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大鼠肌肉素基因克隆、融合表达及多克隆抗体制备
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大鼠肌肉素基因克隆、融合表达及多克隆抗体制备
论文目录
英文缩写词
第1-3 页
摘要
第3-4 页
Abstract
第4-7 页
前言
第7-14 页
第一部分 大鼠肌肉素基因的克隆与表达
第14-31 页
1 材料和方法
第14-23 页
· 材料
第14-18 页
· 方法
第18-23 页
· 目的基因引物的设计与合成
第18-19 页
· 大鼠肌肉组织总RNA的提取
第19 页
· 目的蛋白基因的扩增与鉴定
第19 页
· 目的DNA和pGEX-5x-3的双酶切
第19-20 页
· 大肠杆菌感受态细胞的制备
第20 页
· 质粒DNA的转化
第20-21 页
· 质粒DNA的提取
第21 页
· 重组原核表达载体的构建
第21 页
· 重组蛋白的表达与鉴定
第21-22 页
· 分析表达蛋白的存在形式
第22 页
· pGEX-5X-3-musclin在原核细胞中表达条件的最优化
第22-23 页
2 结果
第23-31 页
· 大鼠肌肉总RNA的提取
第23 页
· 目的蛋白基因的扩增与鉴定
第23-24 页
· 重组原核表达载体的构建
第24 页
· SDS-PAGE分析重组蛋白
第24-26 页
· 重组蛋白的免疫印迹分析
第26 页
· 表达产物的存在形式
第26-27 页
· pCEX-5X-3-musclin在原核细胞中的表达条件优化结果
第27-31 页
3 讨论
第31 页
第二部分 肌肉素重组蛋白的多克隆抗体制备
第31-40 页
1 材料和方法
第31-36 页
· 材料
第31-33 页
· 方法
第33-36 页
· 重组蛋白的纯化
第33-34 页
· 第一次免疫
第34-35 页
· 第一次加强免疫
第35 页
· 第二次加强免疫
第35 页
· 第三次加强免疫
第35 页
· 多克隆抗体的鉴定
第35-36 页
· 间接ELISA法检测抗体效价
第35-36 页
· Western印迹鉴定抗体特异性
第36 页
2 结果
第36-39 页
· 重组蛋白的纯化
第36-37 页
· 包涵体的洗涤与纯化
第36-37 页
· 重组蛋白的亲和纯化
第37 页
· 免疫兔制备多克隆抗体
第37-38 页
· Western印迹检测抗体特异性
第38-39 页
3 讨论
第39-40 页
结论
第40-41 页
参考文献
第41-47 页
致谢
第47 页
本篇论文共
47
页,
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