论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4
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| ABSTRACT | 第4-10
页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-17
页 |
| · Hira基因的的研究概况 | 第10-14
页 |
| · Hira的结构域特点及功能 | 第10-11
页 |
| · Hira基因在多种生物体中的研究情况 | 第11-14
页 |
| · Hira基因功能的概况 | 第14
页 |
| · 鱼类雌核发育研究概况 | 第14-16
页 |
| · 本研究的内容、目的及意义 | 第16-17
页 |
| 第2章 萍乡红鲫Hira基因cDNA全序列克隆与组织特异性表达研究 | 第17-48
页 |
| · 材料与方法 | 第17-26
页 |
| · 实验材料采集 | 第17
页 |
| · 引物设计 | 第17-18
页 |
| · 萍乡红鲫总RNA的提取 | 第18-19
页 |
| · RNA的检测 | 第19
页 |
| · SMART cDNA的合成 | 第19-20
页 |
| · Hira基因cDNA中间序列克隆 | 第20-23
页 |
| · RACE-PCR扩增Hira基因cDNA全长 | 第23-24
页 |
| · Hira cDNA序列拼接、验证及同源性分析 | 第24-25
页 |
| · 荧光定量PCR检测萍乡红鲫不同组织Hira基因表达 | 第25-26
页 |
| · 结果与分析 | 第26-46
页 |
| · 总RNA的提取 | 第26
页 |
| · Hira基因序列全长的克隆 | 第26-28
页 |
| · 萍乡红鲫Hira基因序列全长基本分析 | 第28-31
页 |
| · 萍乡红鲫Hira序列的生物信息学分析 | 第31-42
页 |
| · 荧光定量PCR检测萍乡红鲫Hira基因组织表达特征 | 第42-46
页 |
| · 讨论 | 第46-48
页 |
| 第3章 萍乡红鲫Hira基因蛋白表达与多克隆抗体制备 | 第48-63
页 |
| · 材料与方法 | 第48-55
页 |
| · 蛋白表达所用引物的设计 | 第48-49
页 |
| · 表达片段PCR扩增 | 第49
页 |
| · PCR产物切胶回收 | 第49
页 |
| · 萍乡红鲫pEASY-El-HIRA重组质粒的构建与鉴定 | 第49-51
页 |
| · 重组质粒的诱导与表达 | 第51
页 |
| · 亲和层析纯化表达的蛋白 | 第51-53
页 |
| · 紫外吸收差法测定蛋白质浓度 | 第53-54
页 |
| · 多克隆抗体制备 | 第54
页 |
| · ELISA检测多克隆抗体效价 | 第54-55
页 |
| · 结果 | 第55-61
页 |
| · 目的表达片段PCR扩增结果 | 第55-56
页 |
| · PCR产物回收结果 | 第56
页 |
| · pEASY-El-HIRA重组质粒的双酶切鉴定 | 第56-57
页 |
| · 目的蛋白的诱导表达 | 第57-58
页 |
| · HIRA融合蛋白的分析与纯化 | 第58-59
页 |
| · HIRA融合蛋白的浓度测定 | 第59-60
页 |
| · ELISA间接法测定多克隆抗体效价 | 第60-61
页 |
| · 讨论 | 第61-63
页 |
| 第4章 结论与展望 | 第63-64
页 |
| · 结论 | 第63
页 |
| · 进一步工作的方向 | 第63-64
页 |
| 致谢 | 第64-65
页 |
| 参考文献 | 第65-70
页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第70
页 |
