论文目录 | |
个人简历 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
前言 | 第14-17页 |
第一部分 PCL/PEGDA-EDT@rGO-Pue静电纺丝纳米纤维膜的制备及表征研究 | 第17-31页 |
引言 | 第17-18页 |
1 实验仪器与材料 | 第18-19页 |
1.1 实验仪器 | 第18页 |
1.2 实验材料与试剂 | 第18-19页 |
2 实验方法 | 第19-23页 |
2.0 PEGDA-EDT的合成 | 第19-20页 |
2.1 PEGDA-EDT的表征 | 第20页 |
2.2 rGO装载Pue | 第20页 |
2.3 静电纺丝纳米纤维膜的制备 | 第20-21页 |
2.4 静电纺丝纳米纤维膜的表征 | 第21页 |
2.5 静电纺丝纳米纤维膜的ROS响应性和体外药物释放 | 第21-22页 |
2.6 统计分析 | 第22-23页 |
3 实验结果 | 第23-29页 |
3.1 PEGDA-EDT的合成及表征 | 第23-24页 |
3.2 rGO载药率 | 第24页 |
3.3 静电纺丝纳米纤维膜的合成及表征 | 第24-27页 |
3.4 静电纺丝纳米纤维膜的ROS响应性验证 | 第27-28页 |
3.5 静电纺丝纳米纤维膜DDS体外药物释放 | 第28-29页 |
4 讨论 | 第29-31页 |
第二部分 智能响应型纳米纤维膜药物递送系统治疗骨关节炎的体外研究 | 第31-63页 |
引言 | 第31-32页 |
1 实验仪器与材料 | 第32-34页 |
1.1 实验仪器 | 第32-33页 |
1.2 实验材料与试剂 | 第33-34页 |
1.3 实验动物 | 第34页 |
2 实验方法 | 第34-47页 |
2.1 实验试剂配置 | 第34-35页 |
2.2 软骨细胞提取及培养 | 第35-36页 |
2.3 材料细胞毒性与细胞相容性试验 | 第36-38页 |
2.3.1 实验分组 | 第36-37页 |
2.3.2 MTT法细胞毒性试验 | 第37页 |
2.3.3 Calcein-AM/PI染色活死细胞检测 | 第37-38页 |
2.3.4 材料细胞黏附力检测 | 第38页 |
2.4 Pue治疗OA最适浓度筛选 | 第38-39页 |
2.5 智能响应型纳米纤维膜DDS递送药物抗氧化治疗OA的体外研究 | 第39-47页 |
2.5.1 IL-1β处理软骨细胞诱导体外OA模型及实验分组 | 第39页 |
2.5.2 CCK-8检测OA软骨细胞存活率 | 第39-40页 |
2.5.3 Calcein-AM/PI染色活死细胞检测 | 第40页 |
2.5.4 鬼笔环肽/Hoechst 33258染色观察细胞骨架 | 第40页 |
2.5.5 扫描电镜观察细胞形态 | 第40-41页 |
2.5.6 软骨细胞糖胺聚糖GAG含量检测 | 第41-42页 |
2.5.7 总RNA提取及qRT-PCR检测 | 第42-43页 |
2.5.8 软骨细胞内SOD、CAT、GSH检测 | 第43-46页 |
2.5.9 流式细胞术检测 | 第46页 |
2.5.10 免疫荧光染色 | 第46-47页 |
2.6 统计学分析 | 第47页 |
3 实验结果 | 第47-61页 |
3.1 材料细胞毒性与细胞相容性实验 | 第47-50页 |
3.1.1 MTT检测纳米纤维膜对软骨细胞毒性 | 第48-49页 |
3.1.2 Calcein-AM/PI活死细胞染色观察软骨细胞在纳米纤维膜上生长情况 | 第49页 |
3.1.3 SEM观察软骨细胞在纳米纤维膜上生长形态 | 第49-50页 |
3.2 Pue治疗OA最适浓度 | 第50-51页 |
3.3 智能响应型纳米纤维膜DDS治疗OA | 第51-61页 |
3.3.1 CCK-8检测OA软骨细胞存活率 | 第51-52页 |
3.3.2 流式细胞术检测OA软骨细胞凋亡率 | 第52-53页 |
3.3.3 活死细胞染色观察OA软骨细胞凋亡 | 第53-54页 |
3.3.4 鬼笔环肽染色观察OA软骨细胞骨架形态 | 第54页 |
3.3.5 扫描电镜观察OA软骨细胞形态 | 第54-55页 |
3.3.6 OA软骨细胞GAG含量 | 第55-56页 |
3.3.7 qRT-PCR检测抗氧化蛋白及炎症因子基因表达 | 第56-57页 |
3.3.8 细胞内抗氧化蛋白检测 | 第57-58页 |
3.3.9 流式细胞术检测细胞内ROS | 第58-59页 |
3.3.10 免疫荧光检测软骨细胞内蛋白表达情况 | 第59-61页 |
4 讨论 | 第61-63页 |
第三部分 智能响应型纳米纤维膜药物递送系统治疗骨关节炎的体内研究 | 第63-78页 |
引言 | 第63页 |
1 实验仪器与材料 | 第63-65页 |
1.1 实验仪器 | 第63-64页 |
1.2 实验材料与试剂 | 第64页 |
1.3 实验动物 | 第64-65页 |
2 实验方法 | 第65-71页 |
2.1 实验试剂配制 | 第65-66页 |
2.2 OA模型大鼠构建 | 第66页 |
2.3 纳米纤维膜DDS置入关节腔 | 第66-67页 |
2.4 膝关节软骨面大体观察及评分 | 第67页 |
2.5 膝关节组织固定、脱钙及制作石蜡切片 | 第67-68页 |
2.6 膝关节组织学染色及评分 | 第68-69页 |
2.7 膝关节免疫组织化学染色 | 第69-70页 |
2.8 膝关节软骨总蛋白提取及Western Blot检测 | 第70-71页 |
2.9 统计学分析 | 第71页 |
3 实验结果 | 第71-76页 |
3.1 膝关节软骨面大体观察及评分 | 第71-72页 |
3.2 HE染色观察关节结构 | 第72-73页 |
3.3 膝关节番红O-固绿染色观察关节软骨及评分 | 第73-74页 |
3.4 免疫组化染色 | 第74-75页 |
3.5 Western-blot检测软骨组织内相关蛋白表达 | 第75-76页 |
4 讨论 | 第76-78页 |
结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-88页 |
综述 | 第88-109页 |
参考文献 | 第99-109页 |
附录: 主要英文缩略词语 | 第109-110页 |
致谢 | 第110-111页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第111页 |