论文目录 | |
摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩写词及英汉对照 | 第7-12页 |
1 前言 | 第12-21页 |
· 烟草病毒病概述 | 第12-15页 |
· 烟草3种主要病毒的生物学及分子生物学特性 | 第15-19页 |
· 烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus, TMV) | 第15-16页 |
· 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV) | 第16-18页 |
· 马铃薯Y病毒(Potato virus Y, PVY) | 第18-19页 |
· 酶联免疫吸附测定(Enzyme- linked immunosorbent assay, ELISA) | 第19页 |
· 实时荧光定量PCR技术 | 第19-20页 |
· 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-35页 |
· 实验材料 | 第21-26页 |
· 植物材料 | 第21-22页 |
· 土壤样品 | 第22-23页 |
· 病毒来源 | 第23页 |
· 菌株及抗血清 | 第23页 |
· 主要试剂 | 第23页 |
· 主要试剂的配制 | 第23-25页 |
· 主要仪器 | 第25-26页 |
· 数据分析 | 第26页 |
· 方法 | 第26-35页 |
· RNA提取用具的处理 | 第26页 |
· 感染病毒的烟草叶片总RNA的抽提 | 第26-27页 |
· 感染病毒烟田土壤总RNA的抽提 | 第27-28页 |
· 实时荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第28-31页 |
· 引物的设计与合成 | 第28-29页 |
· 病毒TMV、CMV、PVY质粒DNA标准品的制备 | 第29-31页 |
· 病毒TMV、CMV及PVY的实时荧光定量 | 第31-32页 |
· 种子浸泡、浸根及育苗基质带毒的处理方法 | 第32-33页 |
· 种子浸泡处理方法 | 第32页 |
· 烟苗浸根处理方法 | 第32-33页 |
· 育苗基质带毒处理方法 | 第33页 |
· 不同方法处理后烟苗中三种病毒的检测 | 第33-34页 |
· 间接ELISA(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测 | 第33-34页 |
· RT-PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)检测 | 第34页 |
· RT-qPCR(Reverse Transcription Quantitation-Polymerase Chain Reaction)检测 | 第34页 |
· 实时荧光定量 PCR 对田间土壤样品的检测 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-64页 |
· 烟草叶片总RNA的抽提 | 第35页 |
· 烟草接种叶片(接种体)中TMV、CMV和PVY含量的检测 | 第35-41页 |
· 病毒TMV、CMV和PVY标准曲线标准品(质粒DNA)的制备 | 第35-36页 |
· 实时荧光定量PCR引物设计与筛选 | 第36-37页 |
· 实时荧光定量PCR体系的建立 | 第37-38页 |
· 实时荧光定量PCR测定烟草叶片中TMV含量 | 第38-39页 |
· 实时荧光定量PCR测定烟草叶片中CMV含量 | 第39-40页 |
· 实时荧光定量PCR测定烟草叶片中PVY含量 | 第40-41页 |
· 种子浸泡、浸根和育苗基质处理后三种病毒对烟苗的侵染 | 第41-58页 |
· 各浓度病毒汁液中三种病毒的具体含量 | 第41-42页 |
· 种子浸泡处理后三种病毒对烟苗的侵染 | 第42-48页 |
· 种子浸泡 24h后育苗三种病毒的ELISA检测 | 第42-43页 |
· 种子浸泡 24h后育苗三种病毒的RT-PCR检测 | 第43-45页 |
· 种子浸泡 24h后育苗苗期烟苗的发病情况 | 第45-46页 |
· 种子浸泡 24h后放置3个月育苗三种病毒的ELISA检测 | 第46-47页 |
· 种子浸泡 24h后放置5个月育苗三种病毒的ELISA检测 | 第47-48页 |
· 浸根处理后三种病毒对烟苗的侵染 | 第48-52页 |
· 浸根处理 2 h后烟苗中三种病毒的ELISA检测 | 第48-49页 |
· 浸根处理 2 h后烟苗中三种病毒RT-PCR检测 | 第49-51页 |
· 浸根处理 2h后苗期烟苗的发病情况 | 第51-52页 |
· 育苗基质处理后育苗三种病毒对烟苗的侵染 | 第52-58页 |
· 育苗基质处理 1d后育苗三种病毒的ELISA检测 | 第52-53页 |
· 育苗基质处理 1d后育苗三种病毒的RT-PCR检测 | 第53-55页 |
· 育苗基质处理 1d后育苗苗期烟苗的发病情况 | 第55-56页 |
· 育苗基质处理后放置3个月育苗三种病毒的ELISA检测 | 第56-57页 |
· 育苗基质处理后放置5个月育苗三种病毒的ELISA检测 | 第57-58页 |
· 毒源烟株收种子放置1个月后育苗三种病毒对烟苗的侵染 | 第58-59页 |
· 大田土壤中三种病毒对烟苗的侵染及病毒的定量 | 第59-64页 |
· 大田采集土样育苗三种病毒对烟苗的侵染 | 第59-62页 |
· 大田采集土样中三种病毒的定量测定 | 第62-64页 |
4 结论与讨论 | 第64-71页 |
· 结论 | 第64页 |
· 讨论 | 第64-71页 |
· 烟草叶片TMV、CMV和PVY含量的分析 | 第64-66页 |
· 三种病毒对烟苗的侵染分析 | 第66-69页 |
· 种子携带三种病毒对烟苗的侵染分析 | 第66-67页 |
· 浸根处理三种病毒对烟苗的侵染分析 | 第67页 |
· 育苗基质/土壤带毒对烟苗的侵染分析 | 第67-69页 |
· 土壤中三种病毒的分子检测 | 第69-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-79页 |
附录A | 第79-82页 |
附录B | 第82页 |