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猪TTV2ORF1基因的原核表达以及间接ELISA检测方法的建立
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猪TTV2ORF1基因的原核表达以及间接ELISA检测方法的建立
论文目录
摘要
第1-9页
ABSTRACT
第9-11页
第一章 文献综述
第11-25页
1 引言
第11页
2 病原学
第11-14页
· 猪TTV的分类与理化性质
第11页
· 猪TTV的基因型
第11-12页
· 猪TTV的基因组结构与特征
第12-14页
3 TTV的流行病学调查
第14-19页
· 流行范围
第14-16页
· 不同猪群流行情况
第16-17页
· 传播方式
第17-18页
· 致病性
第18-19页
4 TTV的检测方法
第19-20页
5 目的和意义
第20-21页
参考文献
第21-25页
第二章 猪TTV2 ORF1基因的原核表达及多克隆抗体的制备
第25-53页
摘要
第25页
· 材料
第25-26页
· 载体和菌株
第25页
· 主要试剂与仪器
第25-26页
· 实验动物
第26页
· 方法
第26-33页
· 目的基因的克隆
第26-27页
· 重组质粒pMD18-T-g1和pMD18-T-g2的构建与鉴定
第27-29页
· 重组表达质粒pcold-g1和pcold-g2的构建与鉴定
第29-30页
· 重组蛋白的诱导表达
第30-31页
· 重组蛋白的纯化
第31-32页
· Western blot检测
第32-33页
· 多克隆抗体的制备
第33页
· 实验结果
第33-48页
· 目的片段的扩增
第33-34页
· 克隆载体的酶切鉴定结果
第34-35页
· 重组表达质粒的酶切鉴定结果
第35-36页
· 重组蛋白的诱导表达结果
第36-37页
· 表达条件的优化
第37-41页
· 重组蛋白的可溶性检测结果
第41-43页
· 重组蛋白的纯化结果
第43-44页
· Western blot检测
第44-47页
· 多克隆抗体制备
第47-48页
· 讨论
第48-50页
参考文献
第50-51页
ABSTRACT
第51-53页
第三章 猪TTV2间接ELISA检测方法的建立
第53-71页
摘要
第53页
· 材料
第53-54页
· 抗原
第53页
· 血清及酶标抗体
第53-54页
· 主要试剂与仪器
第54页
· 方法
第54-58页
· 间接ELISA检测方法的操作步骤
第54页
· 抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的确定
第54-55页
· 抗原包被条件的确定
第55页
· 封闭条件的确定
第55-56页
· 抗原抗体反应条件的确定
第56-57页
· 临界值的确定
第57页
· 特异性试验
第57页
· 重复性试验
第57页
· 临床样品的检测
第57-58页
· 结果
第58-66页
· 抗原最佳包被浓度和抗体最佳稀释度的确定
第58页
· 抗原包被条件的确定
第58-60页
· 封闭条件的确定
第60-61页
· 抗原抗体反应条件的确定
第61-64页
· 间接ELISA临界值的确定
第64-65页
· 特异性试验
第65页
· 重复性试验
第65-66页
· 临床样品的检测
第66页
· 讨论
第66-68页
参考文献
第68-69页
ABSTRACT
第69-71页
全文总结
第71-73页
附录 常用试剂的配制
第73-77页
致谢
第77 页
本篇论文共
77
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