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基于基因打靶的绿色荧光丝转基因家蚕研究

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基于基因打靶的绿色荧光丝转基因家蚕研究
论文目录
 
摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一部分 文献综述第12-32页
  第一章 基因打靶技术的研究进展第12-24页
    1 基因打靶技术的发展第12-15页
      · 基因打靶概述第12-13页
      · 基因打靶的操作第13-15页
    2 基因打靶家蚕研究的现状第15-17页
    3 展望第17-19页
      · 基于重组酶介导的位点特异性基因打靶第17-18页
      · 基于锌指蛋白核酸酶技术的基因打靶第18-19页
    参考文献第19-24页
  第二章 抗菌肽的研究进展第24-32页
    1 抗菌肽的抗菌机制第24-25页
    2 抗菌肽的生物学活性第25页
      · 抗菌肽的广谱抗菌活性第25页
      · 抗菌肽具有抗肿瘤的作用第25页
      · 抗菌肽具有促进伤口愈合的作用第25页
      · 抗菌肽具有抗病毒的作用第25页
    3 抗菌肽应用前景第25-27页
      · 抗菌肽作为饲料添加剂第25-26页
      · 抗菌肽作为药物载体第26页
      · 抗菌肽可作为新型抗生药物第26页
      · 抗菌肽作为食品防腐剂第26页
      · 抗菌肽可对畜禽疾病的治疗与预防作用第26页
      · 抗菌肽的转基因研究第26-27页
    4 家蚕抗菌肽基因研究进展第27-29页
      · 家蚕抗菌肽基因的研究第27-28页
      · 已获得的家蚕抗菌肽基因第28-29页
      · 家蚕抗菌肽基因研究的前景第29页
    参考文献第29-32页
第二部分 研究报告第32-82页
  第三章 研究目的与内容第32-34页
    1 研究目的及意义第32-33页
    2 研究策略与内容第33页
      · 轻链蛋白融合绿色荧光蛋白的基因打靶转基因家蚕研究第33页
      · 轻链蛋白融合绿色荧光蛋白及抗菌肽的基因打靶转基因家蚕研究第33页
    3 技术路线第33-34页
  第四章 实验材料与方法第34-49页
    1 实验材料第34-38页
      · 培养基第34页
      · 常用溶液及缓冲液第34-36页
      · SDS-PAGE 试剂第36-37页
      · Western blot 试剂第37-38页
      · 生物材料第38页
      · 工具酶、试剂盒、杂交膜第38页
    2 常用仪器第38-39页
    3 实验方法第39-47页
      · 碱裂解法少量制备质粒DNA第39-40页
      · 限制性内切酶反应第40页
      · 连接反应第40页
      · CaCl_2 法制备E.coli 感受态细胞第40-41页
      · 重组DNA 的转化第41页
      · 家蚕细胞培养第41-42页
      · 蚕蛾(蚕血)基因组的抽提第42页
      · PCR 扩增目的片段第42-43页
      · 家蚕后部丝腺蛋白质的提取第43页
      · RT-PCR第43-44页
      · SDS-PAGE 电泳和Western blot第44-46页
      · 缫丝第46-47页
    参考文献第47-49页
  第五章 Fib-L 融合GFP 的基因打靶第49-59页
    1 引言第49-50页
    2 材料与方法第50-52页
      · 实验材料第50-51页
      · PCR 引物第51页
      · 打靶载体pSK-FibL-L-GFP–FibL-R 的构建第51-52页
      · 转基因载体转染BmN 细胞第52页
      · 用精子介导法将转基因载体导入家蚕卵第52页
      · 转基因家蚕的筛选第52页
      · 转基因蚕的PCR 和RT-PCR 鉴定第52页
      · 转基因家蚕丝腺表达蛋白的Western blot 检测第52页
      · 缫丝第52页
    3 结果与分析第52-55页
      · 转基因载体的鉴定第52-53页
      · 转基因载体的转家蚕BmN 细胞第53页
      · 转基因家蚕的筛选第53-54页
      · 转基因家蚕的分子鉴定第54-55页
      · 转基因蚕茧经缫丝后的荧光鉴定第55页
    4 讨论第55-56页
    参考文献第56-59页
  第六章 Fib-L 融合GFP 及抗菌肽的转基因家蚕第59-69页
    1 引言第59-60页
    2 材料与方法第60-62页
      · 实验材料第60页
      · 引物及PCR 扩增第60-61页
      · 打靶载体的构建第61-62页
      · 用精子介导法将打靶载体导入家蚕卵第62页
    3 结果与分析第62-66页
      · 打靶载体的构建第62-63页
      · 基因打靶载体的转基因细胞研究第63-64页
      · 融合GFP 与家蚕抗菌肽基因的转基因家蚕的获得第64页
      · 转基因家蚕的荧光及分子生物学鉴定第64-66页
    4 讨论第66-67页
    参考文献第67-69页
  第七章 家蚕SOCS-2 基因的克隆与序列分析第69-81页
    1 引言第69-71页
    2 材料与方法第71-73页
      · 材料第71页
      · BmSOCS-2 基因的克隆及组织表达第71页
      · BmSOCS 基因的生物信息学分析第71-73页
    3 结果与分析第73-77页
      · 家蚕SOCS 基因的电子克隆及RT-PCR第73页
      · BmSOCS-2 基因及其编码氨基酸的结构域分析第73-74页
      · BmSOCS-2 基因的同源性比较第74-75页
      · BmSOCS-2 基因的表达谱分析第75-76页
      · 分子进化树分析第76-77页
    4 讨论第77-79页
    参考文献第79-81页
  结论第81-82页
    1 已取得的成果第81页
    2 有待进行的研究第81-82页
附录一 缩略词中英文对照表第82-84页
附录二 实验中使用的部分载体结构图第84-86页
附录三 攻硕期间科研情况第86-87页
  1 研究课题第86页
  2 发表论文第86-87页
致谢第87-88 页

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