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大鼠肌肉素基因克隆、融合表达及多克隆抗体制备

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大鼠肌肉素基因克隆、融合表达及多克隆抗体制备
论文目录
 
英文缩写词第1-3 页
摘要第3-4 页
Abstract第4-7 页
前言第7-14 页
第一部分 大鼠肌肉素基因的克隆与表达第14-31 页
  1 材料和方法第14-23 页
    · 材料第14-18 页
    · 方法第18-23 页
      · 目的基因引物的设计与合成第18-19 页
      · 大鼠肌肉组织总RNA的提取第19 页
      · 目的蛋白基因的扩增与鉴定第19 页
      · 目的DNA和pGEX-5x-3的双酶切第19-20 页
      · 大肠杆菌感受态细胞的制备第20 页
      · 质粒DNA的转化第20-21 页
      · 质粒DNA的提取第21 页
      · 重组原核表达载体的构建第21 页
      · 重组蛋白的表达与鉴定第21-22 页
      · 分析表达蛋白的存在形式第22 页
      · pGEX-5X-3-musclin在原核细胞中表达条件的最优化第22-23 页
  2 结果第23-31 页
    · 大鼠肌肉总RNA的提取第23 页
    · 目的蛋白基因的扩增与鉴定第23-24 页
    · 重组原核表达载体的构建第24 页
    · SDS-PAGE分析重组蛋白第24-26 页
    · 重组蛋白的免疫印迹分析第26 页
    · 表达产物的存在形式第26-27 页
    · pCEX-5X-3-musclin在原核细胞中的表达条件优化结果第27-31 页
  3 讨论第31 页
第二部分 肌肉素重组蛋白的多克隆抗体制备第31-40 页
  1 材料和方法第31-36 页
    · 材料第31-33 页
    · 方法第33-36 页
      · 重组蛋白的纯化第33-34 页
      · 第一次免疫第34-35 页
      · 第一次加强免疫第35 页
      · 第二次加强免疫第35 页
      · 第三次加强免疫第35 页
      · 多克隆抗体的鉴定第35-36 页
        · 间接ELISA法检测抗体效价第35-36 页
        · Western印迹鉴定抗体特异性第36 页
  2 结果第36-39 页
    · 重组蛋白的纯化第36-37 页
      · 包涵体的洗涤与纯化第36-37 页
      · 重组蛋白的亲和纯化第37 页
    · 免疫兔制备多克隆抗体第37-38 页
    · Western印迹检测抗体特异性第38-39 页
  3 讨论第39-40 页
结论第40-41 页
参考文献第41-47 页
致谢第47 页

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