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农杆菌介导草坪植物抗除草剂基因的遗传转化研究

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农杆菌介导草坪植物抗除草剂基因的遗传转化研究
论文目录
 
摘要第1-9 页
Abstract第9-12 页
缩略语表第12-14 页
第一部分 前言第14-34 页
  1 课题的提出第14-15 页
  2 草坪植物转基因育种的研究进展第15-32 页
    2.1 草坪植物的育种实践与应用第15-17 页
    2.2 草坪植物组织培养的研究进展第17-19 页
    2.3 植物的遗传转化方法第19-23 页
      2.3.1 基因枪法第19-20 页
      2.3.2 农杆菌介导法第20 页
      2.3.3 PEG法第20-21 页
      2.3.4 电激法第21 页
      2.3.5 碳化硅纤维介导转化法第21 页
      2.3.6 花粉管通道法第21-22 页
      2.3.7 子房注射法第22 页
      2.3.8 其它方法第22-23 页
    2.4 植物遗传转化中存在的问题及对策第23-26 页
      2.4.1 转基因沉默及其对策第23-25 页
      2.4.2 转基因的效率问题第25 页
      2.4.3 转基因植物的安全性问题第25-26 页
    2.5 草坪植物遗传转化的研究进展第26-32 页
      2.5.1 表达载体的构建第27 页
      2.5.2 草坪植物转基因中常用的标记基因第27-28 页
      2.5.3 抗除草剂基因工程第28-31 页
      2.5.4 抗病基因工程第31-32 页
      2.5.5 抗非生物胁迫基因工程第32 页
  3 研究目的及意义第32-34 页
第二部分 高羊茅组织培养与植株高频再生第34-44 页
  1 材料与方法第34-36 页
    1.1 材料第34 页
    1.2 方法第34-36 页
      1.2.1 高羊茅种子的处理第34 页
      1.2.2 愈伤组织诱导第34-35 页
      1.2.3 愈伤组织分化第35 页
      1.2.4 数据统计第35 页
      1.2.5 均匀设计试验与统计分析第35-36 页
  2 结果与分析第36-40 页
    2.1 愈伤组织诱导的结果观测第36-37 页
    2.2 数据处理与分析第37-39 页
    2.3 愈伤组织诱导的影响因素第39 页
    2.4 试验验证第39 页
    2.5 愈伤组织分化与植株再生第39-40 页
  3 讨论第40-44 页
    3.1 均匀设计应用于植物组织培养研究的可行性第40-41 页
    3.2 外植体消毒处理方法对愈伤组织诱导的影响第41-42 页
    3.3 影响高羊茅愈伤组织诱导及分化的因素第42-44 页
第三部分 马蹄金组织培养植株再生体系的优化第44-56 页
  1 材料与方法第44-46 页
    1.1 材料第44 页
    1.2 方法第44-46 页
      1.2.1 马蹄金无菌苗的培养第44 页
      1.2.2 愈伤组织诱导第44 页
      1.2.3 愈伤组织分化第44-45 页
      1.2.4 再生植株的生根培养第45 页
      1.2.5 数据统计第45 页
      1.2.6 正交设计试验与统计分析第45-46 页
  2 结果与分析第46-54 页
    2.1 愈伤组织诱导的结果观测第46-47 页
    2.2 不同生长调节剂对马蹄金子叶愈伤组织诱导的影响第47-48 页
    2.3 不同生长调节剂对马蹄金叶片愈伤组织诱导的影响第48-49 页
    2.4 不同生长调节剂对马蹄金叶柄愈伤组织诱导的影响第49-50 页
    2.5 不同生长调节剂对马蹄金下胚轴愈伤组织诱导的影响第50-51 页
    2.6 愈伤组织分化第51-53 页
      2.6.1 数据处理与分析第51-52 页
      2.6.2 马蹄金愈伤组织分化的影响因素第52-53 页
      2.6.3 试验验证第53 页
    2.7 愈伤组织的诱导、分化及再生过程第53-54 页
  3 讨论第54-56 页
    3.1 正交设计应用于植物组织培养研究的可行性第54 页
    3.2 不同生长调节剂对马蹄金愈伤组织诱导的作用与调控第54-56 页
第四部分 外源基因的转化与鉴定第56-72 页
  1 材料与方法第56-64 页
    1.1 植物材料第56 页
    1.2 菌株和质粒第56-57 页
    1.3 Bar基因第57 页
    1.4 主要仪器及试剂来源第57 页
    1.5 方法第57-64 页
      1.5.1 愈伤组织对 PPT和抗生素的敏感性试验第57-58 页
      1.5.2 植物 DNA提取方法第58-60 页
      1.5.3 质粒 DNA的小量提取第60-61 页
      1.5.4 农杆菌的转化第61-63 页
      1.5.5 抗性愈伤组织的分化与再生第63 页
      1.5.6 转 Bar基因植株的PCR检测第63-64 页
      1.5.7 转化植株的除草剂抗性鉴定第64 页
  2 结果与分析第64-69 页
    2.1 愈伤组织对 PPT和抗生素的敏感性第64-65 页
    2.2 不同转化方式对农杆菌转化效果的影响第65-66 页
    2.3 优化的农杆菌转化实验路线第66-67 页
    2.4 植物总 DNA提取第67 页
    2.5 转Bar基因植株的 PCR检测第67-68 页
    2.6 转化植株的除草剂抗性鉴定第68-69 页
  3 讨论第69-72 页
    3.1 PPT和抗生素对愈伤组织的预筛选第69 页
    3.2 影响农杆菌转化的内在因素第69-70 页
    3.3 正交设计用于农杆菌浸染条件优化的可行性第70-71 页
    3.4 转化体系的进一步完善第71-72 页
参考文献第72-81 页
致谢第81 页

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