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传染性法氏囊病病毒VP2基因的表达与单克隆抗体的制备
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传染性法氏囊病病毒VP2基因的表达与单克隆抗体的制备
论文目录
 
摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略语表第12-13页
第一篇 文献综述第13-31页
　　第一章 鸡传染性法氏囊病研究进展第13-26页
　　　　1 IBDV概述第13-14页
　　　　2 IBDV的基因组结构和编码的蛋白第14-16页
　　　　　　· IBDV的基因组第14页
　　　　　　· IBDV编码的蛋白第14-16页
　　　　　　　　· VP1蛋白第14-15页
　　　　　　　　· VP2蛋白第15页
　　　　　　　　· VP3蛋白第15-16页
　　　　　　　　· VP4蛋白第16页
　　　　　　　　· VP5蛋白第16页
　　　　3 IBDV的防控第16-21页
　　　　　　· IBDV的检测方法第16-18页
　　　　　　　　· 免疫学技术第17页
　　　　　　　　· 分子生物学技术第17-18页
　　　　　　· 基因工程疫苗的研究进展第18-21页
　　　　　　　　· 重组亚单位疫苗第18-19页
　　　　　　　　· 重组活载体疫苗第19页
　　　　　　　　· DNA疫苗第19-20页
　　　　　　　　· 多表位疫苗第20-21页
　　　　4 单克隆抗体技术第21-26页
　　　　　　· 单克隆抗体技术的原理及制备方法第21-22页
　　　　　　· 单克隆抗体技术的发展第22-24页
　　　　　　　　· 杂交瘤技术的拓展第22页
　　　　　　　　· 基因工程抗体第22-24页
　　　　　　· IBDV单克隆抗体的应用第24-26页
　　　　　　　　· IBDV的检测第24页
　　　　　　　　· IBDV抗原表位分析第24页
　　　　　　　　· IBDV的防治第24-26页
　　参考文献第26-31页
第二篇 试验研究第31-67页
　　第一章 传染性法氏囊病病毒VP2基因在大肠杆菌中的表达第31-41页
　　　　1 材料与方法第32-34页
　　　　　　· 质粒和菌株第32页
　　　　　　· 主要试剂第32页
　　　　　　· VP2基因原核表达质粒的构建第32-33页
　　　　　　· VP2基因重组表达质粒的诱导表达第33页
　　　　　　· 表达条件的优化第33页
　　　　　　· 表达产物的鉴定第33-34页
　　　　　　　　· 夹心ELISA检测第33页
　　　　　　　　· SDS-PAGE分析第33页
　　　　　　　　· Western-blotting分析第33-34页
　　　　2 结果第34-36页
　　　　　　· VP2基因原核表达质粒的构建第34页
　　　　　　· VP2基因原核表达质粒的诱导表达第34-35页
　　　　　　· 表达条件的优化第35-36页
　　　　　　· 表达产物的鉴定第36页
　　　　　　　　· 夹心ELISA检测第36页
　　　　　　　　· SDS-PAGE分析第36页
　　　　　　　　· Western-blotting分析第36页
　　　　3 讨论第36-38页
　　　　参考文献第38-41页
　　第二章 传染性法氏囊病病毒VP2基因在昆虫细胞中的表达第41-51页
　　　　1 材料与方法第42-44页
　　　　　　· 质粒、菌株和细胞第42页
　　　　　　· 主要试剂第42页
　　　　　　· 重组杆状病毒供体质粒的构建第42-43页
　　　　　　· 重组杆状病毒表达质粒的构建第43页
　　　　　　· 重组杆状病毒的获得第43页
　　　　　　· 重组杆状病毒的鉴定第43-44页
　　　　　　　　· Western blotting分析第43-44页
　　　　　　　　· IFA检测第44页
　　　　　　　　· 电镜检查第44页
　　　　2 结果第44-47页
　　　　　　· 重组杆状病毒供体质粒的构建第44-45页
　　　　　　· 重组杆状病毒表达质粒的构建第45-46页
　　　　　　· 重组杆状病毒的获得第46页
　　　　　　· 重组杆状病毒的鉴定第46-47页
　　　　　　　　· Western-blotting分析第46页
　　　　　　　　· IFA第46-47页
　　　　　　　　· 电镜观察第47页
　　　　3 讨论第47-49页
　　　　参考文献第49-51页
　　第三章 传染性法氏囊病病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备与应用第51-67页
　　　　1 材料与方法第52-57页
　　　　　　· 主要试剂第52页
　　　　　　· 菌株、质粒和毒株第52-53页
　　　　　　· 细胞系和实验动物第53页
　　　　　　· 免疫抗原的制备第53-54页
　　　　　　　　· 大肠杆菌表达的重组VP2蛋白的制备第53页
　　　　　　　　· 杆状病毒表达的重组VP2蛋白的制备第53页
　　　　　　　　· IBDV病毒抗原的制备第53-54页
　　　　　　· 杂交瘤细胞系的建立第54-55页
　　　　　　　　· 动物免疫第54页
　　　　　　　　· 细胞融合第54页
　　　　　　　　· 杂交瘤细胞的筛选第54页
　　　　　　　　· 杂交瘤细胞的克隆化第54-55页
　　　　　　　　· 诱生腹水第55页
　　　　　　　　· 杂交瘤细胞的稳定性第55页
　　　　　　· 单克隆抗体的鉴定第55-56页
　　　　　　　　· 类鉴定第55页
　　　　　　　　· 抗体效价测定第55页
　　　　　　　　· 抗原表位的分析第55页
　　　　　　　　· 特异性鉴定第55-56页
　　　　　　· 单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立第56-57页
　　　　　　　　· 单克隆抗体的纯化第56页
　　　　　　　　· 单克隆抗体的酶结合物的制备第56页
　　　　　　　　· 夹心ELISA试验条件的优化第56-57页
　　　　　　　　· 夹ELISA检测方法的应用第57页
　　　　2 结果第57-61页
　　　　　　· 免疫抗原的制备第57页
　　　　　　· 杂交瘤细胞系的建立第57-58页
　　　　　　　　· 筛选条件的确定第57页
　　　　　　　　· 细胞融合结果第57-58页
　　　　　　　　· 分泌抗体稳定性的测定第58页
　　　　　　· 单克隆抗体的鉴定第58-60页
　　　　　　　　· 亚类与抗体效价第58页
　　　　　　　　· 抗原表位分析第58-59页
　　　　　　　　· 抗体特异性第59-60页
　　　　　　· 单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立第60-61页
　　　　　　　　· 单克隆抗体的纯化和酶结合物的制备第60页
　　　　　　　　· 夹心ELISA试验条件的优化第60-61页
　　　　　　　　· 夹心ELISA检测方法的应用第61页
　　　　3 讨论第61-63页
　　　　参考文献第63-67页
全文总结第67-69页
附录:常用试剂的配制第69-73页
致谢第73-75页
攻读学位期间发表的学术论文目录第75 页

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