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智能响应型纳米纤维膜药物递送系统治疗骨关节炎的应用研究

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智能响应型纳米纤维膜药物递送系统治疗骨关节炎的应用研究
论文目录
 
个人简历第1-8页
摘要第8-11页
ABSTRACT第11-13页
前言第14-17页
第一部分 PCL/PEGDA-EDT@rGO-Pue静电纺丝纳米纤维膜的制备及表征研究第17-31页
    引言第17-18页
    1 实验仪器与材料第18-19页
        1.1 实验仪器第18页
        1.2 实验材料与试剂第18-19页
    2 实验方法第19-23页
        2.0 PEGDA-EDT的合成第19-20页
        2.1 PEGDA-EDT的表征第20页
        2.2 rGO装载Pue第20页
        2.3 静电纺丝纳米纤维膜的制备第20-21页
        2.4 静电纺丝纳米纤维膜的表征第21页
        2.5 静电纺丝纳米纤维膜的ROS响应性和体外药物释放第21-22页
        2.6 统计分析第22-23页
    3 实验结果第23-29页
        3.1 PEGDA-EDT的合成及表征第23-24页
        3.2 rGO载药率第24页
        3.3 静电纺丝纳米纤维膜的合成及表征第24-27页
        3.4 静电纺丝纳米纤维膜的ROS响应性验证第27-28页
        3.5 静电纺丝纳米纤维膜DDS体外药物释放第28-29页
    4 讨论第29-31页
第二部分 智能响应型纳米纤维膜药物递送系统治疗骨关节炎的体外研究第31-63页
    引言第31-32页
    1 实验仪器与材料第32-34页
        1.1 实验仪器第32-33页
        1.2 实验材料与试剂第33-34页
        1.3 实验动物第34页
    2 实验方法第34-47页
        2.1 实验试剂配置第34-35页
        2.2 软骨细胞提取及培养第35-36页
        2.3 材料细胞毒性与细胞相容性试验第36-38页
            2.3.1 实验分组第36-37页
            2.3.2 MTT法细胞毒性试验第37页
            2.3.3 Calcein-AM/PI染色活死细胞检测第37-38页
            2.3.4 材料细胞黏附力检测第38页
        2.4 Pue治疗OA最适浓度筛选第38-39页
        2.5 智能响应型纳米纤维膜DDS递送药物抗氧化治疗OA的体外研究第39-47页
            2.5.1 IL-1β处理软骨细胞诱导体外OA模型及实验分组第39页
            2.5.2 CCK-8检测OA软骨细胞存活率第39-40页
            2.5.3 Calcein-AM/PI染色活死细胞检测第40页
            2.5.4 鬼笔环肽/Hoechst 33258染色观察细胞骨架第40页
            2.5.5 扫描电镜观察细胞形态第40-41页
            2.5.6 软骨细胞糖胺聚糖GAG含量检测第41-42页
            2.5.7 总RNA提取及qRT-PCR检测第42-43页
            2.5.8 软骨细胞内SOD、CAT、GSH检测第43-46页
            2.5.9 流式细胞术检测第46页
            2.5.10 免疫荧光染色第46-47页
        2.6 统计学分析第47页
    3 实验结果第47-61页
        3.1 材料细胞毒性与细胞相容性实验第47-50页
            3.1.1 MTT检测纳米纤维膜对软骨细胞毒性第48-49页
            3.1.2 Calcein-AM/PI活死细胞染色观察软骨细胞在纳米纤维膜上生长情况第49页
            3.1.3 SEM观察软骨细胞在纳米纤维膜上生长形态第49-50页
        3.2 Pue治疗OA最适浓度第50-51页
        3.3 智能响应型纳米纤维膜DDS治疗OA第51-61页
            3.3.1 CCK-8检测OA软骨细胞存活率第51-52页
            3.3.2 流式细胞术检测OA软骨细胞凋亡率第52-53页
            3.3.3 活死细胞染色观察OA软骨细胞凋亡第53-54页
            3.3.4 鬼笔环肽染色观察OA软骨细胞骨架形态第54页
            3.3.5 扫描电镜观察OA软骨细胞形态第54-55页
            3.3.6 OA软骨细胞GAG含量第55-56页
            3.3.7 qRT-PCR检测抗氧化蛋白及炎症因子基因表达第56-57页
            3.3.8 细胞内抗氧化蛋白检测第57-58页
            3.3.9 流式细胞术检测细胞内ROS第58-59页
            3.3.10 免疫荧光检测软骨细胞内蛋白表达情况第59-61页
    4 讨论第61-63页
第三部分 智能响应型纳米纤维膜药物递送系统治疗骨关节炎的体内研究第63-78页
    引言第63页
    1 实验仪器与材料第63-65页
        1.1 实验仪器第63-64页
        1.2 实验材料与试剂第64页
        1.3 实验动物第64-65页
    2 实验方法第65-71页
        2.1 实验试剂配制第65-66页
        2.2 OA模型大鼠构建第66页
        2.3 纳米纤维膜DDS置入关节腔第66-67页
        2.4 膝关节软骨面大体观察及评分第67页
        2.5 膝关节组织固定、脱钙及制作石蜡切片第67-68页
        2.6 膝关节组织学染色及评分第68-69页
        2.7 膝关节免疫组织化学染色第69-70页
        2.8 膝关节软骨总蛋白提取及Western Blot检测第70-71页
        2.9 统计学分析第71页
    3 实验结果第71-76页
        3.1 膝关节软骨面大体观察及评分第71-72页
        3.2 HE染色观察关节结构第72-73页
        3.3 膝关节番红O-固绿染色观察关节软骨及评分第73-74页
        3.4 免疫组化染色第74-75页
        3.5 Western-blot检测软骨组织内相关蛋白表达第75-76页
    4 讨论第76-78页
结论第78-79页
参考文献第79-88页
综述第88-109页
    参考文献第99-109页
附录: 主要英文缩略词语第109-110页
致谢第110-111页
攻读硕士学位期间发表的论文第111页

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