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猪抵抗素和内脏脂肪素基因的克隆、表达与猪抵抗素多克隆抗体制备研究

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猪抵抗素和内脏脂肪素基因的克隆、表达与猪抵抗素多克隆抗体制备研究
论文目录
 
摘要第1-9 页
Abstract第9-11 页
缩略词表第11-12 页
第一章 文献综述第12-27 页
  1.抵抗素简介与研究进展第12-19 页
    · 抵抗素分子生物学特征第12-15 页
      · 抵抗素分子特征与组织分布第12-13 页
      · 抵抗素表达调控第13-14 页
      · 抵抗素生物学活性特征第14-15 页
    · 抵抗素作用机制第15-16 页
      · 诱发胰岛素抵抗作用机制第15-16 页
      · 参与炎症反应、内皮细胞功能障碍机制第16 页
      · 抵抗素诱发脂代谢异常机制第16 页
    · 抵抗素信号转导通路第16-17 页
      · 诱发胰岛素抵抗信号转导途径第16 页
      · 抵抗素调节脂代谢信号转导途径第16-17 页
      · 抵抗素诱发内皮细胞功能障碍信号转导途径第17 页
    · 抵抗素与相关疾病的研究进展第17-18 页
      · 抵抗素与糖尿病第17-18 页
      · 抵抗素与肥胖第18 页
      · 抵抗素与心血管类疾病第18 页
      · 抵抗素与炎症第18 页
      · 抵抗素与其它疾病第18 页
    · 猪抵抗素研究进展第18-19 页
  2.内脏脂肪素简介与研究进展第19-27 页
    · Visfatin分子生物学特征第19-23 页
      · Visfatin分子特征与组织分布第19-20 页
      · Visfatin表达调控第20-22 页
      · Visfatin生物学活性特征第22-23 页
    · Visfatin调节表达与作用机制第23-24 页
      · Visfatin调节表达机制第23 页
      · Visfatin降血糖机制第23 页
      · NAMPT酶的作用机制第23-24 页
      · Visfatin促进脂肪分化机制第24 页
    · Visfatin信号转导通路第24-25 页
    · Visfatin与疾病相关研究进展第25-27 页
      · Visfatin与Ⅱ型糖尿病第25 页
      · Visfatin与肥胖第25-26 页
      · Visfatin与炎症反应第26 页
      · Visfatin与其它疾病第26-27 页
第二章 猪visfatin基因的克隆与表达研究第27-43 页
  1 目的和意义第27 页
  2 材料和方法第27-34 页
    · 材料第27-30 页
      · 组织样品第27 页
      · 酶、Marker和试剂盒第27 页
      · 培养基第27-28 页
      · 载体和菌株第28 页
      · 主要溶液配制第28-30 页
      · 主要仪器设备第30 页
      · 引物设计第30 页
    · 方法第30-34 页
      · 猪肠系膜脂肪总RNA提取第30-31 页
      · RT-PCR合成猪肠系膜脂肪cDNA第31 页
      · 猪visfatin基因编码区克隆第31-32 页
      · 重组载体pGEX-KG-Vis和pcDNA3.1(+)-Vis构建第32-33 页
      · Visfatin融合蛋白诱导表达与表达株筛选第33-34 页
      · 重组表达载体pGEX-KG-Vis表达研究第34 页
      · Visfatin融合蛋白SDS-PAGE分析第34 页
  3 结果第34-40 页
    · 猪肠系膜脂肪总RNA提取结果与分析第34-35 页
    · 猪visfatin编码区克隆结果与分析第35-37 页
      · PCR扩增结果第35 页
      · T载体连接鉴定结果第35 页
      · 测序鉴定结果第35-36 页
      · 核酸序列和氨基酸序列分析结果第36-37 页
    · 猪visfatin真核表达载体构建结果与分析第37-38 页
      · 重组菌PCR筛选与初步鉴定第37 页
      · 重组质粒酶切鉴定第37 页
      · 重组质粒测序鉴定第37-38 页
    · 猪visfatin原核表达载体构建结果与分析第38-39 页
      · 重组质粒PCR鉴定第38 页
      · 重组质粒酶切鉴定第38 页
      · 重组质粒测序鉴定第38-39 页
    · 猪visfatin原核表达与表达菌株筛选结果第39 页
    · 猪visfatin原核表达条件优化结果与分析第39-40 页
      · IPTG诱导浓度优化结果第39 页
      · 诱导时间优化结果第39-40 页
      · Visfatin重组载体pGEX-KG-Vis高效表达条件第40 页
  4 讨论第40-43 页
    · 关于猪visfatin基因的克隆第40-41 页
    · 关于猪visfatin真核表达载体构建与原核表达第41-43 页
第三章 猪抵抗素基因克隆表达与多克隆抗体制备第43-55 页
  1 目的和意义第43 页
  2 材料和方法第43-48 页
    · 材料第43-44 页
      · 主要溶液配制第43-44 页
      · 引物设计第44 页
    · 方法第44-48 页
      · RNA提取与RT-PCR第44 页
      · 猪抵抗素编码区克隆第44-45 页
      · 重组载体pGEX-KG-Rest构建第45-46 页
      · 抵抗素融合蛋白诱导表达与表达株筛选第46 页
      · 重组表达载体pGEX-KG-Rest表达条件研究第46-47 页
      · 猪抵抗素融合蛋白SDS-PAGE分析第47 页
      · 猪抵抗素融合蛋白包涵体提取与纯化第47-48 页
      · 猪抵抗素多克隆抗体制备第48 页
  3 结果第48-53 页
    · 猪肠系膜脂肪总RNA提取结果与分析第48 页
    · 猪抵抗素编码区克隆结果与分析第48-49 页
      · PCR扩增结果第48 页
      · T载体连接鉴定结果第48-49 页
      · 测序鉴定结果第49 页
      · 核酸序列和氨基酸序列比对分析结果第49 页
    · 猪抵抗素原核表达载体构建结果与分析第49-50 页
      · 重组质粒PCR鉴定第49 页
      · 重组质粒酶切鉴定第49 页
      · 重组质粒测序鉴定第49-50 页
    · 猪抵抗素原核表达与表达菌株筛选结果第50 页
    · 猪抵抗素原核表达条件优化结果与分析第50-52 页
      · 不同pH值培养基诱导表达优化结果第50-51 页
      · 不同诱导温度优化结果第51 页
      · 不同IPTG诱导浓度优化结果第51 页
      · 不同诱导时间优化结果第51-52 页
      · 猪抵抗素重组载体高效表达条件第52 页
    · 猪抵抗素原核表达蛋白包涵体提取结果第52-53 页
    · 兔抗猪抵抗素多克隆抗体制备结果第53 页
  4 讨论第53-55 页
    · 关于猪抵抗素基因克隆与表达条件第53-54 页
    · 关于兔抗猪抵抗素多克隆抗体制备第54-55 页
参考文献第55-62 页
致谢第62 页

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