论文目录 | |
中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
引言 | 第13-14页 |
第一章 昆虫精子形成调控的分子机制 | 第14-27页 |
· 果蝇精子发生和形成的形态学特征 | 第14-15页 |
· 果蝇睾丸的胚原始增殖中心的基因表达 | 第15-17页 |
· 初级精母细胞激活组织特异性转录程序 | 第17-18页 |
· 初级精母细胞中的基因表达 | 第18-19页 |
· X 染色体的基因表达 | 第19页 |
· 减数分裂阻滞基因:在初级精母细胞中调控基因表达 | 第19-23页 |
· 精子延长中的转录活性 | 第23-24页 |
· 结语 | 第24页 |
参考文献 | 第24-27页 |
第二章 RNA 的核输出机制 | 第27-38页 |
· 核孔复合物 | 第27-28页 |
· 经典的 importin-β 受体介导的出核运输 | 第28-29页 |
· tRNA 核输出 | 第29-30页 |
· miRNA 的核输出 | 第30-31页 |
· snRNA 的核输出 | 第31页 |
· mRNA 的核输出 | 第31-34页 |
· rRNA 的核输出 | 第34-35页 |
· 结语 | 第35页 |
参考文献 | 第35-38页 |
第三章 研究目的与研究内容 | 第38-41页 |
1 研究的目的和意义 | 第38-39页 |
2 研究的主要内容 | 第39页 |
3 技术路线 | 第39-41页 |
第四章 材料与方法 | 第41-60页 |
1 一般材料 | 第41-48页 |
· 载体与菌种 | 第41页 |
· 细胞 | 第41页 |
· 生物材料 | 第41页 |
· 工具酶及试剂盒 | 第41页 |
· 其它试剂 | 第41-42页 |
· 主要实验试剂的配制 | 第42-48页 |
2 实验常用仪器设备 | 第48-49页 |
3 常用实验方法 | 第49-59页 |
· 碱裂解法制备质粒DNA | 第49-50页 |
· PCR 扩增 | 第50页 |
· 酶切反应 | 第50页 |
· 连接反应 | 第50-51页 |
· 感受态细胞的制备 | 第51页 |
· 连接产物的转化 | 第51-52页 |
· 重组质粒的筛选 | 第52页 |
· 琼脂糖凝胶电泳 | 第52页 |
· 分离回收目的片段 | 第52页 |
· SDS-PAGE 蛋白质电泳 | 第52-53页 |
· SDS-PAGE 凝胶的染色和脱色 | 第53页 |
· Western blotting | 第53-54页 |
· 总RNA 的提取 | 第54页 |
· RNA 反转录成 cDNA | 第54-55页 |
· 纯化过柱 | 第55-56页 |
· 多克隆抗体的制作 | 第56页 |
· 定量 PCR(Quantitative PCR.qPCR) | 第56页 |
· 免疫荧光检测 | 第56-57页 |
· 石蜡组织切片制作和染色 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-60页 |
第五章 家蚕 aly 基因 cDNA 的克隆与序列分析 | 第60-71页 |
1 材料与方法 | 第61-62页 |
· 试剂材料 | 第61页 |
· 实验方法 | 第61-62页 |
2 结果与分析 | 第62-68页 |
· Bmaly 基因的电子克隆 | 第62页 |
· Bmaly ORF 的克隆与鉴定 | 第62-63页 |
· Bmaly ORF 的分析 | 第63-64页 |
· Bmaly 的保守结构域预测 | 第64-65页 |
· Aly 的同源性比较 | 第65-67页 |
· Aly 的进化分析 | 第67-68页 |
3 讨论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-71页 |
第六章 Bmaly 基因在家蚕不同组织中的表达差异 | 第71-76页 |
1 材料与方法 | 第71-72页 |
· 材料 | 第71-72页 |
· 方法 | 第72页 |
2 结果与分析 | 第72-74页 |
· q-PCR 分析 Bmaly 在不同组织中的表达 | 第72-73页 |
· 基于基因芯片的 Bmaly 的表达谱 | 第73-74页 |
3 讨论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-76页 |
第七章 家蚕 aly 的原核表达、抗体制备和细胞定位 | 第76-85页 |
1 材料与方法 | 第76-79页 |
· 试剂材料 | 第76-77页 |
· 实验方法 | 第77-79页 |
2 结果与分析 | 第79-81页 |
· BmAly 重组蛋白的诱导表达及过柱纯化 | 第79页 |
· Western blotting 检测 BmAly 抗体的特异性。 | 第79-80页 |
· BmAly 亚细胞定位 | 第80-81页 |
3 讨论 | 第81-83页 |
· Bmaly 基因的稀有密码子对原核表达的影响 | 第81页 |
· 原核表达重组蛋白的纯化 | 第81-82页 |
· BmAly 的亚细胞定位 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-85页 |
第八章 注射 Bmaly siRNA 对家蚕精细胞发育的影响 | 第85-91页 |
1 材料与方法 | 第86-87页 |
· 试剂材料 | 第86页 |
· 实验方法 | 第86-87页 |
2 结果与分析 | 第87-89页 |
· 注射 siRNA 对精细胞发育的影响 | 第87-88页 |
· 注射 siRNA 对蚕卵受精率的影响 | 第88-89页 |
3 讨论 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-91页 |
第九章 家蚕 ref 基因的克隆、序列分析及其细胞定位 | 第91-106页 |
1 材料与方法 | 第93-95页 |
· 材料与试剂 | 第93页 |
· 基因的克隆 | 第93-94页 |
· Bmref 序列分析 | 第94页 |
· 家蚕 BmREF 原核表达质粒的构建及诱导表达 | 第94页 |
· SDS-PAGE 和 Western blotting | 第94页 |
· 鼠抗 His-BmREF 抗体的制备 | 第94页 |
· BmREF 的细胞定位 | 第94-95页 |
· 表达谱分析 | 第95页 |
2 结果与分析 | 第95-102页 |
· 家蚕 BmREF ORF 的克隆与鉴定 | 第95-96页 |
· Bmref 高级结构分析 | 第96-97页 |
· REF 多重比对和进化分析 | 第97-100页 |
· BmREF 原核表达及其抗体制备 | 第100-101页 |
· BmREF 的细胞定位 | 第101-102页 |
· Bmref 的组织表达谱 | 第102页 |
3 讨论 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-106页 |
结论 | 第106-107页 |
1 已取得的成果 | 第106页 |
2 有待进行的研究 | 第106-107页 |
附录 | 第107-110页 |
1 英文简写对照表 | 第107-108页 |
2 载体图谱 | 第108-109页 |
3 pPigT7 和 AcA3IFP2 结构 | 第109-110页 |
在校期间发表论文情况 | 第110-111页 |
1 研究论文 | 第110页 |
2 GenBank 登录序列 | 第110-111页 |
致谢 | 第111-112
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