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烟草种子和土壤携带三种病毒对烟苗的侵染分析

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烟草种子和土壤携带三种病毒对烟苗的侵染分析
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-7页
缩写词及英汉对照第7-12页
1 前言第12-21页
  · 烟草病毒病概述第12-15页
  · 烟草3种主要病毒的生物学及分子生物学特性第15-19页
    · 烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus, TMV)第15-16页
    · 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)第16-18页
    · 马铃薯Y病毒(Potato virus Y, PVY)第18-19页
  · 酶联免疫吸附测定(Enzyme- linked immunosorbent assay, ELISA)第19页
  · 实时荧光定量PCR技术第19-20页
  · 本研究的目的与意义第20-21页
2 材料与方法第21-35页
  · 实验材料第21-26页
    · 植物材料第21-22页
    · 土壤样品第22-23页
    · 病毒来源第23页
    · 菌株及抗血清第23页
    · 主要试剂第23页
    · 主要试剂的配制第23-25页
    · 主要仪器第25-26页
    · 数据分析第26页
  · 方法第26-35页
    · RNA提取用具的处理第26页
    · 感染病毒的烟草叶片总RNA的抽提第26-27页
    · 感染病毒烟田土壤总RNA的抽提第27-28页
    · 实时荧光定量PCR标准曲线的制作第28-31页
      · 引物的设计与合成第28-29页
      · 病毒TMV、CMV、PVY质粒DNA标准品的制备第29-31页
    · 病毒TMV、CMV及PVY的实时荧光定量第31-32页
    · 种子浸泡、浸根及育苗基质带毒的处理方法第32-33页
      · 种子浸泡处理方法第32页
      · 烟苗浸根处理方法第32-33页
      · 育苗基质带毒处理方法第33页
    · 不同方法处理后烟苗中三种病毒的检测第33-34页
      · 间接ELISA(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测第33-34页
      · RT-PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)检测第34页
      · RT-qPCR(Reverse Transcription Quantitation-Polymerase Chain Reaction)检测第34页
    · 实时荧光定量 PCR 对田间土壤样品的检测第34-35页
3 结果与分析第35-64页
  · 烟草叶片总RNA的抽提第35页
  · 烟草接种叶片(接种体)中TMV、CMV和PVY含量的检测第35-41页
    · 病毒TMV、CMV和PVY标准曲线标准品(质粒DNA)的制备第35-36页
    · 实时荧光定量PCR引物设计与筛选第36-37页
    · 实时荧光定量PCR体系的建立第37-38页
    · 实时荧光定量PCR测定烟草叶片中TMV含量第38-39页
    · 实时荧光定量PCR测定烟草叶片中CMV含量第39-40页
    · 实时荧光定量PCR测定烟草叶片中PVY含量第40-41页
  · 种子浸泡、浸根和育苗基质处理后三种病毒对烟苗的侵染第41-58页
    · 各浓度病毒汁液中三种病毒的具体含量第41-42页
    · 种子浸泡处理后三种病毒对烟苗的侵染第42-48页
      · 种子浸泡 24h后育苗三种病毒的ELISA检测第42-43页
      · 种子浸泡 24h后育苗三种病毒的RT-PCR检测第43-45页
      · 种子浸泡 24h后育苗苗期烟苗的发病情况第45-46页
      · 种子浸泡 24h后放置3个月育苗三种病毒的ELISA检测第46-47页
      · 种子浸泡 24h后放置5个月育苗三种病毒的ELISA检测第47-48页
    · 浸根处理后三种病毒对烟苗的侵染第48-52页
      · 浸根处理 2 h后烟苗中三种病毒的ELISA检测第48-49页
      · 浸根处理 2 h后烟苗中三种病毒RT-PCR检测第49-51页
      · 浸根处理 2h后苗期烟苗的发病情况第51-52页
    · 育苗基质处理后育苗三种病毒对烟苗的侵染第52-58页
      · 育苗基质处理 1d后育苗三种病毒的ELISA检测第52-53页
      · 育苗基质处理 1d后育苗三种病毒的RT-PCR检测第53-55页
      · 育苗基质处理 1d后育苗苗期烟苗的发病情况第55-56页
      · 育苗基质处理后放置3个月育苗三种病毒的ELISA检测第56-57页
      · 育苗基质处理后放置5个月育苗三种病毒的ELISA检测第57-58页
  · 毒源烟株收种子放置1个月后育苗三种病毒对烟苗的侵染第58-59页
  · 大田土壤中三种病毒对烟苗的侵染及病毒的定量第59-64页
    · 大田采集土样育苗三种病毒对烟苗的侵染第59-62页
    · 大田采集土样中三种病毒的定量测定第62-64页
4 结论与讨论第64-71页
  · 结论第64页
  · 讨论第64-71页
    · 烟草叶片TMV、CMV和PVY含量的分析第64-66页
    · 三种病毒对烟苗的侵染分析第66-69页
      · 种子携带三种病毒对烟苗的侵染分析第66-67页
      · 浸根处理三种病毒对烟苗的侵染分析第67页
      · 育苗基质/土壤带毒对烟苗的侵染分析第67-69页
    · 土壤中三种病毒的分子检测第69-71页
致谢第71-72页
参考文献第72-79页
附录A第79-82页
附录B第82页

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