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基于NF-κB和PI3K/Akt信号通路探讨鹅不食草心菊内酯对肝星状细胞的抑制作用机制

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基于NF-κB和PI3K/Akt信号通路探讨鹅不食草心菊内酯对肝星状细胞的抑制作用机制
论文目录
 
个人简历第1-7页
中英文缩略词表第7-10页
摘要第10-15页
ABSTRACT第15-20页
前言第21-23页
1. 材料第23-27页
    1.1 细胞株来源第23页
    1.2 药物与试剂第23-25页
    1.3 仪器第25-26页
    1.4 主要试剂及液体配制第26-27页
2. 实验方法第27-48页
    2.1 细胞培养第27页
    2.2 细胞传代第27页
    2.3 细胞冻存第27-28页
    2.4 细胞转染第28页
    2.5 Helenalin提取分离和成分鉴定第28-29页
    2.6 MTT法检测Helenalin细胞毒性实验第29-30页
    2.7 MTT法检测Helenalin对HSCs增殖的影响实验第30-32页
    2.8 试剂盒检测Helenalin对HSCs AST和ALT含量的影响实验第32-33页
    2.9 试剂盒检测Helenalin对HSCs LDH含量的影响实验第33-34页
    2.10 细胞划痕实验观察Helenalin对HSCs迁移的影响第34-35页
    2.11 集落形成实验观察Helenalin对HSCs集落形成的影响第35页
    2.12 AO/EB荧光染色实验观察Helenalin对HSCs细胞凋亡的影响第35-36页
    2.13 ELISA试剂盒检测Helenalin对HSCs IL-6和TNF-α含量的影响第36-37页
    2.14 流式细胞术检测Helenalin对HSCs细胞凋亡的影响第37-38页
    2.15 Western blot法检测Helenalin对HSCs蛋白表达的影响第38-41页
    2.16 实时荧光定量PCR法检测Helenalin对HSCs基因表达的影响第41-46页
    2.17 实时荧光定量PCR法检测Helenalin对miR-200a基因表达的影响第46-47页
    2.18 数据处理和统计分析第47-48页
3. 结果第48-89页
    3.1 MTT法检测Helenalin对HSCs的细胞毒性作用第48-50页
    3.2 MTT法检测Helenalin对HSCs增殖的影响第50-52页
    3.3 试剂盒检测Helenalin对HSCs AST和ALT含量的影响第52-55页
    3.4 试剂盒检测Helenalin对HSCs LDH含量的影响第55-58页
    3.5 Helenalin对HSCs细胞迁移的影响第58-59页
    3.6 Helenalin对HSCs细胞集落形成的影响第59-60页
    3.7 AO/EB荧光染色法观察Helenalin对HSCs细胞凋亡的影响第60-63页
    3.8 流式细胞术检测Helenalin对HSCs凋亡的影响第63-66页
    3.9 ELISA试剂盒检测Helenalin对HSCs IL-6和TNF-α含量的影响第66-67页
    3.10 Western blot法检测Helenalin对HSCs IL-6、TGF-β1和TNF-α蛋白表达的影响第67-69页
    3.11 Western blot法检测Helenalin对HSCs Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达的影响第69-70页
    3.12 Western blot法检测Helenalin对HSCs α-SMA、Collagen-Ⅰ和Collagen-Ⅲ蛋白表达的影响第70-74页
    3.13 Western blot法检测Helenalin对HSCs MMP-9和TIMP-1蛋白表达的影响第74-76页
    3.14 Western blot法检测Helenalin对HSCs NF-κB信号通路蛋白表达的影响第76-78页
    3.15 Western blot法检测Helenalin对HSCs PI3K/Akt信号通路蛋白表达的影响第78-79页
    3.16 实时荧光定量PCR检测Helenalin对HSCs PI3K、Akt、mTOR、P70S6K和NF-κb p65 mRNA表达的影响第79-85页
    3.17 实时荧光定量PCR检测Helenalin对HSCs内miR-200a mRNA表达的影响第85-86页
    3.18 转染效率检测第86-87页
    3.19 Western blot法检测miR-200a对TLR4蛋白表达的影响第87-89页
4. 讨论第89-97页
全文总结第97-98页
参考文献第98-103页
综述第103-117页
    参考文献第111-117页
致谢第117-118页
攻读学位期间发表的学术论文目录第118-119页

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