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金葡菌肠毒素表位的串联表达与间接竞争ELISA方法的建立

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金葡菌肠毒素表位的串联表达与间接竞争ELISA方法的建立
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-10页
图表目录第10-11页
论文常用中英文缩写词第11-12页
文献综述第12-17页
引言第17-19页
1 材料与方法第19-29页
  · 实验菌株、工程菌及质粒第19页
  · 酶类与主要试剂(盒)第19页
  · 主要溶液与培养基的配制第19-22页
    · ELISA实验所用溶液第19-20页
    · 琼脂糖凝胶电泳所用溶液第20页
    · 感受态细胞制备所用溶液第20页
    · 蛋白电泳检测所需溶液第20-21页
    · 蛋白诱导表达所用溶液第21页
    · 蛋白提纯所用试剂及溶液第21-22页
    · Protein G亲和层析所需溶液第22页
    · LB及含氨苄青霉素LB培养基第22页
  · 实验动物第22页
  · 主要仪器第22页
  · 肠毒素蛋白的B细胞线性表位预测与鉴定第22-23页
    · SEA和SEG蛋白二级结构及柔性区域分析第22-23页
    · SEA和SEG蛋白亲水性、抗原性和表面可及性分析第23页
    · 肠毒素蛋白3D结构的建模及预测表位的展示第23页
    · 预测表位肽合成第23页
    · 肽ELISA鉴定第23页
  · 肠毒素多表位串联基因的设计与合成第23-24页
  · 重组表达质粒pET-32a-AG的构建与鉴定第24-25页
    · 表位串联基因AG的PCR扩增第24页
    · PCR产物和表达质粒的双酶切第24页
    · 双酶切产物的回收纯化与连接第24页
    · 重组表达质粒的转化与鉴定第24-25页
  · 重组蛋白的表达与纯化第25-26页
    · 重组质粒的诱导表达第25页
    · 表达产物的定位与可溶性分析第25页
    · 重组融合蛋白的大量表达第25页
    · 重组蛋白的纯化第25-26页
  · 肠毒素表位串联肽的多克隆抗体制备与纯化第26页
    · 免疫原制备第26页
    · 实验动物免疫第26页
    · 血清抗体效价测定第26页
    · 多克隆抗体的提纯第26页
  · 基于表位串联肽的间接竞争ELISA方法建立第26-29页
    · 最佳抗体稀释倍数和包被抗原工作浓度的确定第26-27页
    · 间接竞争ELISA标准曲线的绘制第27页
    · 间接竞争ELISA灵敏度测定第27页
    · 间接竞争ELISA重复稳定性测定第27页
    · 间接竞争ELISA特异性测定第27-28页
    · 人工污染样品的回收率检测第28-29页
2 结果与分析第29-40页
  · 肠毒素蛋白的B细胞线性表位预测与鉴定第29-32页
    · 表位预测结果第29-31页
    · 表位鉴定结果第31-32页
  · 肠毒素多表位串联基因的设计第32-33页
  · 重组表达质粒pET-32a-AG的构建与鉴定第33-34页
  · 重组蛋白的表达与纯化第34-36页
  · 肠毒素表位串联肽的多克隆抗体制备与纯化第36页
  · 基于表位串联肽的间接竞争ELISA方法建立第36-40页
    · 最佳抗原和抗体浓度的确定第36页
    · 间接竞争ELISA标准曲线建立与拟合度分析第36-37页
    · 间接竞争ELISA的灵敏度第37页
    · 间接竞争ELISA的稳定性第37-38页
    · 间接竞争ELISA的特异性第38页
    · 人工污染样品的回收率第38-40页
3 讨论第40-43页
  · 建立不同血清型SE蛋白同步检测方法的重要性第40页
  · B细胞线性表位的鉴定与多表位串联肽的设计第40-41页
  · 影响间接竞争ELISA方法的因素第41-43页
结论第43-44页
参考文献第44-50页
附录第50-53页
致谢第53-54页
作者简介第54页

本篇论文共54页,点击这进入下载页面
 
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