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玉米S-CMS雄性不育相关基因的蛋白质性质研究
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玉米S-CMS雄性不育相关基因的蛋白质性质研究
论文目录
 
摘要第1-9 页
Abstract第9-11 页
缩略词表第11-12 页
1 前言第12-23 页
　　· 雄性不育简介第12-14 页
　　　　· 雄性不育的现象第12 页
　　　　· 雄性不育的分类第12-13 页
　　　　· 雄性不育的意义第13-14 页
　　· CMS与线粒体第14-16 页
　　· 关于植物细胞质雄性不育机理的几种假说第16-17 页
　　· 玉米CMS机理的研究进展第17-20 页
　　　　· 玉米CMS的分类第17 页
　　　　· 玉米C-CMS育性相关基因第17-18 页
　　　　· 玉米T-CMS育性相关基因第18-19 页
　　　　· 玉米S-CMS不育相关基因第19-20 页
　　· 不育相关蛋白质性质的研究第20-23 页
　　　　· 蛋白质研究简介第20-22 页
　　　　· 不同植物中CMS相关蛋白研究进展第22-23 页
　　· 研究目的第23 页
2 orf17、orf60、orf77毒理验证第23-31 页
　　· 材料与方法第23-27 页
　　　　· 菌株和质粒第23 页
　　　　· 本实验所用引物第23-24 页
　　　　· orf77定点诱变第24-25 页
　　　　· orf17、orf60、orf77表达载体构建第25-26 页
　　　　· 测定生长曲线第26 页
　　　　· SDS-PAGE第26-27 页
　　· 结果与分析第27-31 页
　　　　· 定点诱变结果第27 页
　　　　· 生长曲线第27-30 页
　　　　· 蛋白质电泳结果第30-31 页
3 利用EGFP融合表达orf77、orf355第31-45 页
　　· 材料与方法第31-36 页
　　　　· 菌株和质粒第31 页
　　　　· 本实验所用引物第31 页
　　　　· 构建原核表达载体表达EGFP第31-33 页
　　　　· 利用EGFP融合表达orf77、orf355第33-34 页
　　　　· SDS-PAGE,荧光显微镜观察第34-35 页
　　　　· RT-PCR第35-36 页
　　· 结果与分析第36-45 页
　　　　· EGFP原核表达结果第36-38 页
　　　　· orf77、orf355融合表达EGFP结果第38-40 页
　　　　· 荧光显微镜观察第40-42 页
　　　　· RT-PCR第42-44 页
　　　　· 结果分析第44-45 页
4 pET-28a-EGFP和pET-28a-orf77蛋白质组研究第45-49 页
　　· 材料与方法第45-46 页
　　　　· 实验菌株第45 页
　　　　· 蛋白质制样第45 页
　　　　· 双向电泳第45-46 页
　　· 结果与分析第46-49 页
　　　　· 双向电泳结果第46-48 页
　　　　· 质谱分析第48-49 页
5 orf77、orf355洋葱表皮定位第49-55 页
　　· 材料与方法第49-51 页
　　　　· 菌株和质粒第49 页
　　　　· 本实验所用引物第49 页
　　　　· orf77、orf355定位载体的构建第49-50 页
　　　　· 基因枪转洋葱表皮第50-51 页
　　　　· 显微观察第51 页
　　· 结果与分析第51-55 页
　　　　· 实验结果第51-55 页
　　　　· 结果分析第55 页
6 体外表达orf77第55-57 页
　　· 材料与方法第55-56 页
　　　　· 实验材料第55 页
　　　　· 本实验所用引物第55 页
　　　　· 体外转录翻译第55-56 页
　　· 结果与分析第56-57 页
7 讨论第57-64 页
　　· 原核表达系统第57-59 页
　　· 真核表达体系第59-60 页
　　· orf77的蛋白质产物性质第60-63 页
　　· 下一步工作计划第63-64 页
参考文献第64-72 页
致谢第72-73 页
附录第73-82 页
　　附录1 常用培养基和溶液的配制第73-74 页
　　附录2 提取质粒(小样法)第74-75 页
　　附录3 凝胶回收DNA片段(TaKaRa)第75 页
　　附录4 电转化感受态的制备第75-76 页
　　附录5 电转化第76 页
　　附录6 原核生物总RNA的提取第76-77 页
　　附录7 大样法抽提高浓度质粒第77 页
　　附录8 SDS-PAGE电泳第77-78 页
　　附录9 双向电泳第二向SDS-PAGE第78-80 页
　　附录10 蛋白质转膜、显色第80 页
　　附录11 基因枪使用方法第80-81 页
　　附录12 雄性不育相关基因orf77第81 页
　　附录13 雄性不育相关基因orf355第81 页
　　附录14 EGFP序列第81-82 页

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