论文目录 | |
摘要 | 第1-4
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ABSTRACT | 第4-10
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第1章 文献综述 | 第10-17
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· Hira基因的的研究概况 | 第10-14
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· Hira的结构域特点及功能 | 第10-11
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· Hira基因在多种生物体中的研究情况 | 第11-14
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· Hira基因功能的概况 | 第14
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· 鱼类雌核发育研究概况 | 第14-16
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· 本研究的内容、目的及意义 | 第16-17
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第2章 萍乡红鲫Hira基因cDNA全序列克隆与组织特异性表达研究 | 第17-48
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· 材料与方法 | 第17-26
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· 实验材料采集 | 第17
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· 引物设计 | 第17-18
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· 萍乡红鲫总RNA的提取 | 第18-19
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· RNA的检测 | 第19
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· SMART cDNA的合成 | 第19-20
页 |
· Hira基因cDNA中间序列克隆 | 第20-23
页 |
· RACE-PCR扩增Hira基因cDNA全长 | 第23-24
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· Hira cDNA序列拼接、验证及同源性分析 | 第24-25
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· 荧光定量PCR检测萍乡红鲫不同组织Hira基因表达 | 第25-26
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· 结果与分析 | 第26-46
页 |
· 总RNA的提取 | 第26
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· Hira基因序列全长的克隆 | 第26-28
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· 萍乡红鲫Hira基因序列全长基本分析 | 第28-31
页 |
· 萍乡红鲫Hira序列的生物信息学分析 | 第31-42
页 |
· 荧光定量PCR检测萍乡红鲫Hira基因组织表达特征 | 第42-46
页 |
· 讨论 | 第46-48
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第3章 萍乡红鲫Hira基因蛋白表达与多克隆抗体制备 | 第48-63
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· 材料与方法 | 第48-55
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· 蛋白表达所用引物的设计 | 第48-49
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· 表达片段PCR扩增 | 第49
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· PCR产物切胶回收 | 第49
页 |
· 萍乡红鲫pEASY-El-HIRA重组质粒的构建与鉴定 | 第49-51
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· 重组质粒的诱导与表达 | 第51
页 |
· 亲和层析纯化表达的蛋白 | 第51-53
页 |
· 紫外吸收差法测定蛋白质浓度 | 第53-54
页 |
· 多克隆抗体制备 | 第54
页 |
· ELISA检测多克隆抗体效价 | 第54-55
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· 结果 | 第55-61
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· 目的表达片段PCR扩增结果 | 第55-56
页 |
· PCR产物回收结果 | 第56
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· pEASY-El-HIRA重组质粒的双酶切鉴定 | 第56-57
页 |
· 目的蛋白的诱导表达 | 第57-58
页 |
· HIRA融合蛋白的分析与纯化 | 第58-59
页 |
· HIRA融合蛋白的浓度测定 | 第59-60
页 |
· ELISA间接法测定多克隆抗体效价 | 第60-61
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· 讨论 | 第61-63
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第4章 结论与展望 | 第63-64
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· 结论 | 第63
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· 进一步工作的方向 | 第63-64
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致谢 | 第64-65
页 |
参考文献 | 第65-70
页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第70
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