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基于外分泌囊泡(OMV)的百日咳疫苗的研究

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基于外分泌囊泡(OMV)的百日咳疫苗的研究
论文目录
 
中文摘要第1-8页
abstract第8-10页
缩略词表第15-16页
第一章 前言第16-31页
    1.1 百日咳与百日咳疫苗研究进展第16-22页
        1.1.1 百日咳与百日咳杆菌第16-18页
        1.1.2 百日咳的临床特征第18-19页
        1.1.3 百日咳疫苗第19-22页
    1.2 细菌外分泌囊泡研究进展第22-28页
        1.2.1 细菌外分泌囊泡第22页
        1.2.2 细菌外分泌囊泡的功能第22-24页
        1.2.3 细菌外分泌囊泡的分离和纯化第24-26页
        1.2.4 细菌外分泌囊泡的分类第26页
        1.2.5 细菌外分泌囊泡的表征第26-27页
        1.2.6 细菌外分泌囊泡的应用第27-28页
    1.3 立题依据、创新点及试验设计第28-31页
        1.3.1 立题依据第28-29页
        1.3.2 特色与创新第29页
        1.3.3 试验设计第29-31页
第二章 百日咳杆菌OMV的制备与表征第31-44页
    2.1 实验材料与仪器第31-34页
        2.1.1 主要仪器第31-32页
        2.1.2 菌种第32页
        2.1.3 主要试剂第32-33页
        2.1.4 试剂的配制第33-34页
    2.2 实验方法第34-39页
        2.2.1 百日咳杆菌的摇瓶培养第34页
        2.2.2 百日咳杆菌的发酵培养第34-35页
        2.2.3 超速离心法分离和纯化OMV第35页
        2.2.4 密度梯度离心法分离和纯化OMV第35-36页
        2.2.5 BCA法测定蛋白质浓度第36页
        2.2.6 冷冻电镜样品的制备及观察第36-37页
        2.2.7 透射电镜样品的制备及观察第37页
        2.2.8 OMV粒径的测量第37页
        2.2.9 SDS-PAGE第37页
        2.2.10 Western blotting第37-38页
        2.2.11 蛋白质组学第38-39页
    2.3 实验结果第39-42页
        2.3.1 OMV的结构表征第39-40页
        2.3.2 OMV组分分析第40-42页
        2.3.3 OMV产率的计算第42页
    2.4 讨论第42-43页
    2.5 小结第43-44页
第三章 百日咳杆菌OMV的免疫原性和保护性研究第44-63页
    3.1 实验材料与仪器第44-46页
        3.1.1 主要仪器第44页
        3.1.2 细胞、菌株及小鼠品系第44-45页
        3.1.3 主要试剂第45页
        3.1.4 试剂的配制第45-46页
    3.2 实验方法第46-50页
        3.2.1 OMV脱毒第46页
        3.2.2 CHO簇集实验检测PT毒性第46-47页
        3.2.3 疫苗的制备第47页
        3.2.4 动物伦理、动物免疫及攻毒第47页
        3.2.5 血样采集及血清制备第47-48页
        3.2.6 ELISA法检测血清IgG滴度第48页
        3.2.7 ELISA法检测血清IgG抗体亚型第48-49页
        3.2.8 脾细胞的制备与抗原刺激第49页
        3.2.9 ELISA法检测细胞因子浓度第49-50页
        3.2.10 统计分析第50页
    3.3 实验结果第50-59页
        3.3.1 OMV脱毒结果第50-51页
        3.3.2 百日咳疫苗免疫保护力第51-52页
        3.3.3 血清抗原特异性IgG水平第52-55页
        3.3.4 血清中Ig G抗体亚型结果第55-57页
        3.3.5 细胞因子检测结果第57-59页
    3.4 讨论第59-62页
    3.5 小结第62-63页
第四章 百日咳杆菌OMV的稳定性研究第63-75页
    4.1 实验材料与仪器第63-64页
        4.1.1 主要仪器第63页
        4.1.2 抗体第63页
        4.1.3 主要试剂第63页
        4.1.4 试剂的配制第63-64页
    4.2 实验方法第64-66页
        4.2.1 OMV冻干样品的制备第64页
        4.2.2 样品的保存第64-65页
        4.2.3 粒径及zeta电位的测量方法第65页
        4.2.4 Western blotting第65页
        4.2.5 荧光强度的检测方法第65-66页
    4.3 实验结果第66-73页
        4.3.1 保存条件对OMV结构的影响第66-69页
        4.3.2 保存条件对 OMV 组成的影响第69-73页
    4.4 讨论第73-74页
    4.5 小结第74-75页
第五章 结论与展望第75-76页
参考文献第76-86页
附表第86-90页
作者简介及科研成果第90-91页
致谢第91-92页

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