论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8
页 |
| Abstract | 第8-10
页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第10-11
页 |
| 1.文献综述 | 第11-36
页 |
| 1.1.抗体技术的发展 | 第11-14
页 |
| · 多克隆抗体 | 第11-12
页 |
| · 单克隆抗体 | 第12
页 |
| · 基因工程抗体 | 第12-14
页 |
| 1.2.抗体的基本结构 | 第14-15
页 |
| 1.3.噬菌体展示技术 | 第15-18
页 |
| · 噬菌体展示技术的基本原理 | 第15-16
页 |
| · 噬菌体展示系统的发展 | 第16-18
页 |
| 1.4.噬菌体抗体库的类型 | 第18-22
页 |
| · 天然抗体库(Natural library) | 第18-19
页 |
| · 免疫抗体库(Immunized library) | 第19
页 |
| · 化学合成抗体库(Synthetic library) | 第19-20
页 |
| · ScFv抗体库(Single chain variable fragments antibody library) | 第20-21
页 |
| · Fab抗体库(Antigen binding fragments antibody library) | 第21
页 |
| · 双体抗体库和双特异性抗体库(Diabody library) | 第21-22
页 |
| · 二硫键稳定型抗体库(Disulfide stablilized Fv fragments antibody library) | 第22
页 |
| 1.5.噬菌体抗体技术的操作 | 第22-23
页 |
| · 抗体可变区的获得 | 第22-23
页 |
| · 噬菌体抗体库载体的构建 | 第23
页 |
| · 单链抗体的表达 | 第23-25
页 |
| · 原核表达 | 第23-24
页 |
| · 真核表达 | 第24
页 |
| · 噬菌体表达 | 第24-25
页 |
| · 转基因动植物 | 第25
页 |
| · 单链抗体的应用 | 第25-27
页 |
| · 基础理论方面的研究 | 第25
页 |
| · 中和病毒 | 第25-26
页 |
| · 在肿瘤免疫诊断和免疫治疗上的应用 | 第26
页 |
| · 细胞内免疫 | 第26
页 |
| · 免疫毒素 | 第26
页 |
| · 在农兽药等小分子残留检测中的应用 | 第26-27
页 |
| · 构建其它类型的基因工程抗体 | 第27
页 |
| 1.8.噬菌体抗体库的筛选 | 第27-31
页 |
| 1.8.1.抗体库的经典筛选法 | 第28-29
页 |
| 1.8.2.非纯化抗原进行筛选 | 第29-31
页 |
| 1.9.生长抑素及小分子酶联免疫分析 | 第31-36
页 |
| · 生长抑素 | 第31-32
页 |
| 1.9.2.小分子酶联免疫分析(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA) | 第32-36
页 |
| 实验研究 | 第36-66
页 |
| 1.引言 | 第36
页 |
| 2.材料和方法 | 第36-55
页 |
| 2.1.试验材料 | 第36-43
页 |
| · 噬菌粒(phagemid) | 第36-37
页 |
| · 试验动物 | 第37
页 |
| · 抗原及试剂 | 第37-38
页 |
| · 主要仪器和设备 | 第38-39
页 |
| · 缓冲液和试剂配置 | 第39-40
页 |
| · 培养基 | 第40-41
页 |
| · ELISA相关试剂的配制 | 第41
页 |
| · 偶联相关试剂的配制 | 第41
页 |
| · PCR引物 | 第41-42
页 |
| · ScFv基因组装方法 | 第42-43
页 |
| 2.2.试验方法 | 第43-55
页 |
| · 人工抗原的合成和鉴定 | 第43-44
页 |
| · 动物免疫程序和检测 | 第44-45
页 |
| · RNA的提取以及纯度和浓度的检测 | 第45-46
页 |
| · cDNA第一条链的合成 | 第46
页 |
| · 抗体基因片段的制备 | 第46-50
页 |
| · 噬菌粒载体pCANTAB-5E和ScFv基因的内切酶消化 | 第50-51
页 |
| · 连接 | 第51
页 |
| · 电转化 | 第51-52
页 |
| · 转化子的鉴定 | 第52-53
页 |
| · 辅助噬菌体M13K07的制备 | 第53-54
页 |
| · 噬菌体抗体库的构建 | 第54-55
页 |
| · 噬菌体抗体库容量的测定 | 第55
页 |
| 3.结果和分析 | 第55-60
页 |
| · 抗体效价 | 第55-56
页 |
| · 总RNA纯度 | 第56-57
页 |
| · V_H、V_L、Linker基因扩增产物 | 第57-58
页 |
| · ScFv基因组装 | 第58
页 |
| · ScFv的两种基因连接方法比较 | 第58-59
页 |
| · 转化子鉴定 | 第59-60
页 |
| · 库容量 | 第60
页 |
| 4.讨论 | 第60-66
页 |
| 4.1.人工抗原的合成 | 第60
页 |
| · 关于小鼠免疫 | 第60-61
页 |
| 4.3.关于ELISA方法建立 | 第61
页 |
| 4.4.关于RNA提取与纯化 | 第61-62
页 |
| · 关于cDNA合成 | 第62-63
页 |
| 4.6.关于组装 | 第63
页 |
| · 关于组装方法的比较 | 第63-64
页 |
| 4.8.关于库容 | 第64-66
页 |
| 参考文献 | 第66-78
页 |
| 研究生期间发表的论文目录 | 第78-79
页 |
| 致谢 | 第79
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