论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8
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| ABSTRACT | 第8-10
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| 缩略语表 | 第10-11
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| 第一章 文献综述 | 第11-20
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| 1 动物防御素的研究进展 | 第11-16
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| · 动物防御素的分布及表达 | 第11-12
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| · 动物防御素的分子结构 | 第12-13
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| · 动物防御素的抗菌活性及影响因素 | 第13-14
页 |
| · 动物防御素的抗菌机理 | 第14
页 |
| · 动物防御素的抗病毒活性 | 第14-15
页 |
| · 动物防御素的细胞毒性作用 | 第15
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| · 防御素类抗菌肽在畜牧生产中的应用 | 第15-16
页 |
| 2 猪β-防御素的研究概况 | 第16-19
页 |
| · 猪β-防御素的结构 | 第16-18
页 |
| · 猪β-防御素的分布及表达 | 第18
页 |
| · 猪β-防御素抑制细菌和病毒的活性 | 第18-19
页 |
| 3 研究目的和意义 | 第19-20
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| 第二章 猪β-防御素-2的重组表达及体外抑菌和抗病毒试验研究 | 第20-47
页 |
| 1 材料与方法 | 第20-33
页 |
| · 材料 | 第20-24
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| · 质粒和菌株 | 第20
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| · 病毒和细胞 | 第20
页 |
| · 主要仪器设备 | 第20-21
页 |
| · 主要试剂及配制 | 第21-23
页 |
| · 主要应用的软件 | 第23-24
页 |
| · 方法 | 第24-33
页 |
| · 猪pBD-2基因片段的设计 | 第24-25
页 |
| · 猪pBD-2基因PCR扩增 | 第25
页 |
| · 大肠杆菌DH5α或BL21(DE3)感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第25-26
页 |
| · pBD-2/pGEX-KG重组表达质粒的构建、转化 | 第26-27
页 |
| · pBD-2/DGEX-KG重组表达质粒的鉴定 | 第27
页 |
| · 重组子pBD-2/pGEX-KG的诱导表达 | 第27-28
页 |
| · 表达产物的SDS-PAGE分析 | 第28-29
页 |
| · 表达产物的提取以及融合蛋白的纯化 | 第29-30
页 |
| · 蛋白的浓度测定 | 第30
页 |
| · 融合蛋白的酶切 | 第30
页 |
| · 酶切后蛋白的凝胶过滤层析 | 第30-31
页 |
| · pBD-2对猪红细胞的溶血活性 | 第31
页 |
| · pBD-2的抑菌活性检测 | 第31-32
页 |
| · pBD-2的抗病毒活性 | 第32-33
页 |
| 2 结果与分析 | 第33-42
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| · pBD-2的PCR扩增 | 第33
页 |
| · pBD-2PCR扩增产物的双酶切 | 第33
页 |
| · pGEX-KG载体的双酶切 | 第33-34
页 |
| · pBD-2/DGEX-KG重组表达质粒的鉴定 | 第34-36
页 |
| · pBD-2/DGEX-KG重组表达质粒的PCR鉴定 | 第34
页 |
| · pBD-2/DGEX-KG重组表达质粒的双酶切鉴定 | 第34-35
页 |
| · pBD-2/DGEX-KG重组表达质粒的测序鉴定 | 第35-36
页 |
| · 表达产物的SDS-PAGE分析 | 第36-37
页 |
| · 表达产物的纯化和融合蛋白的酶切 | 第37-39
页 |
| · 融合蛋白的SDS-PAGE分析 | 第38-39
页 |
| · 融合蛋白酶切后的SDS-PAGE分析 | 第39
页 |
| · 酶切后蛋白的凝胶过滤层析 | 第39-40
页 |
| · pBD-2对猪红细胞的溶血活性 | 第40
页 |
| · pBD-2的抑菌活性检测 | 第40-41
页 |
| · pBD-2的抗病毒活性检测 | 第41-42
页 |
| 3 讨论 | 第42-46
页 |
| · 猪β-防御素的重组表达 | 第42-43
页 |
| · 基因片段的合成 | 第43
页 |
| · 表达系统的选择 | 第43-44
页 |
| · pBD-2对猪红细胞的溶血活性 | 第44
页 |
| · pBD-2的抑菌和抗病毒活性 | 第44-46
页 |
| 4 结论 | 第46
页 |
| 5 本试验的创新点与不足 | 第46-47
页 |
| 参考文献 | 第47-54
页 |
