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小尾寒羊朊蛋白核心片段的基因克隆、原核表达、纯化与鉴定

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小尾寒羊朊蛋白核心片段的基因克隆、原核表达、纯化与鉴定
论文目录
 
中文摘要第1-7 页
英文摘要第7-9 页
符号说明第9-10 页
第一部分 文献综述第10-26 页
  1 绵羊痒病研究概况第10-11 页
  2 病原第11-18 页
    · 朊蛋白第11-14 页
    · 朊病毒第14-15 页
    · 朊病毒的形成第15-17 页
    · 抗PrP~(Sc)形成的研究第17 页
    · 朊病毒作用于细胞的可能机制第17-18 页
  3 流行病学第18-24 页
    · 易感动物第18-19 页
    · 潜伏期与发病年龄第19 页
    · 传播途径第19-20 页
    · 临床症状第20-21 页
    · 诊断第21-24 页
  4 防制第24-26 页
第二部分 实验部分第26-64 页
  第一章 小尾寒羊朊蛋白核心片段的基因克隆和序列分析第26-38 页
    1 材料和方法第27-32 页
      · 材料第27-28 页
      · 方法第28-32 页
    2 结果第32-34 页
      · 小尾寒羊PrP~c核心片段基因PCR扩增第32-33 页
      · PCR筛选重组质粒PrP-pET-32a(+)阳性克隆第33-34 页
      · PrP-pET-32a(+)基因序列分析结果第34 页
    3 讨论第34-38 页
  第二章 小尾寒羊朊蛋白核心片段原核表达特性的研究和融合蛋白鉴定第38-55 页
    1 材料和方法第39-43 页
      · 材料第39-40 页
      · 方法第40-43 页
    2 结果第43-52 页
      · 表达质粒PrP-pET-32a(+)在不同条件下的稳定性第43-44 页
      · 不同诱导温度对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响第44-45 页
      · 不同诱导时间对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响第45-46 页
      · 不同浓度AMP对融合蛋白Trx-PrPC27-30表达量的影响第46-48 页
      · 不同IPTG浓度对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响第48-49 页
      · 不同乳糖浓度对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响第49-50 页
      · 融合蛋白Trx-PrPC27-30在细菌E.coli BL21(DE3)内的分布第50 页
      · 融合蛋白Trx-PrP~c27-30的纯化第50-51 页
      · Western-Blot鉴定小尾寒羊PrP~c核心蛋白第51-52 页
    3 讨论第52-55 页
  第三章 串联克隆表达小尾寒羊朊蛋白核心片段初探第55-64 页
    1 材料和方法第56-57 页
      · 酶切第56-57 页
      · 连接第57 页
    2 结果第57-59 页
      · PCR鉴定串联重组表达质PrPx-pET-32a(+)阳性克隆第57-58 页
      · 使用串联克隆PrPx-pET-32a(+)表达和纯化小尾寒羊朊蛋白核心片段第58-59 页
    3 讨论第59-64 页
全文总结第64-65 页
参考文献:第65-69 页
附录一 各种溶液的配制第69-71 页
附录二 PrP-pET-32a(+)测序结果第71-74 页
致谢第74 页

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