25页 |
· Oligo Primer design and synthesis | 第25-27页 |
· CLONING | 第27-30页 |
· gRNA-AtU# expression vectors | 第27-30页 |
· g RNA sequence ligation into CRISPR/cas9 plasmid | 第30页 |
· COLONY PCR | 第30页 |
· EXTRACTION OF CRISPR/CAS9 PLASMID | 第30-31页 |
· PROTOPLAST ISOLATION | 第31-32页 |
· Enzyme solution for leaf digestion | 第31页 |
· 10% PEG solution | 第31-32页 |
CHAPTER · RESULTS | 第32-40页 |
· TARGET SELECTION | 第32-33页 |
· OLIGO PRIMER DESIGN AND CLONING OF TARGET ADAPTORS INTO GRNA ENTRY VECTORS | 第33-35页 |
· CLONING GRNA AND CRISPR VECTOR CLONING | 第35-37页 |
· PROTOPLAST ISOLATION | 第37-38页 |
· PEG PROTOPLAST TRANSFORMATION | 第38-39页 |
· MUTATION DETECTION | 第39-40页 |
CHAPTER 4 DISCUSSIONS | 第40-41页 |
CONCLUSION | 第41-43页 |
REFERENCES | 第43-47页 |
APPENDICES | 第47-55页 |
APPENDIX 1: PROMOTER AND GENE SEQUENCES | 第47-51页 |
APPENDIX 2: REAGENTS AND RECIPES | 第51-53页 |
Appendix 3: Endo Free Maxi Plasmid Kit (Tiangen, China) | 第53-55页 |
Acknowledgements | 第55-56页 |
CURRICULUM VITAE | 第56页 |