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重组靶向毒素“去整合素ADAM15-接头—蜂毒肽”的构建、表达与纯化

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重组靶向毒素“去整合素ADAM15-接头—蜂毒肽”的构建、表达与纯化
论文目录
 
内容提要第1-7 页
英文缩写词表第7-8 页
第1章 绪论第8-25 页
  · 导向载体第9-12 页
    · 抗体载体第9-10 页
    · 特定受体的配体载体第10-12 页
  · 弹头第12-17 页
    · 放射性核素第13 页
    · 化学药物第13-14 页
    · 生物毒素第14-17 页
  · 载体与弹头的连接第17-23 页
    · 化学交联剂和柔链接头第17-18 页
    · 可裂解接头第18-23 页
  · 展望第23-24 页
  · 本实验的意义第24-25 页
第2章 材料与方法第25-43 页
  · 材料第25-31 页
    · 菌株、载体及细胞株第25 页
    · 主要试剂第25-26 页
    · 主要仪器第26-27 页
    · 生物信息学网络资源第27 页
    · 溶液的配制第27-31 页
  · 重组靶向毒素“去整合素 ADAM1-接头-蜂毒肽”基因的合成与克隆第31-35 页
    · 重组靶向毒素“去整合素ADAM15-接头-蜂毒肽”基因的设计与合成第31-32 页
    · 构建基因DAM 表达蛋白性质的生物信息学预测第32 页
    · DAM 基因的克隆第32-33 页
    · 碱裂解法提取pUC57-DAM 质粒第33-34 页
    · pUC57-DAM 的酶切第34 页
    · 冻融法回收DAM 基因片段第34-35 页
  · 重组靶向毒素“去整合素ADAM15-接头-蜂毒肽”的表达与纯化第35-43 页
    · PGEX-DAM 重组表达载体的构建第35 页
    · DH5α感受态细胞制备第35-36 页
    · pGEX-DAM 重组表达载体的转化第36 页
    · pGEX-DAM 重组表达载体的筛选第36 页
    · 碱裂解法提取质粒(小提)第36-37 页
    · pGEX-DAM 重组表达载体的鉴定第37 页
    · pGEX-DAM 重组表达载体的扩增第37-38 页
    · GST-DAM 融合蛋白在大肠杆菌中的表达第38 页
    · GST-DAM 融合蛋白表达条件的优化第38-39 页
    · GST-DAM 融合蛋白的纯化第39-41 页
    · GST-DAM 融合蛋白的酶切第41 页
    · DAM 肿瘤细胞杀伤活性的初步测定第41-43 页
第3章 结果与讨论第43-61 页
  · 结果第43-55 页
    · DAM 表达蛋白的生物信息学分析第43-46 页
    · pUC57-DAM 克隆质粒的酶切第46 页
    · PGEX-DAM 重组表达载体的构建第46-47 页
    · pGEX-DAM 重组表达质粒的酶切鉴定第47-48 页
    · 融合蛋白在大肠杆菌中的表达第48-49 页
    · pGEX-DAM 表达条件的优化第49-51 页
    · 包涵体的处理第51 页
    · GST-DAM 融合蛋白的纯化及酶切第51-52 页
    · GST-DAM 酶切后DAM 的回收第52-53 页
    · DAM 蛋白含量测定第53 页
    · DAM 引起体外培养肿瘤细胞A549 形态改变观察结果第53-55 页
  · 讨论第55-61 页
    · DAM 基因序列的设计第55-57 页
    · DAM 表达宿主菌选择的依据第57 页
    · DAM 表达载体与表达方式的选择第57-58 页
    · GST-DAM 表达条件的优化第58-59 页
    · GST-DAM 蛋白包涵体的溶解第59-61 页
第4章 结论第61-62 页
参考文献第62-70 页
致谢第70-71 页
摘要第71-74 页
ABSTRACT第74-76 页

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