论文目录 | |
中文摘要 | 第1-7
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英文摘要 | 第7-9
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符号说明 | 第9-10
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第一部分 文献综述 | 第10-26
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1 绵羊痒病研究概况 | 第10-11
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2 病原 | 第11-18
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· 朊蛋白 | 第11-14
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· 朊病毒 | 第14-15
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· 朊病毒的形成 | 第15-17
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· 抗PrP~(Sc)形成的研究 | 第17
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· 朊病毒作用于细胞的可能机制 | 第17-18
页 |
3 流行病学 | 第18-24
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· 易感动物 | 第18-19
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· 潜伏期与发病年龄 | 第19
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· 传播途径 | 第19-20
页 |
· 临床症状 | 第20-21
页 |
· 诊断 | 第21-24
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4 防制 | 第24-26
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第二部分 实验部分 | 第26-64
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第一章 小尾寒羊朊蛋白核心片段的基因克隆和序列分析 | 第26-38
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1 材料和方法 | 第27-32
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· 材料 | 第27-28
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· 方法 | 第28-32
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2 结果 | 第32-34
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· 小尾寒羊PrP~c核心片段基因PCR扩增 | 第32-33
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· PCR筛选重组质粒PrP-pET-32a(+)阳性克隆 | 第33-34
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· PrP-pET-32a(+)基因序列分析结果 | 第34
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3 讨论 | 第34-38
页 |
第二章 小尾寒羊朊蛋白核心片段原核表达特性的研究和融合蛋白鉴定 | 第38-55
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1 材料和方法 | 第39-43
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· 材料 | 第39-40
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· 方法 | 第40-43
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2 结果 | 第43-52
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· 表达质粒PrP-pET-32a(+)在不同条件下的稳定性 | 第43-44
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· 不同诱导温度对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响 | 第44-45
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· 不同诱导时间对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响 | 第45-46
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· 不同浓度AMP对融合蛋白Trx-PrPC27-30表达量的影响 | 第46-48
页 |
· 不同IPTG浓度对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响 | 第48-49
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· 不同乳糖浓度对融合蛋白Trx-PrP~c27-30表达量的影响 | 第49-50
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· 融合蛋白Trx-PrPC27-30在细菌E.coli BL21(DE3)内的分布 | 第50
页 |
· 融合蛋白Trx-PrP~c27-30的纯化 | 第50-51
页 |
· Western-Blot鉴定小尾寒羊PrP~c核心蛋白 | 第51-52
页 |
3 讨论 | 第52-55
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第三章 串联克隆表达小尾寒羊朊蛋白核心片段初探 | 第55-64
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1 材料和方法 | 第56-57
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· 酶切 | 第56-57
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· 连接 | 第57
页 |
2 结果 | 第57-59
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· PCR鉴定串联重组表达质PrPx-pET-32a(+)阳性克隆 | 第57-58
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· 使用串联克隆PrPx-pET-32a(+)表达和纯化小尾寒羊朊蛋白核心片段 | 第58-59
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3 讨论 | 第59-64
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全文总结 | 第64-65
页 |
参考文献: | 第65-69
页 |
附录一 各种溶液的配制 | 第69-71
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附录二 PrP-pET-32a(+)测序结果 | 第71-74
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致谢 | 第74
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